简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤蛋白翻译控制反义RNA 1(TPT1-AS1)在结肠癌组织中的表达和临床意义，及其对结肠癌细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭的影响。方法收集2016年7月至2017年9月于天津医科大学总医院胃肠外科进行结肠癌根治术的72例结肠癌患者的癌组织标本及相应的癌旁组织，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA TPT1-AS1在结肠癌组织的相对表达量，并分析其表达与结肠癌临床病理特征的相关性。构建lncRNA TPT1-AS1敲低和对照载体(si-TPT1-AS1、si-NC)，分别设为敲低组和对照组，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖实验、细胞周期分析实验、Transwell迁移侵袭实验检测结肠癌细胞SW620的增殖、细胞周期阻滞、迁移和侵袭能力。计量资料组间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验。结果LncRNATPT1-AS1在结肠癌组织中的相对表达量显著高于对应的癌旁组织(3.99±0.21比1.78±0.09，t＝35.433，P<0.05)，且其表达与TNM分期(χ2＝9.000，P<0.05)和远处转移(χ2＝4.600，P<0.05)呈正相关，差异均有统计学意义。CCK-8实验结果显示，敲低TPT1-AS1 48 h(0.47±0.02比0.83±0.05，t＝10.543，P<0.05)、72 h后(0.69±0.02比1.23±0.09，t＝10.145，P<0.05)，SW620细胞的增殖能力均显著低于对照组，差异均有统计学意义。细胞周期分析显示，敲低TPT1-AS1可使G0/G1期细胞比例高于对照组[(68.47±2.79)%比(44.69±1.26)%，t＝14.672，P<0.05]，S期细胞比例低于对照组[(22.87±1.96)%比(37.48±1.57)%，t＝17.246，P<0.05]，G2/M期细胞比例低于对照组[(8.22±0.87)%比(20.78±0.45)%，t＝18.772，P<0.05]，差异均有统计学意义。Transwell迁移侵袭实验结果表明，敲低TPT1-AS1可使SW620细胞的迁移能力显著低于对照组[[(87±8)个比(177±10)个，t＝15.237，P<0.05]，侵袭能力显著低于对照组[(47±5)个比(122±8)个，t＝19.578，P<0.05]，差异均有统计学意义。结论lncRNA TPT1-AS1在结肠癌组织中表达升高，敲低TPT1-AS1可抑制结肠癌细胞增殖、细胞周期G1/S期转换、迁移和侵袭。

简介：摘要目的在体外转录快速获得原核生物来源核酶P的核心催化亚基M1RNA。方法以大肠埃希菌DH5α菌液为模板，应用聚合酶链式反应的方法扩增M1RNA基因，并将该基因置于T7启动子下游，其聚合酶链式反应产物经电泳及测序鉴定。以M1RNA基因为模板，以32P标记，在T7 RNA聚合酶的作用下体外转录M1RNA。将产物以尿素变性聚丙烯酰胺凝胶分离并观察结果。结果应用聚合酶链式反应的方法从大肠埃希菌基因组扩增M1RNA基因，经凝胶电泳观察及测序鉴定，证实成功在体外扩增M1RNA基因，并置于T7启动子下游。在T7 RNA聚合酶的催化下，应用尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离产物，结果显示377nt处可见与预期相符的条带，证实成功在体外获得M1RNA。结论成功在体外快速获得具有独立催化功能的M1RNA，基于此的基因沉默技术具有发展成新型反义核酸药物的良好前景。

简介：摘要目的观察基线HIV-1 RNA > 50万copies/mL的HIV-1感染者，在高效抗反转录病毒治疗（highly active antiretroviral therapy，HAART）前后外周血totalHIV-1 DNA的变化。方法从国家十二五科技重大专项课题中选取基线HIV-1 RNA > 50万copies/mL且HAART 96周HIV-1 RNA < 50 copies/mL的初治HIV-1感染者为试验组，年龄性别相当的基线HIV-1 RNA < 50万copies/mL的HIV-1感染者为对照组。检测两组患者基线和HAART 24、48、96周时total HIV-1 DNA水平。结果基线及HAART 96周，试验组total HIV-1 DNA均高于对照组3.48（3.21~3.80）lg copies/106 PBMCsvs 2.90（2.54~3.30）lg copies /106 PBMCs（p<0.001），2.82（2.38~2.96）lgcopies/106 PBMCs vs 2.37（1.99~2.65） lg copies /106 PBMCs（p=0.001）。HAART 24周、48周，试验组detal HIV-1 DNA较对照组高0.67（0.41~1.03）lg copies/106 PBMCs vs 0.39（0.09~0.73）lg copies/106 PBMCs（P<0.001）, 0.8（0.46~1.16）lg copies/106 PBMCs vs 0.43（0.04~0.63）lg copies/106 PBMCs（P<0.001）。且HAART前后total HIV-1 DNA水平均与基线病载正相关。结论基线极高病载患者HAART 96周内存在较高total HIV DNA水平，建议选择强效HAART方案来有效降低储存库。

简介：目的验证smallinterferenceRNA(siRNA)片段稳定转入肾细胞癌细胞中抑制其癌细胞生长,同时试图解释其原因。方法将合成好的RNAi慢病毒颗粒稳定转入目的细胞中并达到稳定传代后,以CCK-8试剂盒检测目的细胞的生长情况,以Real-timePCR检测目的细胞中p53基因及survivin基因的表达变化。结果CCK-8法测得ACHN细胞在MDR1被干扰以后的生长水平,干扰组细胞明显低于两对照组,且干扰组细胞的细胞活力出现了明显的下降趋势。Real-timePCR检测得p53基因和survivin基因的mRNA表达水平明显降低,而无意义重组载体组(NC组)则和亲本细胞无明显差异。结论MDR1沉默可使肾细胞癌ACHN细胞增殖减慢,生长抑制。同时沉默后细胞内的mtp53及survivin基因的表达均明显减少,MDR1介导的对肿瘤细胞生长的抑制作用至少部分是通过p53和survivin基因来实现的。

简介：以前的学习显示出那个aerosolized信号变换器和antisenseoligodeoxynucleotide(ASON)禁止了的transcription-1(STAT1)的使活跃之物在牙槽的巨噬细胞(Ams)的STATI和ICAM-1mRNA和蛋白质的表达式并且减少TGF-的集中，在在bleomycin(BLM)的bronchioalveolarlavage液体(BALF)的PDGF和TNF-导致了老鼠肺的纤维变性。STAT1ASON的管理改善了在老鼠的齿槽炎肺的纤维变性。然而，进一步的调查被需要决定是否从纤维变性上的STAT1ASON的管理有效果。这研究在导致BLM的老鼠在煽动性的调停人，hydroxyproline和类型和类型骨胶原mRNA的表情上调查了aerosolizedSTAT1ASON的效果肺的纤维变性。结果证明aerosolization使用的STAT1ASON能改善齿槽炎和纤维变性，禁止煽动性的调停人，的表情减少hydroxyproline的内容，并且在导致BLM的老鼠在肺织物压制类型和类型骨胶原mRNA的表情肺的纤维变性。这些结果建议aerosolizedSTAT1ASON可能在肺的纤维变性的处理被看作有希望的新策略。

简介：摘要目的探讨环状RNA circ0025847对结直肠癌细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法即时聚合酶链锁反应（real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）法检测人结直肠癌细胞（HCT116，SW480）和人正常结肠上皮细胞（NCM460）中circ0025847和QK1的表达水平。CCK-8检测circ0025847和QK1对结直肠癌细胞增殖的影响。采用生物信息学方法筛选可与circ0025847结合的RNA结合蛋白（RNA-binding protein，RBP）。RNA pulldown和RNA结合蛋白免疫沉淀（RNA binding protein immunoprecipitation，RIP）实验检测circ0025847是否与QK1结合。蛋白免疫印迹法（western blot）分析过表达circ0025847后QK1的表达水平。设置阴性对照组（NC组），circ0025847过表达组和circ0025847过表达组+ QK1抑制组，CCK8法观察结直肠癌细胞增殖。结果circ0025847在NCM460、HCT116和SW480细胞中的表达水平分别为（1.01±0.05）、（0.49±0.08）和（0.45±0.10），QK1在NCM460、HCT116和SW480细胞中的表达水平分别为（0.98±0.07）、（0.50±0.07）和（0.47±0.09），二者均在结直肠癌细胞中低表达。过表达circ0025847和QK1可抑制结直肠癌细胞的增殖。RNA pulldown和RIP实验证实circ0025847和QK1可直接结合。circ0025847可正调控QK1的表达（7 199.20±12.44 vs 3 889.80±11.03）。circ0025847通过促进QK1表达抑制结直肠癌细胞的增殖。结论circ0025847通过正调控QK1表达来抑制结直肠癌细胞的增殖，circ0025847可能是治疗结直肠癌的潜在作用靶点。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA核富集转录体1(LncNEAT1)胰腺癌中的表达水平及其影响胰腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响，分析胰腺癌转移与LncNEAT1、微小RNA-15b(miR-15b)之间的相关性，探讨LncNEAT1影响胰腺癌细胞生物学表型的机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测40例胰腺癌组织及胰腺癌细胞中LncNEAT1、微小RNA-15b(miR-15b)的表达水平，小干扰RNA转染至胰腺癌细胞SW1990中，Transwell实验检测转染后胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力；过表达NEAT1后观察miR-15b的表达水平；双荧光素酶报告实验验证LncNEAT1与miR-15b的调控关系。结果胰腺癌组织中LncNEAT1表达水平(4.29±0.56)高于癌旁组织(2.21±0.30，t＝ 19.21 ，P<0.001)；miR-15b在胰腺癌组织中的表达水平(3.10±0.12)高于癌旁组织(2.01±0.35，t＝ 6.45，P<0.01)；LncNEAT1小干扰RNA转染至胰腺癌细胞SW1990后，胰腺癌细胞的迁移能力[(68.19±2.33)、(58.07±3.73)个/视野]显著低于对照组[(180.39±10.87)个/视野，t＝6.02、8.43，P<0.01，P<0.01]，转染后SW1990细胞侵袭能力[(50.01±5.73)、(49.68±8.86)个/视野]明显低于对照组[(112.20±10.93)个/视野，t＝5.38、6.95，P<0.05, P<0.01] 。NEAT1的表达与胰腺癌患者TNM分期、有无淋巴结转移密切相关(χ2＝3.92、5.74, P<0.05, P<0.05)；miR-15b的表达与胰腺癌患者TNM分期、有无淋巴结转移密切相关(χ2＝4.315、4.642，P<0.05, P<0.05)；双荧光素酶报告实验表明miR-15b可明显降低MUT-NEAT1-AS1荧光素酶活性(t＝11.53，P<0.01)，LncNEAT1可负向调控miR-15b。结论抑制LncNEAT1表达可能通过调控miR-15b抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力。

简介：RNAi是双链RNA介导的、序列特异性的转录后基因沉默,自1998年发现至今已有很大进展.本文综述了RNA干涉的分子机理及其应用研究进展.

简介：Protein-proteininteractions(PPIs)havebeenwidelystudiedtounderstandthebiologicalprocessesormolecularfunctionsassociatedwithdifferentdiseasesystemslikecancer.Whilefocusedstudiesonindividualcancershavegeneratedvaluableinformation,globalandcomparativeanalysisofdatasetsfromdifferentcancertypeshasnotbeendone.Inthiswork,wecarriedoutbioinformaticanalysisofPPIscorrespondingtodifferentiallyexpressedgenesfrommicroarraysofvarioustumortissues(belongingtobladder,colon,kidneyandthyroidcancers)andcomparedtheirassociatedbiologicalprocessesandmolecularfunctions(basedonGeneOntologyterms).Weidentifiedasetofprocessesorfunctionsthatarecommontoallthesecancers,aswellasthosethatarespecifictoonlyoneorpartialcancertypes.Similarly,proteininteractionnetworksinnucleicacidmetabolismwerecomparedtoidentifythecommon/specificclustersofproteinsacrossdifferentcancertypes.Ourresultsprovideabasisforfurtherexperimentalinvestigationstostudyproteininteractionnetworksassociatedwithcancer.Themethodologydevelopedinthisworkcanalsobeappliedtostudysimilardiseasesystems.

简介：目的观察整合素β1对人表皮干细胞（KSC）增殖与分化的影响。方法选择人整合素β1RNA干扰靶点特异性的寡核苷酸，连接到小干扰RNA（siRNA）表达质粒pSilencer3.1／H1上，将其转染到KSC中，并根据转染的方式将KSC分为非转染、转染空载体、转染si整合素β1-1、转染si整合素β1-2、转染siNegative5个部分。通过蛋白质印迹法检测各部分KSC整合素β1蛋白的表达水平，并筛选出最有效的阳性载体，将其命名为si整合素β1进行后续实验；通过逆转录聚合酶链反应检测各部分KSC整合素β1mRNA的表达水平，上述检测均重复测定5次。结果非转染、转染空载体的KSC不能抑制整合素β1蛋白的表达；转染si整合素β1-1、si整合素β1-2的KSC能够在蛋白水平抑制整合素β1的表达，并且后者效果强于前者，抑制效率达到60％-70％，将其命名为si整合素β1；si整合素β1使KSC中整合素β1mRNA水平明显下降，抑制效率约达70％。结论重组质粒转染KSC后可下调整合素β1mRNA及其蛋白的表达。

简介：目的初步探究长链非编码RNA（lncRNA）对牙本质基质蛋白1（DMP1）基因表达的调控机制。方法在MC3T3-E1细胞中,运用Westernblot以及实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）实验观察lncRNA32865与DMP1的变化趋势。构建含有荧光素酶报告基因的DMP1启动子载体,并与lncRNA过表达质粒、si-lncRNA32865分别共转染后,观察DMP1启动子活性以及lncRNA32865对其的影响。数据进行统计学处理,以P〈0.05为差异具有统计学意义。结果Westernblot以及实时荧光定量PCR实验结果显示,在MC3T3-E1细胞中过表达lncRNA32865时,DMP1基因表达量（0.236±0.022）较对照组降低（t=59.816,P〈0.001）,抑制lncRNA32865时,DMP1基因表达量（1.994±0.133）较对照组升高（t=-12.989,P=0.006）。荧光素酶报告基因检测表明DMP1启动子有活性（t=-77.360,P〈0.001）。与转染DMP1启动子处理组（6.018±0.105）比较,DMP1启动子质粒与lncRNA32865过表达质粒共转染组荧光强度（3.877±0.120）显著降低（t=50.713,P〈0.001）,而DMP1启动子质粒与si-lncRNA32865共转染组荧光强度（17.296±0.674）显著增加（t=-26.612,P=0.001）。结论初步证明lncRNA32865与DMP1表达趋势相反,lncRNA32865通过与DMP1基因的启动子区相互作用,以此调控DMP1的基因表达。

简介：AbstractBackground:Follistatin-like 1 (FSTL1) plays both pro-inflammatory and anti-inflammatory roles in the inflammatory processes. We investigated whether serum FSTL1 could predict the current anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis (AAV)-specific indices.Methods:We randomly selected 74 patients with AAV from a prospective and observational cohort of Korean patients with AAV. Clinical and laboratory data and AAV-specific indices were recorded. FSTL1 concentration was determined using the stored sera. The lowest tertile of the short-form 36-item health survey (SF-36) was defined as the current low SF-36. The cutoffs of serum FSTL1 for the current low SF-36 physical component summary (PCS) and SF-36 mental component summary (MCS) were extrapolated by the receiver operator characteristic curve.Results:The median age was 62.5 years (55.4% were women). Serum FSTL1 was significantly correlated with SF-36 PCS (r = -0.374), SF-36 MCS (r = -0.377), and C-reactive protein (CRP) (r = 0.307), but not with Birmingham vasculitis activity score (BVAS). In the multivariable linear regression analyses, BVAS, CRP, and serum FSTL1 were independently associated with the current SF-36 PCS (β = -0.255, β = -0.430, and β = -0.266, respectively) and the current SF-36 MCS (β = -0.234, β=-0.229, and β= -0.296, respectively). Patients with serum FSTL1 ≥779.8 pg/mL and those with serum FSTL1 ≥841.6 pg/mL exhibited a significantly higher risk of having the current low SF-36 PCS and SF-36 MCS than those without (relative risk 7.583 and 6.200, respectively).Conclusion:Serum FSTL1 could predict the current functional status in AAV patients.

简介：无

简介：摘要目的探索长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录物1(MALAT1)通过调控核富集转录物1(NEAT1)对人肝癌细胞外泌体分泌和肿瘤细胞增殖、侵袭的影响。方法肝癌细胞HuH-7细胞敲低MALAT1表达(si-MALAT1)转染获得si-MALAT1组细胞，转染无意义的小干扰RNA (si-RNA)作为si-NC组，比较si-MALAT1组和si-NC组NEAT1表达、细胞增殖和侵袭能力的变化。过表达NEAT1载体的慢病毒(lv)与HuH-7细胞共培养72 h后获取NEAT1过表达细胞(lv-NEAT1组)，感染空转载体的lv作为lv-control组，比较lv-NEAT1组和lv-control组外泌体相关基因表达差异。使用lv-NEAT1组细胞转染si-MALAT1获得si-MALAT1+lv-NEAT1组细胞，与si-NC组、si-MALAT1组细胞比较外泌体分泌能力变化。将si-MALAT1组细胞与lv-NEAT1组细胞的外泌体共培养获得si-MALAT1+ lv-NEAT1外泌体组细胞，将si-MALAT1组细胞与lv-control组细胞的外泌体共培养获得si-MALAT1+lv-control外泌体组，考察si-MALAT1+ lv-NEAT1外泌体组和si-MALAT1+lv-control外泌体组细胞的增殖和侵袭功能。结果与si-NC组相比，si-MALAT1组中NEAT1的相对表达量[(0.72±0.02)比(0.98±0.01)]、72 h吸光度[(0.66±0.03)比(0.98±0.04)] 、下室细胞数量[(88.33±7.26)比(147.70±13.62)]均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与si-NC组相比，si-MALAT1组外泌体CD9、CD63表达减弱；而与si-MALAT1组相比，si-MALAT1+lv-NEAT1组外泌体CD9、CD63表达增加。与si-MALAT1+lv-control外泌体组相比，si-MALAT1+ lv-NEAT1外泌体组吸光度[(0.97±0.03)比(0.74±0.05)]和下室细胞数量[(132.70±7.36)比(98.33±6.01)]均增加，差异有统计学意义(P<0.05)。lv-NEAT1组外泌体相关基因HSPA8、SLC3A2、SLC7A5的相对表达量分别为(5.53±0.31)、(0.32±0.07)、(0.77±0.45)，与lv-control组表达水平(0.98±0.15)相比，差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论MALAT1可通过调控NEAT1改变肝癌细胞外泌体分泌功能，NEAT1可改变外泌体相关基因的表达，进而促进了肝癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的研究长非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对甲状腺癌细胞增殖和侵袭的影响，并探讨其机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常甲状腺和甲状腺癌细胞株中AFAP1-AS1的表达。将甲状腺癌细胞株WRO分成3组，AFAP1-AS1沉默表达组(AFAP1-AS1-siRNA组)、阴性对照组(NT-siRNA组)及空白对照组(Blank组)，AFAP1-AS1-siRNA组和NT-siRNA组采用Lipofectamine™ 3000分别转染AFAP1-AS1-siRNA、NT-siRNA，Blank组加入PBST对照。CCK-8检测3组细胞增殖能力，Transwell实验检测侵袭能力，Western blotting检测Rho A、Cyclin D1和MMP-9蛋白的表达情况。结果正常甲状腺细胞株FRTL-5、甲状腺癌细胞株SW579、CAL-62、FRO、WRO的AFAP1-AS1相对表达量分别为1.03±0.04、2.95±0.17、5.31±0.35、7.26±0.49、9.67±0.53，5组间比较差异具有统计学意义(F＝16.932，P＝0.027)；AFAP1-AS1在WRO细胞中表达量最高，因此，选择WRO细胞进行后续实验。AFAP1-AS1-siRNA组、NT-siRNA组、Blank组3组细胞AFAP1-AS1的相对表达量分别为0.23±0.02、1.02±0.04、1.03±0.05，差异具有统计学意义(F＝13.590，P＝0.006)，与NT-siRNA组相比，AFAP1-AS1-siRNA组AFAP1-AS1表达量显著降低(P<0.001)。3组细胞转染后3、4 d的A450值分别为0.68±0.06、1.17±0.09、1.22±0.09，0.96±0.08、1.69±0.11、1.72±0.12，差异均具有统计学意义(F＝7.318，P＝0.016；F＝10.351，P＝0.004)，第3、4 d AFAP1-AS1-siRNA组、NT-siRNA组两组比较，差异均有统计学意义(P＝0.043；P＝0.013)。3组侵袭细胞数分别为(72.8±5.7)个、(145.6±8.9)个、(148.4±7.3)个，差异具有统计学意义(F＝37.273，P＝0.034)，AFAP1-AS1-siRNA组侵袭细胞数少于NT-siRNA组(P＝0.021)。3组细胞Rho A蛋白表达量分别为0.34±0.03、1.02±0.04、1.04±0.03，差异具有统计学意义(F＝9.667，P＝0.013)，AFAP1-AS1-siRNA组Rho A蛋白表达量显著低于NT-siRNA组(P＝0.018)；3组Cyclin D1蛋白表达量分别为0.52±0.04、1.03±0.02、1.05±0.04，差异具有统计学意义(F＝15.464，P＝0.010)，AFAP1-AS1-siRNA组Cyclin D1蛋白表达量显著低于NT-siRNA组(P＝0.023)；3组MMP-9蛋白表达量分别为0.42±0.04、1.05±0.03、1.02±0.04，差异有统计学意义(F＝10.328，P＝0.032)，AFAP1-AS1-siRNA组MMP-9蛋白表达量显著低于NT-siRNA组(P＝0.035)。结论AFAP1-AS1沉默可抑制甲状腺癌细胞增殖、侵袭，其机制可能与下调Rho A、Cyclin D1、MMP-9蛋白表达相关。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) HNF1A-AS1对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响及其分子机制。方法选取新乡医学院附属中心医院2017年6月至2019年6月手术切除的236例乳腺癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析表达水平；将乳腺癌MDA-MB-231细胞系按照随机数字表法分为短发卡RNA(shRNA)对照组、shRNA HNF1A-AS1组、miRNA对照组和miR-32-5p组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell和体内移植瘤实验分析lncRNA HNF1A-AS1和miR-32-5p对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。荧光素酶基因报告实验检测lncRNA HNF1A-AS1和miR-32-5p的关系与miR-32-5p与FBXW7的关系。免疫印迹法(Western blot)分析靶蛋白表达水平。应用SPSS 17.0统计学软件分析，符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示。结果癌旁组织lncRNA HNF1A-AS1表达水平(1.09±0.21)低于乳腺癌组织lncRNA HNF1A-AS1表达水平(3.01±0.32)，差异有统计学意义(t＝3.819，P<0.05)；癌旁组织miR-32-5p表达水平(0.94±0.18)高于乳腺癌组织miR-32-5p表达水平(0.47±0.13)，差异有统计学意义(t＝2.209，P<0.05)。shRNA对照组细胞48 h吸光度(A)值(1.87±0.24)高于shRNA HNF1A-AS1组细胞48 h A值(1.31±0.18)，差异有统计学意义(t＝2.781，P<0.05)。miRNA对照组细胞48 h A值(1.94±0.20)低于miR-32-5p组细胞48 h A值(1.19±0.12)，差异有统计学意义(t＝2.799，P<0.05)。shRNA对照组细胞侵袭数量[(84.39±8.01)个]高于shRNA HNF1A-AS1组细胞侵袭数量[(45.19±4.11)个]，差异有统计学意义(t＝6.192，P<0.05)。miRNA对照组细胞侵袭数量[(80.15±7.69)个]低于miR-32-5p组细胞侵袭数量[(38.63±5.71)个]，差异有统计学意义(t＝7.109，P<0.05)。shRNA对照组细胞淋巴结转移数量(15.90±3.10)高于shRNA HNF1A-AS1组细胞淋巴结转移数量(8.12±2.09)，差异有统计学意义(t＝4.163，P<0.05)。miRNA对照组细胞淋巴结转移数量(14.03±3.54)低于miR-32-5p组细胞淋巴结转移数量(7.19±3.74)，差异有统计学意义(t＝3.853，P<0.05)。生物信息学显示miR-32-5p是lncRNA HNF1A-AS1的靶基因。FBXW7是miR-32-5p的靶基因。shRNA对照组和miRNA对照组细胞FBXW7蛋白表达水平(1.48±0.24、1.38±0.19)高于shRNA HNF1A-AS1组和miR-32-5p组FBXW7蛋白表达水平(0.79±0.15、0.85±0.25)，差异有统计学意义(t＝3.163、2.833，P<0.05)。结论lncRNA HNF1A-AS1在乳腺癌中高表达，通过吸附结合miR-32-5p，调节癌蛋白FBXW7表达，进而调控乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移等生物学过程。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) UCA1通过微小RNA(miRNA，miR)-203对食管癌细胞增殖，凋亡和侵袭的影响。方法选取河南省人民医院2021年2月到2022年1月手术切除的142例食管癌和癌旁组织，采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)分析lncRNA UCA1和miR-203表达水平；乳腺癌MCF-7细胞系随机分为lncRNA对照组、短发卡RNA(shRNA) UCA1组、miRNA对照组和miR-203组。采用蛋白质印迹法(Western blot)、流式细胞术和Transwell实验分析不同处理的细胞增殖、凋亡和转移情况。荧光素酶基因报告实验检测lncRNA UCA1和miR-203的关系。蛋白质印迹法(Western blot)分析增殖、凋亡和转移蛋白表达水平。组间计量资料比较采用t检验。结果癌旁组织lncRNA UCA1表达水平(0.89±0.14)低于食管癌组织(2.71±0.20)，差异有统计学意义(t＝4.661，P<0.05)；癌旁组织miR-203表达水平(1.18±0.16)高于乳腺癌组织miR-203表达水平(0.34±0.11)，差异有统计学意义(t＝3.917，P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度(A)值(2.19±0.21)高于shRNA UCA1组细胞48 h A值(1.47±0.10)，差异有统计学意义(t＝3.198，P<0.05)。miRNA对照组细胞48 h A值(2.28±0.24)高于miR-203组细胞48 h A值(1.33±0.17)，差异有统计学意义(t＝3.139，P<0.05)。lncRNA对照组细胞凋亡比例[(6.81±0.89)%]低于shRNA UCA1组细胞[(22.09±4.12)%]，差异有统计学意义(t＝4.871，P<0.05)。miRNA对照组细胞凋亡比例[(6.09±0.82)%]低于miR-203组细胞[(27.09±3.81)%]，差异有统计学意义(t＝5.557，P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(132.44±11.82)个]高于shRNA UCA1组细胞侵袭数量[(68.29±6.82)个]，差异有统计学意义(t＝5.719，P<0.05)。miRNA对照组细胞侵袭数量[(126.98±10.54)个]高于miR-203组细胞侵袭数量[(74.29±8.71)个]，差异有统计学意义(t＝6.209，P<0.05)。lncRNA UCA1有miR-203的结合位点，起着海绵作用。lncRNA对照组细胞MAP3K1、IRS-1和RGS7 mRNA表达水平(1.39±0.21、1.22±0.17、1.10±0.15)明显高于shRNA UCA1组细胞(0.76±0.19、0.71±0.20、0.49±0.17)，差异有统计学意义(t＝3.191、3.018、3.381，P<0.05)。结论lncRNA UCA1在食管癌中高表达，通过结合miR-203，调控着食管癌细胞增殖、凋亡和侵袭过程。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA((lncRNA)LBX2-AS1靶向调控微小RNA(miRNA，miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤旁组织中LBX2-AS1、miR-491-5p的表达量。选取人骨肉瘤细胞U2OS为研究对象，按照数字表法随机分为4组：si-NC组(转染si-NC)、si-LBX2-AS1组(转染si-LBX2-AS1)、si-LBX2-AS1＋anti-miR-NC组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-NC)、si-LBX2-AS1＋anti-miR-491-5p组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p)，分别将si-NC、si-LBX2-AS1、si-LBX2-AS1与anti-miR-NC、si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p转染至U2OS细胞。噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率；应用流式细胞仪检测细胞周期；流式细胞术检测细胞凋亡率；双荧光素酶报告实验验证LBX2-AS1与miR-491-5p的靶向关系；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达量。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果瘤旁组织与骨肉瘤组织组织中LBX2-AS1的表达量分别为(1.01±0.10)、(3.56±0.35)，miR-491-5p的表达量分别为(1.02±0.10)、(0.16±0.02)，与瘤旁组织比较，骨肉瘤组织中LBX2-AS1的表达水平显著升高(t＝35.027，P<0.05)，miR-491-5p的表达水平显著降低(t＝42.165，P<0.05)，差异均有统计学意义；si-NC组与si-LBX2-AS1组细胞存活率分别为(100.02±10.00)%、(55.67±5.54)%，G1期比例分别为(38.51±2.55)%、(52.27±4.68)%，S期比例分别为(30.10±2.14)%、(15.36±1.26)%，细胞凋亡率分别为(8.28±0.92)%、(24.11±2.37)%，与si-NC组比较，si-LBX2-AS1组细胞存活率显著降低(t＝11.638，P<0.05)，细胞周期G1期比例明显升高(t＝7.745，P<0.05)，S期比例明显降低(t＝17.806，P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(t＝18.680，P<0.05)，Cyclin D1表达量显著降低(t＝20.871，P<0.05)，p21、Caspase-3表达量显著升高(t＝22.687，P<0.05；t＝20.871，P<0.05)，差异均有统计学意义；双荧光素酶报告实验证实LBX2-AS1能够靶向结合miR-491-5p；抑制miR-491-5p表达能减弱抑制LBX2-AS1表达对U2OS细胞增殖的抑制作用，还能减弱抑制LBX2-AS1表达对U2OS细胞凋亡的促进作用。结论lncRNA LBX2-AS1通过调控miR-491-5p从而促进骨肉瘤细胞增殖，抑制细胞凋亡。

简介：客观：与非小的肺癌症(NSCLC)在病人的预后上在MRP基因overexpression的效果上学习。方法：从NSCLC的47个盒子的嵌入石蜡的纸巾经历了激进的肿瘤切除术的人，用探针与immunohistochemistry相结合的标记的digoxigenin为MRP基因mRNAbyinsitu杂交的表示被检查。所有病人是回顾地跟随起来的。结果：47个肺癌症标本的AU被发现有MRP基因mRNA的overexpression。它显著地在外科以后与病人鈥?幸存时间，对化疗的反应，复发或转移被相关，但是没与组织学，肿瘤尺寸，节点地位，TNM阶段，区别的度，年龄和性别被相关。结论：MRP基因的Overexpression是在有NSCLC的病人的预示的意义的一个标记。

简介：AbstractHistorically, breast cancer has been regarded as an immunogenic "cold" tumor. However, the discovery of immune checkpoint inhibitors has made immunotherapy becoming an emerging new treatment modality for breast cancer. This review discusses the immune system, immune features of breast cancer, and the programmed cell death protein-1/programmed cell death protein ligand-1 (PD-1/PD-L1) inhibitors used in the treatment of breast cancer. High T lymphocyte infiltration and mutation burden were observed in triple-negative breast cancer and human epidermal growth factor receptor 2 positive breast cancer. Increasing breast cancer immunogenicity and modulating the tumor microenvironment has been reported to improve the therapeutic efficacy of immunotherapy. Recent clinical trials involving PD-1/PD-L1 inhibitors monotherapy in breast cancer has revealed little efficacy, which highlights the need to develop combinations of PD-1/PD-L1 inhibitors with chemotherapy, molecularly targeted therapies, and other immunotherapies to maximize the clinical efficacy. Collectively, the immunotherapy might be a promising therapeutic strategy for breast cancer and several clinical trials are still on-going.