简介：目的建立椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性（FAFLP）分型方法,并对4株模式菌株和19株分离菌株进行分型。方法选用4种低频限制性内切酶（ApaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和PstⅠ）和2种高频限制性内切酶（MseⅠ和TaqⅠ）进行组合,对FAFLP预扩增和选择性扩增体系进行优化,用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析,并与VITEK2GN生化结果和16SrDNA序列分析进行比较。结果ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为7个群,菌株间最低相似度为80.85%,最高相似度为98.77%。PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为10个群,菌株间最低相似度为48.68%,最高相似度为99.67%。两种FAFLP组合均能将菌株进行完全区分,而VITEK2GN和16SrDNA序列分析无法将菌株进行完全区分。结论ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合与PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合FAFLP对椰毒假单胞菌酵米面亚种具有足够的分辨率,本研究建立的FAFLP分型方法可应用于椰毒假单胞菌酵米面亚种的分子分型和溯源。

简介：目的利用限制性酶切片段长度多态性(RFLP)及变性高效液相色谱法(DHPLC)筛选和鉴定脑胶质瘤易感基因--切除修复鼠缺陷交叉互补基因2(ERCC2)的单核苷酸多态性(SNPs).方法应用PCR扩增179例胶质瘤病人肿瘤及血液标本和44例正常对照组血液标本ERCC2基因第23外显子及其邻近的部分内含子序列,采用限制性酶切及DHPLC技术对扩增片段进行基因变异检测,直接测序不同类型的PCR片段,并与参考序列进行对比分析.结果在此片段中验证了一个已知白种人存在的SNP位点.结论黄种人亦存在rs13181,并影响蛋白编码;可能与胶质瘤的发病有关联.DHPLC相对于RFLP来说是一种高效、经济、简便、可靠的SNPs筛选方法.

简介：目的：建立一种适合以红花cDNA为模板进行相关序列扩增多态性（SRAP）扩增的体系,筛选最佳的SRAP-PCR反应条件。方法：提取红花RNA并反转录成cDNA,以此为模板,使用正交设计表设计PCR反应中的3个重要因素Taq酶、三磷酸脱氧核苷（dNTPs）、引物的反应浓度。随后设计Mg^2＋的反应浓度以及模板含量,分别进行单因素试验。结果：本研究建立的红花cDNA-SRAP扩增条件为：25μL反应体系中含模板cDNA20ng,1×PCR缓冲液2.5mmol/L,Mg^2＋2.0mmol/L,TaqDNA聚合酶0.04U/μL,dNTPs0.2mmol/L,引物0.2μmol/L。优化后扩增结果稳定性好,条带清晰,多态性好。结论：该体系为红花功能基因的研究奠定了基础。

简介：目的研究建立12个mini-X-STR和Amel基因座复合扩增体系。方法选择DXS101、DXS10159、DXS10162、DXS10164、DXS6789、DXS7133、DXS7423、DXS7424、DXS8378、DXS981、GATA165B12和GA-TA31E08共12个X-STR与Amelogenin基因座,自行设计引物,分别采用FAM、HEX、Tamra、ROX四色荧光标记5′端,并进行必要的修饰,按照合适的引物浓度进行混合。对97个血痕样本进行复合扩增,并用ABI3130XL进行电泳和分型。结果所建立的荧光标记复合扩增体系能够得到清晰、明确的分型图谱,灵敏度达50pg,稳定性、重复性与平衡性较佳。结论本研究建立的12个mini-X-STR和Amel基因座荧光标记复合扩增体系统检验方法简单,灵敏度高,适合实际办案的需要。

简介：对广东现行家蚕生产品种9·芙×7·湘杂交亲本的基因组进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析.统计了932、7532、芙蓉、湘晖、9·芙、7·湘品种的蚕卵70个随机引物的RAPD扩增标记数,经计算其遗传相似系数,作遗传距离分析,同一系统内的品种间遗传差异小,系统间的品种遗传差异大,与传统的家蚕系统分类的结果完全相符.因此RAPD作为有效的跗标记.可适用于研究家蚕品种的遗传多样性、起源以及系统的演变分化.

简介：摘要目的研究抵抗素基因-420C/G位点多态性PCR扩增体系优化的实验条件。方法对实验研究中的主要影响因素设置各系列浓度和梯度，进行PCR反应后观察电泳结果，选取最适条件。结果最适温度为55°C，最适Mg2+浓度为1.5mmol/L，最适dNTP浓度为2.5mmol/L。最适扩增循环为35个循环。结论探索抵抗素基因多态性检测的最适实验条件，优化抵抗素基因多态性PCR扩增体系，使其扩增获得最高产物率。

简介：摘要 目的  了解医院环境清洁消毒情况，通过荧光标记法监测提高医院环境清洁合格率。方法 通过荧光笔涂抹标记物体表面，清洁后用紫外线灯对标记点是否清除干净进行查看。结果 荧光标记法干预后医院医院环境清洁合格率从62%提高至86.2%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 荧光标记法简便、易操作、能客观、快速地评价保洁人员的清洁消毒质量，有效提高医院环境清洁合格率。

简介：通过响应面法优化金针菇多糖热水浸提的最佳工艺,并用异硫氰酸荧光素（FITC）标记金针菇多糖（FVP）,研究标记多糖的体外稳定性和细胞毒性。结果表明：优化的最佳浸提条件为液料比41∶1（mL∶g）、提取温度92℃、提取时间3h,金针菇多糖的提取率为4.87%;通过还原胺化反应实现了金针菇多糖的FITC标记,FITC的取代度为0.90%,在24h内标记的金针菇多糖体外稳定性良好,且不影响FVP的抑瘤活性。

简介：摘要：医疗机构环境清洁消毒措施的有效落实是降低医疗污染，防止医院内交叉感染的关键手段，保洁员在医疗机构担负着相当重要的环境清洁消毒卫生任务。常用的日常清洁消毒质量检查以目测法为主。另外也有采用ATP法、微生物法进行检查，但这两种方法人力、经济成本高，操作相对复杂。目前，荧光标记法采用荧光笔在物表层画出不可视但可用湿巾擦除的记号，并在极紫外手电筒灯光下显蓝紫色，能客观有效即时地评判清洁效果，避免遗漏清洁消毒盲区。本文将着重探索简便易行、直观可见的荧光标记法在医疗环境清洁质量评价及保洁员清洁措施依从性检查中的有效运用。

简介：目的：利用磁珠富集法分离北柴胡微卫星序列，以开发北柴胡微卫星引物，获得有多态性的简单序列重复（SSR）标记。方法：用生物素标记的混合探针（AC）15、（AG）15、（MAB）12：和两端连接已知序列人工接头的北柴胡基因组DNA酶切片段混和后与磁珠杂交，构建微卫星序列富集的小片段插入文库；利用接头引物分别与生物素探针引物Biotin-（Ac）15、Biotin-（AG）15、Biontin-（MAB）。2形成3个组合，用PCR方法对文库进行初步筛选；对可能的阳性克隆子进行测序复筛，选取微卫星侧翼序列足够长的序列设计引物，用荧光标记的基因分型技术以栽培柴胡种质为材料分析其多态性。结果：开发了5对多态性SSR标记，它们在5份柴胡栽培种质中共扩增出30．70个多态性等位基因，平均每条引物可以扩增出6．14个多态性等位基因；观察等位基因数最多13个，最少3个；有效等位基因数最多11．4个，最少1．6个。同时分析了4对EST-SSR引物，比较了2种SSR标记扩增结果。结论：磁珠富集法是开发柴胡多态性SSR标记的有效方法。

简介：目的：筛选豚鼠基因组的多态性微卫星标记，为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础。方法采用磁珠富集法和豚鼠基因组数据库筛选法获取微卫星位点序列，通过分析和初步筛选，挑选部分候选位点，根据其序列设计引物，对5种不同来源的豚鼠基因组DNA标本进行PCR扩增，以期获得多态性分子标记。结果本实验采用磁珠富集法共获得微卫星序列304个，设计引物125对，最终获得多态性位点1个，暂未发现多态性的特异性位点17个；用数据库筛选法共获得微卫星序列292个，设计并合成相应引物178对，最终发现多态性位点25个，暂未发现多态性的特异性位点28个。结论本实验获得26个多态性微卫星标记，45个潜在的候选标记，为微卫星标记在豚鼠遗传质量监测及突变基因定位等工作的应用奠定了基础。

简介：通过RAPD法得到的不同产地玉竹的遗传距离（略）,引物筛选及RAPD分析［5,通过ISSR法得到的不同产地玉竹的遗传距离（略）

简介：通过体外和小鼠体内试验，验证荧光标记的小刺猴头菌多糖的稳定性和生物体内代谢途径。结果表明：标记后的小刺猴头菌多糖体外稳定性在24h内良好，小鼠体内代谢途径主要通过消化系统代谢，并在8h内基本代谢完毕，这一结果为荧光标记真菌多糖的药理活性提供了依据。

简介：

简介：摘要目的研究荧光标记法在医院环境清洁质量评估中的应用效果。方法研究对象选取我院2017年1月到2018年1月间的60个房间，按照单双号将其分为两组，每组30个病房。普通组病房接受常规质量评估，观察组接受荧光标记法进行质量评估。比较两组病房干预后的病床、床头柜、输液杆、地面等主要设施的清洁程度，同时比较荧光标记法和传统微生物培养法的检测结果差异。结果观察组病房的病床、床头柜、输液杆、地面等主要设施清洁质量合格率均明显高于普通组（allP<0.05），且荧光标记法的检验结果与传统微生物培养法的测定结果差异无明显意义（X2=0.92，P=0.34）、（X2=0.08，P=0.78）。结论荧光标记法干预可明显提高医院环境的清洁质量，减少病房的细菌病毒数量，且结果评测价值可信度较高，值得在临床推广。

简介：摘要目的L-myc基因EcoRI多态性位于非编码区的第二内含子内,引起短型(S)和长(L)型两种基因型。研究结论不一,一般认为短型基因的携带者具有更高的肿瘤易感性和更差的预后。本研究的目的是探讨这一多态性在中国人群中与胃癌的关系。方法90名胃癌患者和100名健康个体的资料被用于研究。多聚酶链反应(PCR)和EcoRI限制性内切酶反应被用于实验。结果L-myc基因型的分布在肿瘤(LL26.7%;LS40.0%;SS33.3%)和正常人群(LL8.0%;LS68.0%;SS24.0%)中没有显著差异。L-myc短基因型与肿瘤淋巴结的转移相关(P<0.05),而与其它临床资料无关。这一多态性与胃癌的易感性也无关。结论研究结果提示在中国胃癌患者中L-myc基因EcoRI多态性影响胃癌淋巴结转移的发展。

简介：目的了解A组乙型溶血性链球菌的基因分型状况.方法采用随机扩增多态性DNA技术(RandomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD),对1988～1994年度,从广东城市和农村,1993～1994年度,从湖北、吉林9～11岁学龄儿童分离的179株GAS进行RAPD分析.结果①同一T型的菌株有特征性条带,但有些亚型带型间差异较大;②不同T型间可有相同的带型;③分型率比T分型高,达到96.6%;④有主导RAPD型菌株流行的情况存在.结论RAPD方法对GAS分型及流行病学中有一定的应用价值,可以区别同一血清型不同地区来源的GAS.

简介：摘要目的探讨荧光标记聚合物胶束在实验性肝癌小鼠体内的靶向效应。方法选取10只昆明种小鼠，将其随机分为罗丹明胶束组与游离罗丹明组，每组5只。比较两组小鼠活体成像情况及小鼠药物注射后的1,3,6,12,24,48h活体成像荧光强度值。结果（1）游离组小鼠给药1h以内，游离的罗丹明会随着血液循环快速地遍布患者全身，药物代谢速度较大，24h之后药物代谢保持较大程度；罗丹明胶束组给药之后，小鼠体内药物水平会缓缓升高，3h肿瘤发生药物集聚情况，6h药物水平达到峰值，12h时药物水平仍然处于较高水平；（2）罗丹明胶束组小鼠在不同时间点活体成像荧光强度比值均高于相应时间点的游离罗丹明组（P＜0.05～0.01）。结论荧光标记聚合物胶束在实验性肝癌小鼠体内具有非常明显的靶向效应，从而为选择合理抗癌药物提供一定的依据。

简介：同学们在解和线段有关的题目时，容易出现和线段长度计算有关的错误．产生错误主要是由于解题时考虑不全面．

简介：以产地和龙的7个居群为试材研究了同一产地不同居群刺五加的RAPD遗传多样性,为了研究不同产地刺五加间的遗传多样性,不同产地刺五加之间的遗传多样性高于同一产地不同居群的个体