简介:摘要树枝状大分子是一种高分子材料,其在抗肿瘤药物载体领域应用较为广泛,由于聚酰胺-胺型大分子(PAMAM)的水溶性、靶向性以及生物利用度均较为理想,应用前景备受看好,现已成为该领域研究的热点。本实验通过细胞毒性实验和载体活体靶向性研究,先进行细胞培养、细胞换液、细胞传代和细胞冻存,另行MTT实验和细胞转染吸收实验;分解小鼠活体器官,建立肿瘤模型,进行体内靶向实验,另行载药及释放性能研究,在此基础上分析PAMAM对细胞的生物特性,对化疗药物的包埋、细胞吸收和毒性性能,以及体内靶向性。实验结果证明,靶向载体的生物相容性较为理想,多肤具有靶向性,载体对DOX具有较好的缓释作用,提示抗肿瘤纳米靶向载体PAMAM-Ac-FITC-LCTP可介导化疗药物进入肿瘤细胞及相关组织。
简介:摘要近年来,药物制剂的体内外相关性评价越来越受到研究者的重视,它可通过模拟体内环境,利用体外实验准确地预测药物制剂的体内行为,对于制剂开发具有深远的意义。根据不同的制剂特性与实验要求,体内外相关性评价方法有许多,本文通过文献阅读综述了体内外相关性的一般评价方法及最新的相关研究进展,并分别对这些方法进行一定的探讨。
简介:目的研究参芪养心滴丸对三氯甲烷、氯化钡、乌头碱诱发心律失常模型及人脐静脉内皮细胞氧化应激模型的影响。方法分别采用三氯甲烷诱发小鼠心律失常实验模型,氯化钡、乌头碱诱发大鼠心律失常实验模型,观察参芪养心滴丸对心律失常的作用。进一步考察了参芪养心滴丸对人脐静脉内皮细胞氧化应激模型的作用。结果三氯甲烷诱发小鼠心律失常实验中,参芪养心滴丸可明显降低小鼠室颤阳性率(P〈0.05);参芪养心滴丸能明显推迟氯化钡诱发的大鼠心律失常模型中室性心律失常发生时间、明显减少室性心律失常持续时间和心率变化率(P〈0.05);参芪养心滴丸有延长乌头碱诱发的大鼠心律失常模型的室性早搏发生时间、减少室性早搏和室性心动过速持续时间及心率变化率的作用(P〈0.05);MTT法及AV-PI双染流式细胞术结果均证明参芪养心滴丸可一定程度上逆转H2O2引起的细胞凋亡,且呈一定的剂量依赖性。结论参芪养心滴丸可对抗三氯甲烷、氯化钡及乌头碱诱发的实验性心律失常作用,同时具有保护氧化应激造成的血管内皮损伤的作用。
简介:文章以聚乙二醇2000衍生化二硬脂酿嶙脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)为载体,采用薄膜分散法制备前列地尔(PGE1)肢束,评价其制剂学性质;并对其大鼠体内分布及金黄地鼠微循环血管药理作用进行研究.实验结果表明PGE1胶束在大鼠体内生物利用度和各组织含药量方面均高于PGE1注射剂;PGE1肢束对微血管作用强于PGE1注射剂,可显著降低血压、维持管径和血流速度并增强微血管自律运动.
简介:目的利用壳聚糖固化液和磷酸钙骨水泥(CPC)复合头孢曲松钠,研制一种新型的抗菌生物陶瓷。方法使用壳聚糖固化液将磷酸钙骨水泥与头孢曲松钠共混制备抗菌生物陶瓷,根据头孢曲松钠的紫外吸光度-浓度标准直线研究生物陶瓷中头孢曲松钠的体外释放。微生物法测定生物陶瓷体外抑菌效果。利用大鼠污染骨缺损模型,研究其体内抗感染作用。结果2.4ml壳聚糖固化液与0.1g磷酸钙骨水泥固体及10.4mg头孢曲松钠混合,在60摄氏度100%湿度下固化24h得到的抗菌生物陶瓷体外头孢曲松钠体外持续释放1W均高于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度,大鼠白细胞计数和组织切片证实污染缺损实验组较对照组的炎症反应轻微。结论复合头孢曲松钠和壳聚糖的磷酸钙骨水泥陶瓷具有良好的抑菌抗感染作用。
简介:目的建立分离纯化非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠胰岛的方法,并对其体内外生物学特性进行研究。方法采用改良的胶原酶消化结合Ficoll密度梯度离心方法,分离纯化NOD小鼠胰岛。应用体外糖刺激实验检测分离纯化的胰岛功能,以及通过监测移植小鼠的血糖、体重变化及糖耐量实验对移植胰岛的体内生物学功能进行分析,并通过HE染色和免疫荧光染色检测肾被膜下移植胰岛的存活情况。结果胰岛产率为(116±12)个胰岛/胰腺,纯度〉90%。体外糖刺激实验结果显示,NOD小鼠胰岛的糖刺激胰岛素释放水平明显低于KM小鼠胰岛。胰岛移植实验显示,移植胰岛能有效改善糖尿病小鼠的血糖、体重和糖耐量,但改善作用一般仅能维持2周左右。HE染色和免疫荧光染色结果显示,肾被膜下可见胰岛素阳性的胰岛细胞团,并且在残存的移植胰岛细胞团周围存在大量淋巴细胞浸润。结论通过改良的小鼠胰岛分离方法可由NOD小鼠分离得到大量较高纯度的胰岛,可用于今后探索如何阻断自身免疫损伤保护移植胰岛的研究。
简介:目的:构建具有前列腺癌靶向作用纳米基因载体聚酰氨胺-聚乙二醇-适配体(PAMAM-PEG-A10-3.2),考察靶向载体合成效果,携载基因能力,入细胞机制,体内外靶向等特性。方法:用核磁共振(NMR)鉴定PAMAM-PEG-A10-3.2结构;激光粒度仪测定复合物粒径和zeta电位;透射电镜(TEM)观察纳米复合物形态;竞争性抑制实验用于考察纳米复合物入细胞机制;pEGFP-N2-luc质粒(pDNA)考察纳米复合物体外靶向性;LNCaP裸鼠移植肿瘤小鼠,考察纳米复合物体内靶向性。结果:结果显示,PAMAM-PEG-A10-3.2合成成功,可以包裹NC-miRNA,形成稳定的纳米复合物。TEM见纳米复合物成球形。靶向载体主要通过受体介导内吞入胞。体外基因转染实验显示,靶向纳米复合物可以增加对前列腺癌细胞表面特异性膜抗原(PSMA)高表达细胞(LNCaP)的转染效率,LNCaP裸鼠移植肿瘤小鼠活体成像显示,靶向载体具有良好的前列腺癌靶向性。结论:PAMAM-PEG-A10-3.2对PSMA高表达的前列腺癌细胞具有良好的体内外靶向性。
简介:目的:观察多聚β肽及其聚乙二醇(PEG)修饰物对肝癌细胞株侵袭黏附能力和对裸鼠移植人肝癌早期切除术后转移复发的影响。方法:以MTT法测量多聚β肽和其PEG修饰物对肝癌细胞与纤连蛋白(FN)黏附的影响。以细胞侵袭实验观察多聚β肽及其PEG修饰物对肝癌细胞侵袭能力的影响。以LCI-D20裸鼠人肝癌转移模型为材料,观察多聚β肽及其PEG修饰物对早期肝癌切除术后转移复发的影响。结果:β2、β2-PEG、β3和β3-PEG对SMMC-7721细胞与FN黏附抑制率分别为31.3%、39.2%、45.7%和57.1%,侵袭抑制率分别为33.6%、35.9%、38.3%和41.2%;对HCCLM6细胞与FN的黏附抑制率分别为48.7%、60.9%、63.4%和79.3%,侵袭抑制率分别为36.8%、46.6%、45.6%和50.8%。多聚β肽及其PEG修饰物组切缘复发肿瘤重量和肺转移灶个数显著低于对照组(P%0.05)。结论:多聚β肽及其PEG修饰物能抑制肿瘤细胞的黏附和侵袭能力,亦能防治裸鼠移植人肝癌早期切除术后的转移和复发。
简介:目的:探讨镰形棘豆提取物的体内外抗肝癌活性,并探讨其可能的机制。方法:采用MTT法检测镰形棘豆提取物对SMMC-7721细胞的增殖抑制,采用PI单染法和AnnexinV-FITC/PI双染法进行流式细胞仪检测,测定细胞周期和凋亡率,观察H22荷瘤小鼠的体内肿瘤抑制作用。结果:MTT实验表明,镰形棘豆提取物EOOF和FOF有效抑制肿瘤细胞SMMC-7721的增殖,并呈一定的剂量依赖性,其IC50值分别为0.115和0.097mg·mL^-1。TFOF作用SMMC-7721细胞后可使细胞周期停滞于G1期,凋亡细胞的比例升高,并且呈浓度依赖性。镰形棘豆提取物FOF能明显抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,低、高剂量组的抑制率分别为56.1%和70.8%(P〈0.01)。结论:镰形棘豆提取物FOF能抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡,并对H22荷瘤小鼠有肿瘤生长抑制作用。显示镰形棘豆具有较好的发展为抗肝癌药物的前景。
简介:本研究摸索一种简单、方便和高产量的人胎盘免疫球蛋白(placental-elutedgammaglobulin,PEGG)的制备方法,探讨其体外对T细胞功能的抑制作用和体内对移植物抗宿主病(GVHD)的预防作用.将胎盘组织残留血洗净,用酸性缓冲液洗脱得到PEGG.用BrdUELISA检测它对PHA诱导的淋巴细胞增殖和混合淋巴细胞反应(MLR)的影响,用流式细胞仪检测它对T细胞表面CD25,CD69表达的影响,用ELISA方法检测它对T细胞分泌IFN-γ和IL-4的影响.建立小鼠GVHD模型,观察PEGG对小鼠的GVHD临床和病理表现及生存期的作用.结果表明:SDS-PAGE显示PEGG的主要成分是IgG.体外PEGG能有效地抑制PHA诱导的T淋巴细胞的增殖作用和MLR,下调T细胞表面CD25和CD69的表达,抑制IFN-γ产生,促进IL-4的生成.小鼠模型中,PEGG治疗组小鼠生存期较对照组明显延长,且GVHD症状及病理表现较对照组小鼠明显减轻.结论:PEGG在体外能有效地抑制T细胞的增殖、活化,调节Th细胞更多地向Th2细胞方向分化,在体内能有效地预防小鼠GVHD,在治疗GVHD方面具有良好的应用前景.