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  • 简介:建立了商业化种植的NeWLeaf-YTM转基因马铃薯的筛选检测鉴定PCR方法.该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增FMV35S启动子基因225bp片段和PVY-cp基因161bp片段.PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40s,55℃60s,72℃60s,35次循环;之后72℃延伸5min.本实验中的F-primer(PVY01-5′)/R-primer(PVY01-3′)引物是针对商业化种植的NewLeaf-YTM转基因马铃薯PVY-cp抗病毒基因而设计的,具有很强的特异性,可以达到对NeWLeaf-YTM转基因马铃薯鉴定的目的.

  • 标签: NewLeaf-Y^TM 转基因马铃薯 PCR检测鉴定方法
  • 简介:从小体鲟线粒体基因筛选出位于COI(细胞色素氧化酶)基因中的一段保守序列,针对其设计引物,优化SYBRGreen实时荧光PCR反应体系,建立了一种鉴定小体鲟的实时荧光PCR定性检测方法.该方法检测小体鲟DNA灵敏度为0.04mg/L.通过对采集和市售小体鲟鱼样品检测,该方法检测出样品中的小体鲟成分.实验证明该方法可对血液样品和组织样品中的小体鲟进行种源鉴别.

  • 标签: 小体鲟 SYBR Green 物种鉴定 COI
  • 简介:姚开虎副研究员非常高兴邀清到意大利佛罗伦萨大学附属AnnaMeyer儿童医院ChiaraAzzari教授来北京儿童医院做学术访问,在您的“侵袋性细菌感染的分子学诊断:一个有川的临床一具”的报告中谈到采用分子诊断方法评估意大利肺炎链球菌疾病负担的工作,这些经验对中国开展相关工作具有很好的借鉴意义。

  • 标签: 北京儿童医院 RT-PCR方法 细菌感染 分子学诊断 检测 佛罗伦萨
  • 简介:目的建立临床常见念珠菌的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测技术。方法用真菌通用引物ITS1-ITS4分别扩增白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌5种菌株的ITS1-5.8SrDNA-ITS2区域,然后对扩增产物进行MspⅠ酶切分析。结果5种念珠菌标准菌株经PCR-RFLP分析后产生了5种不同的特异性条带,成功地将临床上常见的5种念珠菌区分开来。应用此方法鉴定了60株临床分离的念珠菌,其PCR-RFLP结果与标准菌株一致,测序结果进一步证实了此方法的可靠性。结论PCR-RFLP检测技术具有快速、稳定、特异、准确性高的特点,在常见致病念珠菌鉴定方面具有良好的临床应用前景。

  • 标签: 念珠菌属 聚合酶链反应
  • 简介:利用分子生物学中的聚合链式反应(PCR方法对毛皮中的貂基因成分进行鉴定检测研究。研究设计了貂线粒体基因特异性引物和探针,优化了PCR反应体系和条件,采用了普通PCR和实时荧光PCR(RT-PCR)两种PCR检测方法进行比较。结果表明,设计的引物和探针在9份貂肉样品中通用性好,在兔、狐狸和貉子等10种其他物质中特异性良好,在于貂毛皮的PCR鉴定检出率为100%。但是在实时荧光PCR检测方法对样品的前处理要求比较高,检出率低于普通PCR检测方法,只有不到66.7%,对于市场上的貂毛皮鉴定检测,还是普通PCR方法比较好。

  • 标签: 毛皮 DNA PCR 检测
  • 简介:通过传统玻片凝集试验对78株沙门氏菌进行血清型检测,结果将这些沙门氏菌分成以鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌为主的21种血清型,其中沙门氏菌SJTUF10023证实为自凝菌,无法鉴定血清型.利用MLST可以较精确地预测、区分不同血清型菌株,聚类的各个分支与血清型基本呈对应关系(96.2%,75/78),其中有3株沙门氏菌(1株阿贡纳、1株阿伯丁和1株斯坦利)聚类结果与血清型不一致.根据O抗原(rfb基因簇)、H1抗原(fliC基因)和H2抗原(fljB基因)分别设计引物进行PCR反应,并与测序相结合,对78株沙门氏菌进行血清型测定,结果仅l株伤寒沙门氏菌的H2抗原出现假阳性结果,准确度达98.7%(77/78),且编号为SJTUF10023的自凝菌被鉴定为鼠伤寒沙门氏菌,说明该方法能够准确、快速检测沙门氏菌血清型,有望在沙门氏菌血清型鉴定中成为替代传统血清分型的方法.

  • 标签: 沙门氏菌 血清型 PCR检测
  • 简介:本研究建立了检测与诊断猪圆环病毒的PCR方法,并对该方法进行了标准化研究。该方法快速、敏感、特异性强,可扩增10ng的阳性质粒的DNA.可以从30μL病料组织悬液或全血中扩增检测PCV,并且该方法可以区分PCV1和PCV-2,对其它病原微生物如PPV、PRRSV、SIV以及许多细菌不能检出。应用此方法对6省市的12个猪场的225份病料进行了检测,对阳性病料进行了病毒分离,对分离的病毒进行了电镜观察与序列测定,结果证实分离的病毒为PCV-2。

  • 标签: 断奶猪多系统衰竭综合征 猪圆环病毒2型 PCR 分离鉴定
  • 简介:摘要目的建立武乡病毒(wuxiang virus, WUXV)的实时荧光定量TaqMan反转录聚合酶链式反应(real-time RT-PCR)检测方法方法从GenBank中下载WUXV的全部基因序列,使用MEGA-X完成多序列比对分析,选择针对S段基因高保守区设计的引物和探针,分别对检测反应的特异性、灵敏性和稳定性进行评价。结果建立的方法可以特异性地检测WUXV,并且与多种虫媒病毒无交叉反应;反应的灵敏度较高,最低检测下限为1 pfu/ml;同一样品重复检测循环阈值(Ct)的批间变异系数均小于1.00%;用本研究建立的TaqMan RT-PCR检测30批白蛉核酸样本,其中7批出现WUXV阳性扩增曲线。结论本研究建立了灵敏度高、特异性强、重复性好的TaqMan RT-PCR方法可用于WUXV的大批量样本筛查。

  • 标签: 武乡病毒 实时荧光定量RT-PCR 检测
  • 简介:近年来,海豚链球病已给我国及世界罗非鱼养殖带来了巨大的经济损失。为建立特异、敏感、快速的罗非鱼海豚链球菌PCR诊断方法,根据NCBI数据库已公布的海豚链球菌基因序列,设计合成种特异性引物CM1/CM2,进行海豚链球菌特异基因片段的PCR扩增试验、反应条件的优化及不同检测材料的比较。同时测试了方法的特异性和敏感性,对不同养殖鱼场的10份临床样品进行了检测。试验结果表明,引物CM1/CM2可以扩增到与预计大小相符的870bp海豚链球菌特异性基因片段;PCR反应与鮰爱德华氏细菌、Ⅰ型荧光假单胞菌、点状产气单胞菌点状亚种、鳗弧菌、温和气单胞菌、肠型点状产气单胞菌、柱状黄杆菌、嗜水气单胞菌和河弧菌水产常见病原菌均无交叉反应;能够检测的最低细菌数为20~30个海豚链球菌;同时,该PCR可以直接从病鱼的脑、肝脏、肾脏及脾脏组织扩增出特异性目的片段;临床菌株检测结果与基于菌株16srRNA基因序列系统进化分析结果一致。由于病鱼内脏组织总DNA、菌落及菌液可直接用于该PCR扩增,最大限度缩短了整个检测时间及降低了检测成本。方法的建立为致病性海豚链球菌检测提供了一种简便、快速的途径,具有较好的应用前景。

  • 标签: 海豚链球菌 PCR 罗非鱼 诊断
  • 简介:摘要进行建筑检测就是要科学、准确地鉴定某一需要检测的建筑实体忘的一个重要构成部分就是建筑结构检测。所谓建筑结构检测就是基于建筑实体的结构稳定性、结构刚度及结构强度等方面来检测鉴定建筑实体,以达到能整体认识建筑物的结构。众所周知在当代社会在所有人类实用物品中建筑是其中的一个极为重要的组成部分,故建筑要具备其存在的价值则不管是其耐久性、还是其适用性或者是其安全性都必须得到足够的保障方可。

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  • 简介:摘要这些年来,社会经济的发展,也在很大的程度上促进了建筑行业的发展。而建筑工程的数量,也随之增多。但是,随着人们的生活水平逐渐提升,人们对于建筑工程的质量又有了更高的要求。从本质上来说,工程质量其实是会受到建筑结构的影响的。因此,在实际情况中,为了能够在最大的程度上保证建筑工程的质量,也必须要加强对建筑结构的检测鉴定。这一内容,也深受人们的重视。在本文中,就针对这方面的内容进行了探讨。

  • 标签: 建筑结构 检测鉴定 鉴定方法
  • 简介:摘要建筑结构影响着建筑整体的稳定性以及质量,为了确保居住者的安全,相关施工单位就需要做好建筑结构检测鉴定工作,但是通过对建筑结构检测部门的了解,发现在其工作过程中还存在着检测鉴定工作失误率较高的情况,这一现状不利于建筑整体的安全性,因此掌握建筑结构检测鉴定方法对于建筑结构检测部门而言至关重要。

  • 标签: 建筑结构 检测 鉴定 方法
  • 简介:摘要本文分析了建筑结构检测鉴定的依据、流程与方法,并结合工程案例对建筑结构检测鉴定技术进行了阐述。

  • 标签: 建筑结构 检测 鉴定
  • 简介:摘要:本论文探讨了建筑工程结构检测鉴定方法的进展与应用。首先,概述了传统和现代检测技术,包括目视检测、非破坏检测、激光扫描和图像处理等方法。然后,详细介绍了建筑工程结构检测的步骤,包括问题定义与准备、检测与数据采集、数据处理与分析、结构鉴定与评估,以及结果报告与建议。本研究强调了标准化和合适的方法选择的重要性,以确保检测的可靠性和准确性。最后,论文总结了建筑工程结构检测的重要性,并强调技术不断进步的潜力,为建筑结构的长期维护提供更好的支持。

  • 标签: 建筑工程 结构检测 非破坏检测
  • 简介:摘要:建筑工程中,质量检测主要目的是监督施工质量,由于建筑施工中对工程质量产生影响的因素比较多,为确保施工质量与标准相符合,应通过有效的检测手段对工程质量进行鉴定。近些年我国产业结构得到不断调整,逐渐放缓了基础设施的建设速度,然而,建筑工程基量却仍旧比较大。对于建筑整体来说,建筑结构是其最为关键的支撑,若结构质量不达标,必将影响到后续工程,导致整体建筑质量难以得到保障。所以,建筑结构检测鉴定对于建筑工程来说非常重要,只有确保检测方法的可靠性与科学性,才能实现检测鉴定工作精准性的稳步提升。鉴于此,本文将针对建筑结构检测鉴定方法展开更为深入的探讨,仅供参考。

  • 标签: 建筑结构检测鉴定 方法 探讨
  • 简介:摘要:建筑结构检测鉴定方法是指通过对建筑结构进行综合评估和分析,确定其质量、安全等级和使用寿命等参数的过程。本文通过对建筑结构检测鉴定方法进行探究,探讨了目前常见的检测鉴定方法及其优缺点,同时分析了未来的研究方向和发展趋势。

  • 标签: 建筑结构 鉴定方式 探究