简介：维护人类健康,提高全民健康水平,加强对重大疾病及疫情的预防与控制,是稳定社会、保障经济发展、强国健民的重要举措,是各国政府面临的重要任务之一.

简介：摘要病毒检测在病毒感染的预防、诊断、治疗及病毒性疫苗的质量控制等方面发挥着重要的作用。实时荧光定量PCR通过荧光信号实时检测目的基因扩增数量，是目前实验室最常用的的病毒检测技术，具有灵敏度高、检测快速、污染小等优点。此文对实时荧光定量PCR技术在病毒感染的快速诊断、病毒核酸定量检测和病毒型别的鉴定三个方面的应用进行阐述。

简介：【摘要】：实时荧光定量 PCR 技术是普通聚合酶链式反应技术基础上演变起来，一种灵敏度较高的核算定量技术。与常规 PCR 相比，它的不同之处在于其根据 PCR 产物中莹光信号的强度定量 , 不仅提高了反应的特异性和自动化程度，而且有效解决 PCR 污染等问题，实现了检测质量的飞跃 . 当前已经被广泛应用于医学诊断和环境监测多种领域的研究，本文对实时荧光定量 PCR 的原理，分类以及应用做一系统性综述。

简介：[摘要 ] 目的：探讨长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)干扰后，在人支气管上皮细胞（ the human bronchial epithelial cells， 16HBE）中的表达情况。方法 :应用 real-timePCR方法检验 lncRNA- ENST00000414355干扰效果。结果 : 正常 16HBE细胞中 ENST00000414355干扰 48h后，三条阳性序列的实验组 ENST00000414355表达均下降，都具有统计学意义 P值均 <0.0001；在氯化镉转化 16HBE成瘤细胞中 ENST00000414355干扰后，第一条阳性序列转染下达到沉默效果，且具有统计学意义 P<0.0001；在氯化镉转化 16HBE第 35代细胞在 ENST00000414355三条阳性序列转染下没有出现沉默效果所示。结论： ENST00000414355在正常 16HBE细胞中干扰效果最明显，在氯化镉转化 16HBE成瘤细胞中只有一条序列有干扰效果。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)干扰后，在人支气管上皮细胞（thehumanbronchialepithelialcells，16HBE）中的表达情况。方法应用real-timePCR方法检验lncRNA-ENST00000414355干扰效果。结果正常16HBE细胞中ENST00000414355干扰48h后，三条阳性序列的实验组ENST00000414355表达均下降，都具有统计学意义P值均<0.0001；在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中ENST00000414355干扰后，第一条阳性序列转染下达到沉默效果，且具有统计学意义P<0.0001；在氯化镉转化16HBE第35代细胞在ENST00000414355三条阳性序列转染下没有出现沉默效果所示。结论ENST00000414355在正常16HBE细胞中干扰效果最明显，在氯化镉转化16HBE成瘤细胞中只有一条序列有干扰效果。

简介：实时荧光定量PCR技术自问世以来,因其具有高度的特异性和灵敏性、可定量、污染少等特点而得到了广泛的应用,此技术用于曲霉的研究也有近十年的历史。本文对近年来实时荧光定量PCR技术在曲霉病诊断中的应用情况进行综述。

简介：摘要新冠肺炎爆发，战“疫”是全世界面临的重要任务，而快速确诊是疫情防控的基础。根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第六版）》以及《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第四版）》记载，利用实时荧光 PCR进行核酸检验是主要诊断手段。作为当下新冠肺炎确诊的“金标准”，实时荧光 PCR功不可没。但通过新闻报道，我们不难发现当前诊断依然存在确诊慢、假阴性等问题。何为实时荧光 PCR？为何还不能完全快速准确地诊断新冠？如何改进？今天我们就从专利的视角，聚焦实时荧光 PCR，为大家揭开其神秘面纱。

简介：实时荧光定量PCR技术将光谱技术融合于传统PCR技术上,通过荧光信号积累实时监测PCR进程,实现核酸定量,具有特异性强、敏感性高、定量精准、自动化程度高等优点,被广泛运用于分子生物学等领域。本文结合近几年的研究成果,对实时荧光定量PCR技术的原理、检测方法、引物设计以及在家禽遗传育种的应用和存在的问题等进行了综述。

简介：摘要目的探讨分析实时荧光定量PCR检测诊断结核病的应用价值。方法回顾性分析本院收治的80例结核病患者作为本次研究对象。对患者行实时荧光定量检查以及涂片抗酸染色法检查，对比分析两种不同检验诊断方法的结果。结果通过对患者行涂片抗酸染色法检测，发现最终的阳性检测共计为33例41.25％，对患者行实时荧光定量检验，发现最终的阳性检测共计为69例86.25％，实时荧光定量检验诊断方法检出率，相较涂片抗酸染色法检测明显较高，差异显著（P＜0.05）。结论通过对结核病患者行实时荧光定量检验方法诊断，可以取得较高的诊断率，且具有较高的灵敏性和特异度，可以及早为结核病患者的早期治疗提供临床依据，在一定程度上对患者的治疗预后起到直接影响，可以在临床中推广应用。

简介：建立了从肉骨粉中提取DNA的稳定、简便易操作的方法.根据牛、羊线粒体DNA基因片段设计特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光PCR技术检测肉骨粉中牛、羊源性成分的快速、特异、敏感的方法.

简介：摘要目的探讨和研究实时荧光逆转录聚合酶链式反应在流感病毒检测中的应用效果。方法采用实时荧光PCR对617例流感样病例患者的咽拭子标本进行流感病毒核酸的测定，对检测出的阳性标本采用MDCK进行培养并分离，对两种方法的检测结果进行分析，对比特异性及灵敏度。结果本组617例标本中实时荧光PCR共检测出阳性标本152例，阳性率24.6%；细胞培养法在此152例阳性标本中共分离出流感病毒79例，阳性率12.8%，实时荧光PCR检测阳性率显著高于细胞培养法，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论实时荧光PCR能够快速有效的检测出流感病毒核酸，是实验室快速诊断的有效手段。

简介：摘要目的通过观察我院收治的对宫颈病变患者的临床诊断资料，探讨分析采用实时荧光PCR检测高危型HPV的价值。方法对我院收治的158例宫颈病变患者患者，进行实时荧光PCR检测，分析检测结果，并与第2代杂交捕获法(HC-Ⅱ)的检测结果对比。结果HPV在宫颈癌患者阳性表达率达90%以上,与HC-Ⅱ相比，差异无统计学意义；PCR检测宫颈病变与HC-Ⅱ的检测结果的阳性率分别为74.7%与70.9%，差异无统计学意义（P>0.05）；但两种方法检测HSIL的HPV阳性率明显高于宫颈炎症、湿疣（P<0.01），除LSIL外，其他病变中的PCR检出率均略高于HC-Ⅱ。结论采用实时荧光PCR检测高危型HPV，可用于确诊患者是否患有宫颈癌，提示高危型HPV感染与宫颈病变、宫颈癌发生有一定的相关性，值得进一步推广与应用分析。

简介：

简介：目的建立登革病毒分子信标实时荧光PCR检测方法。方法针对登革病毒3’-UTR保守区设计引物和分子信标探针,构建阳性参考质粒,建立登革病毒分子信标实时荧光PCR检测方法。应用建立方法对血清标本进行检测,检测结果与TaqMan探针法进行比较。结果所建立的分子信标荧光PCR检测方法灵敏度达102copies/μL,与其它病毒无交叉反应;对70份血清标本检测结果与TaqMan探针法一致。结论所建立的分子信标荧光探针法具有较高的灵敏度和特异度。

简介：摘要目的研究实时荧光定量PCR对乙肝DNA检测的影响因素。方法本研究所有研究对象均选择我院在2016年6月到2016年7月收治的乙肝病毒感染患者，共计涉及到150例。对所有患者的血标本进行收集，然后采用荧光定量PCR检测方法对乙肝DNA进行检测，分析检验结果和临床的诊断结果的符合情况，并且研究对影响检验结果的相关因素。结果本研究150例乙肝病毒感染患者的血液标本当中，选择实时荧光定量PCR进行乙肝DNA的检测，检测结果和临床的诊断结果相同的144例，存在误诊和漏诊共计6例。对主要影响因素进行分析，主要涉及到了标本因素、实验室检验因素以及核酸提取方法因素等。结论选择实时荧光定量PCR对乙肝DNA进行检测，能够有效提升检测的确诊率，但是对于误诊和漏诊的原因进行分析，其主要涉及到的因素是多方面的，因此临床需要加以注意，只有这样才能降低误诊和漏诊率，为临床的治疗提供便利和支持。

简介：目的：利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的检测产气荚膜梭菌的方法。方法：以产气荚膜梭菌基因为靶序列设计引物和探针,以自产气荚膜梭菌菌株中提取的DNA为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的特异性、敏感性。结果：建立的反应体系在上游引物浓度为0.45μmol/L、下游引物浓度为0.15μmol/L、探针浓度为0.3μmol/L时,具有良好的特异性和敏感性,与创伤弧菌等12种相关细菌均无交叉反应;对纯菌检测的灵敏度低于10CFU/反应体系。结论：建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对战时气性坏疽做出快速准确的报告,实现对这种战时高发疾病的安全、快速和定量检测。

简介：

简介：从小体鲟线粒体基因筛选出位于COI（细胞色素氧化酶）基因中的一段保守序列，针对其设计引物，优化SYBRGreen实时荧光PCR反应体系，建立了一种鉴定小体鲟的实时荧光PCR定性检测方法．该方法检测小体鲟DNA灵敏度为0．04mg／L．通过对采集和市售小体鲟鱼样品检测，该方法可检测出样品中的小体鲟成分．实验证明该方法可对血液样品和组织样品中的小体鲟进行种源鉴别．

简介：摘要目的分析实时荧光PCR技术在沙门菌与志贺菌筛查中的临床应用价值。方法收集2016年10月～2017年10月于医院门诊就诊患者的520例肛拭子为研究对象，分别采用实时荧光PCR法和传统培养法进行对比检测，分析实时荧光PCR技术的灵敏度、特异度并比较两种方法的检测时间。结果实时PCR法检测沙门菌、志贺菌的时间均显著少于传统培养法（2.24±0.53vs4.52±0.71）d、（2.31±0.44vs4.61±0.65）d；实时PCR法检测沙门菌、志贺菌的灵敏度均为100%，特异度分别为98.63%和97.24%。结论实时荧光PCR技术检测沙门菌、志贺菌的时间短，灵敏度、特异度高。

简介：摘要目的评估实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)检测无创样本沙眼衣原体的性能。方法以罗氏Cobas® 4800CT/NG作为参照试剂，收集广西壮族自治区皮肤病研究所性病门诊就诊的男性患者尿液样本(248份)及女性患者阴道拭子样本(224份)，评估SAT法检测沙眼衣原体的临床性能。结果最终有470份样本纳入统计。罗氏PCR检出阳性60例(12.8%)，男性阳性数33例，女性27例；SAT检出沙眼衣原体阳性41例(8.7%)，男性阳性数19例，女性22例。SAT试剂应用男性尿液检测的灵敏度为57.58%，特异性为99.06%；女性阴道拭子检测的灵敏度为81.48%，特异性100.00%。结论SAT试剂可以应用于无创样本，但是其应用尿液检测沙眼衣原体上还需要对尿液的核酸提取方法进一步的优化，提高其检测的灵敏性。