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  • 简介:目的:探讨中间普氏菌培养对牙龈成纤维细胞核因子-κB受体活化因子配体(receptoractivatorfornuclearfactor-κBligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达的影响。方法:将系列浓度的中间普氏菌培养作用于牙龈成纤维细胞,显微镜下观察细胞的变化。实时定量RT-PCR法和Westernblot法分别检测RANKL、OPGmRNA及蛋白水平的表达,并计算RANKL/OPG的比值。结果:牙龈成纤维细胞的数量随中间普氏菌培养浓度的增加而减少,50μg/mL时,显微镜下没有活细胞存在。在mRNA水平上和蛋白水平上,RANKL/OPG的比值在12.5μg/mL处理组均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:中间普氏菌培养可诱导人牙龈成纤维细胞表达RANKL和OPG,破坏RANKL/OPG比例的平衡,影响破骨细胞分化的细胞因子微环境,在破骨细胞分化和牙周炎骨吸收中起着一定的调节作用。

  • 标签: 中间普氏菌 牙龈成纤维细胞 核因子-ΚB受体活化因子配体 骨保护素
  • 简介:目的:观察角膜缘干细胞培养液对血管内皮细胞增殖的影响。方法:分别培养角膜缘干细胞及球结膜上皮细胞,并通过免疫组化检测AE-5蛋白鉴别角膜缘干细胞。搜集两组培养细胞的上清液加入培养的人脐静脉血管内皮细胞中,并设立对照组。培养24h后通过MTT法检测细胞增殖情况并进行统计学分析。结果:角膜缘干细胞AE-5染色呈阴性,而球结膜上皮细胞为阳性。加入角膜缘干细球结膜上皮细胞和对照组培养液的血管内皮细胞MTT值分别为2.097±0.079,1.981±0.034和1.990±0.044。三组间有显著性差异(F=9.169,P=0.000)。加入角膜缘干细胞培养液的血管内皮细胞增殖活性明显高于其他两组(P=0.005和P=0.007)。结论:角膜缘干细胞培养液能够促进血管内皮细胞的增殖,这可能是角膜缘干细胞的特征。本研究从功能学角度为角膜缘干细胞理论提供更多的依据。

  • 标签: 角膜缘干细胞 上清液 血管内皮细胞 MTT
  • 简介:摘要目的探讨粪肠球菌培养液诱导人牙周膜细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC)的炎症反应及其在压力状态下的表达变化。方法噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同体积分数[0%(对照组)、1%、2%、5%、10%和20%]的粪肠球菌上清液对hPDLC增殖活性的影响,采用流式细胞术检测粪肠球菌上清液刺激24 h后hPDLC表面Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR-2)表达的改变;依据MTT及流式细胞术结果,将hPDLC分为不含粪肠球菌上清液的非诱导组与含5%粪肠球菌上清液的诱导组,每组均分别加载0、49及196 Pa的静压力,非诱导组和诱导组均以未加力(0 Pa)状态为对照。24 h 后观察hPDLC的形态变化,通过反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测hPDLC肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的mRNA和蛋白表达水平。结果MTT法结果显示,培养48 h时,与对照组相比体积分数≥5%的粪肠球菌上清液能显著降低hPDLC的增殖活性(P<0.05)。流式细胞术结果显示,粪肠球菌上清液刺激hPDLC 24 h后其表面TLR-2阳性细胞率随上清液体积分数的增加而增加,0%、1%、2%、5%、10%和20%体积分数的上清液TLR-2阳性细胞率分别为(2.12±0.07)%、(2.41±0.32)%、(2.65±0.27)%、(4.76±0.46)%、(9.91±0.92)%、(12.01±1.35)%,体积分数≥5%时与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,非诱导组施加49 Pa压力时,hPDLC IL-1β和TNF-α mRNA表达与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05),施加196 Pa压力时,hPDLC IL-1β和TNF-α mRNA表达与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);而诱导组施加49和196 Pa压力时,hPDLC IL-1β和TNF-α mRNA表达均显著升高,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果与PCR结果趋势一致。结论高浓度的粪肠球菌上清液能抑制hPDLC的增殖活性;粪肠球菌上清液可以促进hPDLC表面TLR-2的表达;过度的机械压力可引起hPDLC细胞的炎症反应,导致hPDLC对压力不耐受,引起炎症反应加重。

  • 标签: 肠球菌,粪 细胞,培养的 根尖周炎 牙周膜成纤维细胞 压力
  • 简介:在动物细胞培养过程中,血清的存在能满足细胞的生长繁殖需求,但实际生产中血清提取工艺复杂,成本高昂,给大规模生产带来困难,不利于商业化开发。常见细胞源疫苗血清残留对疫苗免疫效果有很大的影响,而无血清培养基避免了血清所带来的血源性污染等问题,其成分和含量明确,制备流程简易,提高了实验的稳定性和准确性,有利于获得高质量的生物产品,与天然培养基等传统的培养基相比有着许多优势。随着生物科学的发展,细胞血清培养技术的创新和应用已成为生物工程重点研究课题。我们简要综述了无血清驯化细胞的发展历程、应用,及血清培养基的组成成分、优缺点等内容,以期对未来细胞培养技术的发展进程提供助力。

  • 标签: 无血清 培养 细胞株
  • 简介:摘要目的比较人脐带Wharton′s Jelly来源间充质干细胞(WJ-MSC)与脂肪来源间充质干细胞(AD-MSC)培养对内皮细胞血管新生的促进作用。方法酶消化法分离获得WJ-MSC及AD-MSC,分别收集其培养并与内皮细胞共培养。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测内皮细胞中促进血管新生相关基因和抑制血管新生基因的表达;Matrigel体外成管实验检测其对内皮细胞管网状结构形成的作用。结果WJ-MSC和AD-MSC培养分别与内皮细胞共培养后,内皮细胞促血管新生相关基因的表达水平显著升高,抑制血管新生相关基因表达降低(P<0.01),与对照组相比,WJ-MSC组及AD-MSC组内皮细胞体外管网状结构的形成均显著高于对照组(43.2 mm±9.2 mm和94.3 mm±13.2 mm,86.1 mm±7.2 mm,P<0.01)。结论WJ-MSC与AD-MSC培养对内皮细胞血管新生均具有促进作用,且二者的促进作用相当。

  • 标签: 间充质干细胞 内皮细胞 共培养 血管新生
  • 简介:摘要目的白血病细胞能够通过自分泌方式分泌细胞因子而作用于自身,使细胞大量的增殖而不分化;白血病细胞所分泌的细胞因子也能作用于人脐带血(UCB)单个核细胞(MNCs)中的CD34+/CD133+细胞亚群使之增殖而抑制其分化。关于急性早幼粒白血病细胞(HL-60细胞)培养液能否使UCB-MNCs分化尚未见报道,本实验主要目的是观察HL-60细胞培养液对人UCB-MNCs分化的影响。方法实验分为①有HL-60细胞培养液+StemSpan®SFEM组;②StemSpan®SFEM组;③HL-60细胞培养液+高糖(HG)-DMEM组;④HG-DMEM组;⑤HL-60细胞培养液+低糖(LG)-DMEM组;⑥LG-DMEM组。收分离的人UCB-MNCs按2.5×106/瓶分别接种于6组培养液中,37℃,5%CO2,饱和湿度培养,于培养前和培养12天用流式细胞仪(FCM)分析表型CD34,CD90和CD166的变化。结果各实验组CD34,CD34/CD90和CD166阳性细胞百分比均较培养前升高。结论HL-60细胞培养液对人UCB-MNCs具有一定的抑制分化作用,其有效生物活性物质有待进一步研究。

  • 标签: HL-60细胞 上清液 单个核细胞 分化
  • 简介:当前,本科毕业生“回炉”高职成为社会热点话题,也引起了教育界的反思和探讨。我认为,这种现象说明了人们学习观念上的进步,也说明了高校人才培养的失误,不应该、也不会成为一种时尚。

  • 标签: 人才培养 本科毕业生 学习观念 教育界
  • 简介:目的探讨强直性脊柱炎(AS)滑膜细胞培养液对韧带成纤维细胞成骨分化的影响。方法分别进行AS患者滑膜和韧带成纤维细胞原代培养,收集第1代的滑膜细胞培养上清液,应用此上清液对韧带成纤维细胞进行诱导,分别于0、5、10、15、20d检测碱性磷酸酶和骨钙素表达水平,并于25d时进行钙结节染色。结果在应用AS滑膜细胞培养液对韧带成纤维细胞进行诱导的第10天,碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)表达水平明显升高,并在第15天达到高峰。第25天时进行钙结节VonKossa染色,发现有钙结节形成。结论AS滑膜细胞培养液对韧带成纤维细胞具有成骨诱导分化的能力。

  • 标签: 脊柱炎 强直性 滑膜 韧带 成纤维细胞
  • 简介:摘要肺癌是第一大常见恶性肿瘤,肺癌干细胞的研究为肺癌诊断和治疗带来新的契机。为更好了解肺癌干细胞以及研究靶向肺癌干细胞的肿瘤疗法,肺癌干细胞的分离鉴定显得尤为重要。血清培养法已经是分离培养肿瘤干细胞的经典方法,也被广泛应用于肺癌干细胞的分离。本文综述了无血清培养基分离肿瘤干细胞的研究应用。

  • 标签: 肺癌干细胞 无血清培养基 分离
  • 简介:本研究观察血清培养培养的人脐带间充质干细胞(UC-MSC),并比较与含10%胎牛血清培养培养的人脐带间充质干细胞的异同.采集正常足月剖宫产胎儿脐带,用MesenCult-XF血清培养液或含10%胎牛血清培养培养.观察不同培养培养的间充质干细胞细胞的形态、免疫表型、细胞周期、增殖分化潜能及对混合淋巴细胞反应的抑制作用.结果表明,采用血清MesenCult(R)-XF培养培养的MSC平均传代倍增6.57±0.7倍,含血清培养培养的MSC平均传代倍增4,59±0.45倍(P<0.05);两种培养培养的MSC均表达CD44、CD90、CD73、CD105抗原,不表达CD31、CD45、HLA-DR及CD34等抗原,表达程度无明显统计学差异;血清培养培养的MSC(65±5.2)%均为G0/G1期细胞,含血清培养培养的MSC(62±3.1)%为G0/G1期细胞(P>0.05);两种培养培养的人脐带MSC均可向成脂细胞、成骨细胞分化;血清培养培养的脐带MSC按1000、5000、10000、20000个细胞/孔接种密度与反应细胞和刺激细胞共培养的每分钟闪烁值(CPM)分别为(6.43±0.47)×104、(4.30±0.38)×104、(1.97±0.13)×104和(0.24±0.03)×104,含血清培养培养的MSC与不同密度的混合淋巴细胞共培养的CPM值分别为(7.85±0.07)×104、(5.64±0.12)×104、(3.09±0.18)×104和(1.73±0.05)×104.结论:血清培养培养的细胞均为MSC,有传代增殖潜能,传代可达临床治疗MSC细胞量,并可避免异种蛋白致敏.

  • 标签: 脐带间充质干细胞 无血清培养液 MesenCult-XF无血清培养液 细胞治疗
  • 简介:摘要目的研究人急性白血病细胞株(HL-60)上清液对人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell,HUVECs)血管形成能力的影响。方法以单独培养HUVECs为对照组,以HUVECs加HL-60细胞培养为实验组。采用MTT比色法分别在24h、48h、72h检测两组中HUVECs的吸光值;采用RT-PCR技术检测两组中HUVECs周期蛋白E(cyclinE)mRNA及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达情况。结果实验组与对照组相比HUVECs增殖速度加快,72小时后差异有显著性意义(p〈0.05)。72小时后,实验组中HUVECsCyclinEmRNA及VEGFmRNA表达明显增加,与对照组相比差异具有显著性意义(p〈0.01)。结论HL-60细胞培养液能够增强HUVECs的血管形成能力。

  • 标签: 上清液 周期蛋白E 血管内皮生长因子
  • 简介:本文探讨《上清经》与上清派的命名、《上清原统经目注序》的撰作时间和作者以及东晋《上清经》的成书等问题。着重考察了华侨、杨羲、许谧、许翽等制作的首批上清经、传、诰的情况,并列书名、篇目;同时指出《上清经》的某些复杂性质。本文对与经书相关的道教分派标准问题也提出了自己的见解。

  • 标签: 《上清经》 道教派别 《上清原统经目注序》 东晋《上清经》
  • 简介:~~

  • 标签: 上清
  • 简介:摘要:文章主要是分析了Vero 细胞血清培养基的组成,在此基础上讲解了Vero细胞血清细胞培养基的发展,望可以为有关人员提供到一定的参考和帮助。

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  • 简介:核心素养是指:学生在接受相应学段的教育过程中,逐步形成的适应个人终身发展和社会发展需要的必备品格和关键能力.初高中物理各有一个相对完整的知识体系,对知识层次的要求是螺旋上升的,要求学生对不少物理现象的了解是从定性到定量逐步深化的,尤其是高中阶段对矢量的要求大幅提升.通过处理好初高中物理教学知识的衔接,注意好知识的阶段性,对比相近物理量含义及用法的异同,从而全面提高中学生物理学科的核心素养.

  • 标签: 核心素养 初高中衔接 例析方法
  • 简介:一、问题的提出93年全运会女排决赛中,上海对辽宁一平后的第三局.我队以9:4领先,形势相当有利,但二传手竞连传五个球给四号位强攻,由于进攻位点过于集中,又不够拉开被辽宁队连拦五个,使原有优势倾刻化为乌有。由于二传手关键时刻不善避实击虚,不敢大胆组织战术进攻的旧病复发,使我们向冠军宝座的冲击又遭失败,痛失良机,屈居亚军。经过总结,一致认为,在排球界共同努

  • 标签: 二传手 女排决赛 二传技术 避实击 国际比赛 排球
  • 简介:上清丸这个名字,大概没多少人不认识,许多家庭的小药箱里也常备这种药。有时感冒后咽喉疼痛、牙龈肿痛、便秘等,老妈就会说,“去拿几颗上清丸吃吃”,于是脑海中有一个印象:上清丸就是一种清热药。到了药店才发现,上清丸有那么多种类,既有就“上清丸”三个字的,也有黄连上清丸、牛黄上清丸等等。按理说,这些药的功效应该有所不同,但每个说明书似乎都列出了一些头痛眩晕、咽喉肿痛等“上火”征象,具体有什么区别?

  • 标签: 黄连上清丸 牛黄上清丸 咽喉疼痛 牙龈肿痛 头痛眩晕 “上火”
  • 简介:[摘要] 创造性学习的4个“P”,项目(Project)、热情(Passion)、同伴(Peers)和游戏(Play),在培养科学核心素养上是一个非常有价值的框架,是培养与小学科学教学关系最密切的科学精神和实践创新两大素养的有效路径。

  • 标签: [] 创造性学习 核心素养
  • 简介:摘要:小学数学有十大核心素养的培养要求:数感、符号意识、空间观念、几何直观、数据分析观念、运算能力、推理能力、模型思想、应用意识和创新意识。教师可以将这些提取为三大数学素养培养方向。而信息技术在培养这三大方面的数学素养上通常发挥着重要作用,且具体的信息技术工具可以有效相应地促进学生某一数学素养的提升。人工智能可以用以增强学生的数学运算能力;电子白板可以动态化展示图形的变换,从而实现对学生空间立体思维能力的培养;思维导图则可以在强化学生的逻辑推理能力上大展用途。

  • 标签: 小学数学 信息技术 核心素养