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  • 简介:目的:探讨RNA干扰技术沉默survivin基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计并合成靶向survivin的小分子干扰RNA(siRNA),在脂质体(lipidosome)的介导下转染人乳腺癌细胞株MCF-7,荧光倒置显微镜观察细胞的转染效率;MTT(四甲基偶氮唑盐)比色法分析检测各组癌细胞的存活率;流式细胞计数检测各组癌细胞周期和凋亡指数;WesternBlot方法观察对MCF-7细胞survivinmRNA和蛋白质表达的抑制效率。结果:Survivin-siRNA能有效封闭survivin基因的表达,使survivin的mRNA相对水平明显降低(P〈0.05);Survivin-siRNA能明显抑制细胞增殖(P〈0.05);Survivin-siRNA使细胞G2/M期细胞百分比明显增加,S期的细胞百分比显著减少(P〈0.05)。结论:利用RNA干扰技术沉默survivin基因的表达可以显著抑制MCF-7细胞的增殖,并在一定程度上诱导其自发凋亡,靶向survivin的RNA干扰技术在乳腺癌的基因治疗中具有一定的研究价值。

  • 标签: RNA干扰 SURVIVIN基因 乳腺癌
  • 简介:摘要目的探究人表皮生长因子样结构域蛋白7(epidermal growth factor-like domain protein 7,EGFL7基因在人宫颈癌细胞Hela中低表达对其迁移与侵袭能力的影响。方法将人宫颈癌细胞Hela分为实验组(Hela细胞转染EGFL7-siRNA)和对照组(Hela细胞转染Mock-siRNA),采用实时定量PCR法检测两组细胞中EGFL7 mRNA的含量;蛋白免疫印迹实验检测两组细胞EGFL7蛋白的表达量;利用细胞划痕愈合实验和transwell实验检测两组Hela细胞的迁移与侵袭能力。结果siRNA降低了人宫颈癌细胞Hela中EGFL7的蛋白表达;对照组Hela细胞划痕愈百分率为74.1%±6.8%,EGFL7表达降低后宫颈癌细胞划痕愈合百分率为42.0%±4.9%,划痕愈合能力明显下降(P<0.05);Transwell细胞转移结果显示,对照组Hela细胞成功转移的细胞数量为179.24±20.01,而低表达EGFL7的Hela细胞成功转移的细胞数量为79.22±13.16,转染EGFL7-siRNA的细胞转移能力显著下降(P<0.05);侵袭实验结果表明,对照组成功转移的细胞数量为79.35±8.04,EGFL7-siRNA组成功转移的细胞数量为26.98±6.24,低表达EGFL7的Hela细胞侵袭能力明显下降(P<0.05);低表达EGFL7的Hela细胞E-cad表达上调,MMP2/9蛋白的表达下调(均P<0.05)。结论EGFL7低表达会通过上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)EMT降低人宫颈癌细胞Hela的迁移与侵袭能力。

  • 标签: EGFL7 宫颈癌 细胞转移能力
  • 简介:宝安凤凰社区有望“农地入市”深圳宝安区凤凰社区将成为我市首个原深圳“农村土地”入市试点,该宗地块位于深圳宝安区福永街道凤凰社区,毗邻深圳机场和广深一级公路,用地面积14568平方米。预计最快将于今年年底实现挂牌出让。

  • 标签: 深圳机场 农地入市 农村土地 一级公路 用地面积 挂牌出让
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  • 简介:[摘 要]:滇西抗战是中国抗日战争的重要组成部分,它促发了滇西民众民族国家意识的觉醒和最终形成,这种觉醒是整个中华民族的共同认知,中国人民正是依靠这种意识成为战胜日本帝国主义的精神力量。

  • 标签: []滇西 抗日战争 民族国家意识
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  • 简介:【摘要】字牌历史悠久、牌理高深。打好字牌和推广字牌是一项很好的娱乐和体育活动。然而至今没有发现有一部有关字牌牌理、规则、规范的书籍。作者企图加以尝试。

  • 标签: 字牌 艺朮 牌规 牌技
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  • 简介:目的鉴于骨形态发生蛋白(bonemorphogeneticprotein,BMP)异源二聚体较BMP同源二聚体有更高效的诱导成骨作用,比较研究纯化的重组人BMP2/7(rhBMP2/7)异源二聚体与rhBMP2和/或rhBMP7同源二聚体在诱导细胞成骨分化上相关基因的表达变化.方法以不同浓度的3种rhBMPs作用于成骨前体细胞MC3T3-E1,检测细胞碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性变化,比较研究成骨分化相关基因ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Ⅰ型胶原蛋白(collagentypeⅠα1,Coll)以及核心结合因子(runt-relatedtranscriptionfactor2,Runx2/corebindingfactorαl,Cbfαl)的表达变化.结果RhBMP2/7异源二聚体上调细胞ALP活性的浓度效应呈钟形曲线;其诱导细胞成骨相关基因的表达也呈类似的钟形曲线;而相应的同源二聚体则呈现浓度依赖效应递增曲线.此外,rhBMP2/7异源二聚体与rhBMPs同源二聚体相比,诱导的Runx2的基因表达变化不同于ALP、OCN或Coll基因表达,提示后3种基因的表达并不完全依赖于Runx2基因的表达转录.结论RhBMP2/7异源二聚体在诱导细胞成骨分化基因表达上仅在早期以及较低浓度范围内与相应rhBMPs同源二聚体有显著性差异;基因表达转录后,成骨相关蛋白的合成、修饰及活化程度不同更可能是造成rhBMP2/7异源二聚体与相应同源二聚体生物学活性差异的主要原因.

  • 标签: 骨形态发生蛋白 异源二聚体 同源二聚体 成骨分化 基因表达
  • 简介:目的构建Wilson病基因ATP7B的重组腺病毒载体.方法分别以BamHⅠ+SalⅠ双酶切pcDNA3.0/ATP7B和pDC315,将ATP7BcDNA目的基因片段和线性化的pDC315连接,定向克隆构建pDC315/ATP7B,以PCR和酶切的方法鉴定.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞构建Ad-ATP7B,PCR进行鉴定.结果经PCR和酶切鉴定证实pDC315/ATP7B构建成功.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功.经PCR证实重组腺病毒Ad-ATP7B构建已完成.结论本实验成功构建了ATP7B外源目的基因序列完全正确的重组腺病毒载体Ad-ATP7B,为下一步采用ATP7B基因重组腺病毒载体对Wilson病进行基因治疗打下了基础.

  • 标签: 基因重组腺病毒载体 ATP7B WILSON病基因 293细胞 pcDNA3 BamHⅠ
  • 简介:宝马氢能7系亮相柏林,标志着世界上第一款供日常使用、几近零排放的氢动力驱动豪华轿车的诞生这是一个里程碑式的轿车,在它身上,环保与奢华找到了平衡点。

  • 标签: 氢能 宝马 豪华轿车 日常使用 动力驱动 近零排放
  • 简介:κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin,κ-BGT)属于突触后神经毒素,能选择性的识别α3β2亚型的神经元烟碱乙酰胆碱受体,可作为药理学研究的工具药。由于κ—BGT分离提取比较困难,难于从自然界中大量获取,无法满足各项研究的需要,所以本文探讨在大肠杆菌和毕赤酵母表达体系中表达κ—BGT及其在实验室规模生产的可行性。

  • 标签: 表达 银环蛇毒素 乙酰胆碱受体 药理学研究 亚型 基因
  • 简介:如何利用社交媒体产生更强大的传播效应?近日,香港金佰利公司旗下的“好奇”纸尿裤品牌就给人们上了生动的一课。

  • 标签: NIKE 好奇 社交 SNS 户外 迁移
  • 简介:<正>PartOne:QuickResponsesPleasemakeaquickresponsetothesentenceyouwillhear.1.Youlookpaletoday.What’swrongwithyou?2.Whatalovelycaryou’vebought!

  • 标签: SENTENCE HAVEN REALLY TODAY WRONG think
  • 简介:与X6ActiveHybrid相比,7系ActiveHybrid要靠谱得多。这个世界可以不要那些只能在城市行驶的豪华SUV,但却不能没有7系这种豪华大轿车。即使富人们决定不坐大轿车,各国政要们也不能同意。7系代表着年轻的形象,而年轻是每个人都向往的东西。只是当那些名人们

  • 标签: 混合动力车 自动变速箱 每个人 大排量 汽油发动机 哥本哈根
  • 简介:2003年,我国国内生产总值比上年增长9.1%,人均国内生产总值突破1000美元,实现了经济发展的历史性跨越。温家宝总理在《政府工作报告》中提出,今年经济增长预期目标为7%左右,比去年的9.1%低了两个百分点。

  • 标签: “7%” 经济增长预期目标 中国 《政府工作报告》 高中 政治课
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  • 简介:目的:检测Wnt7a在肝癌中的表达,分析Wnt7a对肝癌细胞活性、凋亡、迁移及侵袭的影响,探讨Wnt7a在肝癌中的作用。方法:分别采用免疫组织化学染色和Westernblot检测组织和细胞系中Wnt7a的表达情况;Hep3B细胞经人重组Wnt7a蛋白(rWnt7a)处理后,MTT法检测细胞活性改变,流式细胞仪检测细胞凋亡变化,Transwell分析细胞迁移及侵袭能力变化。结果:相对于癌旁组织,肿瘤组织低表达Wnt7a蛋白;经rWnt7a处理后,Hep3B细胞活性降低、细胞凋亡增多且迁移与侵袭能力下降。结论:Wnt7a蛋白能抑制Hep3B细胞生长、迁移与侵袭能力,可能在肝癌中发挥抑癌作用。

  • 标签: 肝癌 Wnt7a 凋亡 迁移 侵袭