一测多评法测定丹参中水溶性成分的含量

一测多评法测定丹参中水溶性成分的含量

王适

湖南中医药大学第二附属医院410005

【摘要】目的：建立丹参水溶性提取物四个水溶性成分的一测多评法。方法：以丹参素钠为参照物，对比紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B与丹参素钠的校正因子。通过比较校正因子计算其他成分的含量，同时将计算结果与外标法测定结果对比。结果：各相对校正因子具有良好的校正因子重现性，几种成分相对校正因子计算的量值与外标法测定值之间的对比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：使用一测多评法测量丹参水溶性提取物的内在质量安全可靠，且操作简单，检测结果准确，值得进一步研究使用。

【关键词】丹参提取物；水溶性成分；一测多评法

丹参是唇形科植物丹参的干燥根及根茎，具有活血祛瘀、清心除烦、痛经止痛的作用，可治疗胸壁心痛、月经不调以及痛经闭经等疾病[1]。根据现代药理学研究结果表明，丹参中的丹参素钠、紫草酸、迷迭香及丹酚酸B是活血化瘀功效的主要成分，《中国药典》明确指出[2]，丹参水溶性提取物的质控指标主要为迷迭香酸和丹酚酸B。按照我国传统中医药学的整体观理论[3]，重要的药效应该是多个药物成分共同组成的综合效应，因此，迷迭香酸及丹酚酸B的成分量不能完全反应丹参水溶性提取物的质量，还应该测量更多指标进行评价[5]。

1仪器与试药

使用Agilent高效液相色谱系统（A），Waters600-996高效液相色谱系统（W），色谱柱为DiamonsilC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）。使用HPLC面积归一化法测定丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、二氢丹参酮对照品质量分数，所有对照品质量分数均＞98％。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂为分析纯。丹参样品购置于湖南中医药大学第二附属医院。

2方法及结果

2.1色谱条件

DiamonsilC18色谱柱（H）（4.6mm×250mm，5μm），流动相：0.2％乙腈：乙酸（55：45），流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长270nm。其检测图谱见图1～2。

图2丹参样品（B）的HPLC色谱图

1.二氢丹参酮2.隐丹参酮3.丹参酮Ⅰ4.丹参酮ⅡA

2.2溶液制备

混合对照品溶液制备：分别选取适量丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、二氢丹参酮对照品，精密称量后加入甲醇溶液进行溶解，配制含30μg/mL丹参酮ⅡA、140μg/mL丹参酮Ⅰ、30μg/mL隐丹参酮、5μg/mL二氢丹参酮的溶液。供试品溶液配制：选取0.3g丹参药材粉末，精密称量后置于圆底烧瓶内，使用50mL甲醇，加热回1h后放冷，再添加甲醇补充丢失的质量，摇匀后使用0.454μm微孔滤膜进行过滤，丢弃初滤液，置入棕色瓶中避光保存。

2.3线性关系考察

将混合对照品溶液以1、4、8、12、16、20倍的稀释程度配置成为系列浓度的混合对照品溶液，每样取10μL进样，高效液相法测定，取峰面积进行线性回归分析，发现不同对照品的进样量与峰面积有良好的线性关系，见表1。

3讨论

本次研究中使用了HPLC外标法检测了丹参药材中的丹参酮ⅡA，同时计算了丹参酮ⅡA与丹参酮Ⅰ、隐丹参酮及二氢丹参酮的相对校正因子，以相对校正因子作为依据计算参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、二氢丹参酮的量，完成了一测多评。另外，在本次研究中还通过HPLC外标法测定丹参药材中参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、二氢丹参酮的量，对比使用不同仪器和色谱柱对相对校正因子的影响，结果显示，几种成分相对校正因子计算的量值与外标法测定值之间的对比差异无统计学意义（P＞0.05），说明一测多评法在检测丹参药物成分的定量中具有实用性和可行性。

综上所述，使用一侧多评法测量丹参水溶性提取物的内在质量安全可靠，且操作简单，检测结果准确，值得进一步研究使用。

参考文献：

[1]张晨，邱实，张彦飞等.一测多评法测定丹参中多种指标成分的含量[J].中国老年学杂志，2015（24）：7015-7017.

[2]李锦，赵晓莉.一测多评法在消癥胶囊质量控制中的应用[J].南京中医药大学学报，2016，32（5）：498-500.

[3]黎晶晶，李琳，徐柏颐等.一测多评法测定铁皮石斛黄酮类共有成分[J].浙江农业科学，2016，57（9）：1497-1500，1505.

[4]左岚，孟胜男.一测多评法在中药药物分析中的应用进展[J].中国药房，2016，27（18）：2589-2592.

[5]孙立磊，包永睿，孟宪生等.一测多评法同时测定川芎中5种成分[J].中成药，2016，38（11）：2503-2505.