简介:Objective:Toobservetheeffectsofthermalstressonproliferationofhumanvascularendothelialcells(VECs)andexploreitssignificance.Methods:ChangesofVECsproliferationwereinvestigatedwith3H-TdRincorporationmethodafterECV304wastreatedat43℃for2hours,whileexpressionsofintercellularadhesionmolecule-1(ICAM-1),inhibitorofdifferentiation-1(ID1),andP16andP21proteinsweredeterminedbyWesternBlotting.Results:TheeffectofinhibitionofVECsgrowthafterthermalstresswasdetectedby3H-TdRincorporationexperiment.WesternblottingshowedICAM-1,amarkerofactivatedendothelialcells,wasincreasedmarkedlyafterthermalstress.ExpressionofID1proteindeclinedgraduallywithincreasingexpressionsofitsdownstreamgenes,P16andP21followingthethermalstress.Conclusions:ThermalstresscouldstronglyactivateVECsandinhibitproliferationofVECsthroughID1,thusdownregulatingcyclin-dependentkinaseinhibitors,P16andP21,whichmightbeanessentialpathwayforrecoveryofVECsafterthermalstress.
简介:摘要目的将腹腔镜手术患者手术前后的血清作用于ECV304,观察细胞形态有无变化及合成eNOS的情况,探讨妇科腹腔镜手术是否会增加血管内皮细胞的损伤。方法将腹腔镜及开腹全子宫切除术患者(各8例)术前术后血清做为干预介质作用于ECV304,观察细胞形态的改变并用ELISA测定细胞液中eNOS含量变化。用SPSS17.0对检测结果分析。结果(1)不加干预血清的ECV304细胞培养2h、6h、12h、24h后,细胞液中eNOS的含量变化无统计学意义;(2)腔镜组及开腹组术前术后血清加入细胞液中培养2h、6h、12h、24h后,上清液中eNOS较干预前基础eNOS含量稍下降,差异无统计学意义;(3)将腔镜组手术前后血清配对,作用于ECV3042h、6h、12h、24h,比较其培养液中eNOS的含量,差异无统计学意义;(4)ECV304传代培养,细胞呈梭形和不规则三角形。经干预血清作用24h,显微镜下观察细胞形态,均有不同程度的细胞变圆及脱落。结论腹腔镜手术患者的血清作用于ECV304,对其分泌功能无明显影响,即对人体的内皮细胞无明显损伤。
简介:通过H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(ECV-304)损伤,建立细胞氧化损伤模型。研究丝胶抗氧化肽段SP2、SP3低、中、高质量浓度(50,100,200μg/mL)对细胞免受损伤的保护作用。研究结果表明:SP2和SP3(100,200μg/mL)处理组显著提高了细胞中总抗氧化能力(P〈0.05),SOD,CAT和GSH-Px酶水平(P〈0.05)以及细胞的NO水平(P〈0.05);显著降低了细胞中MDA水平(P〈0.05)。SP2、SP3肽段对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(ECV-304)的损伤有很好的保护作用,存在剂量依赖关系。本研究为开发丝胶抗氧化肽功能产品提供了理论依据,为合理开发和利用丝胶提供了新的途径。
简介:目的本实验观察胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对晚期糖基化终末产物(AGEs)损伤的ECV-304细胞的细胞活性、核转录因子-κB(NF-κB)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响。方法人工制备AGEs。培养ECV-304细胞至80%满瓶后分组:对照组(5.5mmol/L葡萄糖DMEM8h);AGEs组[5.5mmol/L葡萄糖DMEM+50μg/mlAGEs-人血清白蛋白(HSA)8h];加药组1(0.03nmol/mlGLP-1+5.5mmol/L葡萄糖DMEM8h);加药组2(0.03nmol/mlGLP-1+5.5mmol/L葡萄糖DMEM+50μg/mlAGEs-HSA8h)。使用MTT法检测细胞活性,用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液NF-κB、VCAM-1的表达量。结果(1)AGEs组与对照组相比,细胞活性下降、NF-κB和VCAM-1的表达量明显升高(P<0.05)。(2)0.03nmol/mlGLP-1和AGEs-HSA共同干预与单用AGEs-HSA干预的组别相比,前者细胞活性升高、NF-κB和VCAM-1的表达量明显减少(P<0.05)。结论GLP-1能抑制AGEs对EC...
简介:T1mappingusingcardiovascularmagneticresonance(CMR)introducesnoveltechniquesformyocardialtissuecharacterizationtodetectandquantifydiseaseprocessesoccurringatthemicroscopiclevel.EventhoughT1mappinghaslimitedspatialresolution,cellularandmolecularchangesoccurringwithineachvoxelcanaffecttheaggregateT1signalrenderingthemquantifiable.TheestimatedT1-basedparametersquantifiedona“map”demonstratethespatiallocalizationofthesechangeswherebyeachpixelexpressesthequantitativevalueofthatparameter.Thisquantificationpermitsdetectionofdiffusediseaseevenifitisnotdirectlyvisible.Ratherthanrelyingonnonspecificfunctionalmeasures,T1mappingfocusesonintrinsicchangesofmyocardialcompositionthatadvancesunderstandingaboutspecificdiseasepathways.Thesechangesinmyocardialtissuecompositioninformdiagnosisandprognosis.T1mappingencompassestwokeyparameters:native(i.e.,precontrast)T1andextracellularvolumefraction(ECV)derivedfromadditionalpostcontrastT1andbloodT1measurements.Theseadvancesintroducenewtoolstodetectfocalanddiffusemyocardialderangementsoccurringincardiacdiseasethatcanbeotherwisedifficulttodetect.T1andECVmappingfosterprecisionmedicineandpersonalizedcare,promisingtoimprovepatientoutcomesthroughtargetedtherapy.CapitalizingontheopportunitiesintroducedbyT1mappingandECVrequiresfurtherinvestigation.
简介:目的研究抽吸术采集的脂肪颗粒经消化清洗贴壁生长的人脂肪基质细胞增殖前后的形态和表面抗原表达的变化.方法吸脂术获得脂肪组织,经胶原酶消化分离、接种培养皿,贴壁后采集的细胞和原代细胞增殖80%融合后采集的细胞,分别通过流式细胞仪检测CD105、CD166、Stro-1、CD29等表面标志的变化.结果CD29在原代细胞增殖前后无明显变化,保持极高的阳性率;Stro-1在原代细胞增殖前后无明显变化,保持较低的阳性率;CD105、CD166阳性率显著增加.结论脂肪基质细胞原代培养增殖前检测细胞表面标志可以更加准确地反映提取的脂肪基质细胞的原始情况,经过原代培养增殖后部分干细胞相关的抗原的比例发生了明显的变化.
简介:摘要目的观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对体外培养的大鼠毛囊角质细胞增殖的影响。方法2019年6月至2020年1月,采用免疫荧光检测大鼠毛囊角质细胞(购自中国赛百慷生物有限公司)标志物角蛋白14(K14)的表达量。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测0、5、10、25、50 μg/L浓度SDF-1作用大鼠毛囊角质细胞24 h后,10、25 μg/L浓度SDF-1作用大鼠毛囊角质细胞48 h后,及10、25 μg/L浓度SDF-1加入50 nmol/L趋化因子受体-4(CXCR4)拮抗剂普乐沙福(AMD3100)作用大鼠毛囊角质细胞24 h后毛囊角质细胞增殖;5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)标记法分别检测对照组(0 μg/L SDF-1),25 μg/L SDF-1组,25 μg/L SDF-1+50 nmol/L AMD3100组作用大鼠毛囊角质细胞24 h后毛囊角质细胞增殖。组间比较采用t检验。结果细胞免疫荧光显示95%以上细胞K14染色呈阳性。CCK-8检测结果显示与0 μg/L浓度SDF-1(103.04±0.99)比较5 μg/L浓度SDF-1对细胞增殖活性无明显影响(100.67±4.59,t=0.905,P>0.05),差异无统计学意义,10、25、50 μg/L浓度SDF-1促进毛囊角质细胞增殖(111.44±4.95、124.59±2.08、125.11±0.48,t10=3.221,P10<0.05;t25=8.624,P25<0.01;t50=8.464,P50<0.01),差异有统计学意义。与浓度为25 μg/L比较,SDF-1浓度为10 μg/L促增殖作用减弱(t=5.043,P<0.01),差异有统计学意义,浓度为50 μg/L促增殖作用无明显变化(t=0.199,P>0.05),差异无统计学意义。10、25 μg/L浓度的SDF-1作用48 h(98.26±5.24、112.39±2.30)与作用24 h(111.44±4.95、124.59±2.08)比较其促增殖作用减弱(t10=3.167,P10<0.05;t25=6.816,P25<0.01),差异有统计学意义。10、25 μg/L浓度SDF-1加入50 nmol/L AMD3100作用毛囊角质细胞24 h后,毛囊角质细胞增殖明显受到抑制(84.20±1.06、98.51±0.92,t10=9.325,P10<0.01;t25=19.900,P25<0.01),差异有统计学意义。EdU检测结果进一步验证SDF-1具有促进毛囊角质细胞增殖作用(SDF-1组:38.59±0.33,对照组:22.45±2.59,t=10.700,P<0.01),AMD3100可抑制SDF-1促增殖作用(22.12±1.96,t=10.700,P<0.01),差异有统计学意义。结论SDF-1在10~50 μg/L浓度范围内对体外培养的大鼠毛囊角质细胞有促进增殖作用,且该增殖作用能被AMD3100抑制。