简介：目的探讨pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒在大鼠骨髓间充质干细胞（bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSC）中表达的情况,为下一步的动物实验奠定基础.方法构建插入人血管生成素-1（angiopoietin,Ang-1）和人血管内皮细胞生长因子165（vascularendothelialgrowthfactor165,VEGF165）双顺反子的pIRES重组质粒,经脂质体转染大鼠MSC,以实时荧光定量PCR技术分析各基因人源、鼠源以及总mRNA的动态变化.结果所构建的pVEGF165-IRES-Ang-1双顺反子重组质粒在大鼠MSC中成功表达了相应蛋白.人VEGF165得以高丰度表达,且在转染1d后mRNA检出的拷贝数最高;人Ang-1在4个检测时间点中的mRNA拷贝数比较稳定,但转录本的拷贝数较VEGF165显著降低;转入人Ang-1和人VEGF165后,各对应同源蛋白的总mRNA有显著增加,但大鼠MSC自身Ang-1与VEGF164的编码mRNA明显有下调趋势.结论pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒双基因表达量明显不一致,表现为受插入的位置关系影响,且可能受转染细胞内同源蛋白的总量调控.

简介：目的分析老年人肺癌恶性胸腔积液和肺炎旁胸腔积液中叉头基因FoxM1的基因表达，寻找对于胸水良恶性的鉴别具有诊断意义的基因标志物。方法分别收集15例老年肺炎患者旁胸腔积液（A组）和21例老年肺癌患者（15例为腺癌，5例为鳞癌，1例为小细胞肺癌）恶性胸腔积液（B组），分别提取各组标本总RNA，再经过逆转录得到c-DNA，通过荧光定量-聚合酶链反应技术分析各组胸腔积液中叉头基因FoxM1的基因表达差异。结果B组FoxM1基因平均相对含量明显高于A组（925．014±103．999）w（244．354±43．429），P〈0．01）。结论FoxM1的基因表达量在老年肺癌恶性胸腔积液组中明显高于老年肺炎旁胸腔积液组，对胸水良恶性的鉴别具有重要诊断参考价值。

简介：目的研究山茱萸多糖对D-半乳糖致衰老小鼠肾组纵中Klotho基因表达变化的影响。方法昆明小鼠60只，随机分为青年对照组、衰老模型组、山茱萸多糖组，每组20只。采用D-半乳糖法制作衰老模型，以灌胃法给山茱萸多糖组小鼠灌服山茱萸多糖。采用分光光度法检测总抗氧化能力（T—AOC）和Mn—SOD活性水平，RT—PCR法检测Klotho和Mn—SOD基闪表达水平，Westernblot法检测Klotho蛋白表达最。结果与对照组比较，衰老组小鼠肾组织中Klotho基因、Mn—SOD活性和基斟表达均下降（P〈0．01），总抗氧化能力（T—AOC）下降（P〈0．01）；与衰老模型组比较，山茱萸多糖组小鼠Klotho基困和蛋白表达明显升高（P〈0．01）、Mn-SOD基因表达和Mn-SOD活性明显增高（P〈0．01），总抗氧化能力也显著提高（P〈0．01）。结论山茱萸多糖可能通过上调衰老小鼠肾组织中的Klotho表达和提高衰老小鼠抗氧化能力岍发挥抗衰老的作用。

简介：目的研究上海地区血压正常汉族老年人中(年龄≥60岁)Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体(AT1-R)基因A1166C多态性的分布特点,并同国内外人群的分布频率相比较,了解地区种族分布差异及与年龄、体重指数BMI(kg/m2)的相互关系.方法体检选取92例正常健康老年人,男72例,女20例,平均年龄65.32±4.70岁.应用PCR-RFLP方法检测位于AT1-R基因3'-UTR的A1166C变异.结果(1)上海地区血压正常汉族老年人AA、AC、CC基因型频率分别为0.89、0.11、0.00,1166C等位基因频率为0.05.低于白种人和日本人(P《0.001和P=0.046),与美国黑人相比无差异(P=0.815).(2)在国内人群中C1166等位基因的分布频率无差异,并与年龄、体重指数无关.结论AT1-R基因A1166C多态性存在种族地域间的差异,上海地区与国内现有报道结果一致,1166C等位基因频率明显低于白种人群,但不同年龄不同体重指数人群1166C等位基因频率无差别.提示由于中国人群1166C等位基因频率低,故开展AT1-R基因A1166C多态性与疾病的关系中需要大样本研究.

简介：目的利用PDGF-A基因修饰的全层皮肤皮片，利用HE染色、PCR、蛋白定量分析几个层面，探讨其对眼睑皮肤损伤修复的情况及部分机理。方法贵州小香猪6只，背部脊柱两侧造成全层皮肤缺损圆形创面（Ф3．67cm）各3个，共36个创面。A组（基因修饰皮片组）“PDGF-A基因修饰皮片”，移植到其右侧的18个创面作为实验组；B组（细胞皮片植入组）以HAM负载未经基因修饰的自体bMSCs与角朊细胞，构建成“细胞皮片”植入其左侧前6个创面；C组（单纯HAM敷盖组）单纯HAM敷盖其左侧后12个创面，作对照组。观察移植后1～4周内，各组创面愈合、肉芽组织生长、上皮化等情况。并进行创面组织HE、Laminin免疫组化及胶原含餐等检测。结果（1）A组于伤后15～17d愈合，B组于伤后21～23d愈合，C组于伤后24～26d愈合，A组较其它两组分别提前5～6d与8～9d愈合，且愈合质量好。（2）A组创面于移植15～17d，其肉芽组织生长旺盛，肉芽组织中Laminin、成纤维细胞和毛细血管含量丰富，可见胶原沉积。两对照组创面组织仍见许多炎细胞浸润，肉芽组织中Laminin、成纤维细胞和毛细血管含量少，胶原沉积不明显。结论PDGF-A基因修饰皮片移植对眼睑皮肤的创伤有较好的促愈作用，愈合质量较高。

简介：目的探讨粘附分子P选择素在肾癌中表达的意义。方法应用免疫组化LSAB法，检测20例肾癌患者肾组织中P选择素表达。结果研究发现肾癌组织中P选择素阳性表达率为55.0％(11／20)，其不仅在肿瘤血管内皮上表达，也在肿瘤细胞膜上表达。晚期肾癌(Ⅲ、Ⅳ期)阳性表达率为87．5％(7／8)，明显高于早期肾癌(Ⅰ、Ⅱ期)的33．3％(4／12)，P<0.05。结论P选择素与肾癌浸润转移有关．并可能是一种新的肾癌转移及预

简介：早发性卵巢功能不全（prematureovarianinsufficiency，POI）主要表现为患者40岁前原发性闭经或停经达4个月，至少2次血清FSH水平大于25IU/L（间隔至少4周），雌激素水平低下[1]。POI病理过程可分为隐匿期、生化异常期和卵巢功能衰竭期（POF）3个阶段。患者多表现为骨质疏松、潮热盗汗等低雌激素症状，心血管疾病和阿尔兹海默症等疾病患病风险增加。POI发病原因包括化疗、自身免疫性疾病、遗传、代谢、肿瘤和射线等，这些病因导致始基卵泡生成减少，卵泡过度激活、闭锁或凋亡增多等异常表现，显著影响卵巢寿命，甚至妨碍女性正常排卵而导致不孕。

简介：目的研究脂联素基因SNP＋45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症的相关性，比较脂联素基因SNP＋45多态性与骨转换生化标志物的关系。方法以聚合酶链反应-限制性内切酶长度多态性（PCR—RELF）技术，对75例骨质疏松症患者和71例正常对照者脂联素基因SNP＋45位点进行基因分型，应用酶联免疫测定法或电化学发光免疫法测定75例骨质疏松症患者血清和尿液中8项骨代谢指标。结果脂联素基因SNP＋45多态性位点的基因型和等位基因频率在骨质疏松症患者和正常对照组比较差异无统计学意义，脂联索基因SNP＋45多态性位点的基因型与骨转换标志物比较差异也均无统计学意义。结论脂联素基因SNP＋45多态性与上海地区绝经后妇女骨质疏松症无相关性，与骨转换率也无相关性。

简介：目的探讨趋化因子SDF-1及其受体CXCR4在老年人上皮性卵巢癌组织中的表达及意义。方法应用westernblotting方法定量检测43例老年患者上皮性卵巢癌组织中SDF-1和CXCR4的蛋白表达情况。结果老年人上皮性卵巢癌组织中SDF-1／CXCR4蛋白表达较卵巢良性肿瘤对照组明显增加，其相对表达量分别为（2．38±0．20）和（3．32±0．26），差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论SDF-1／CXCR4生物学轴可能在老年人卵巢癌的发生与转移过程中起着重要作用。

简介：目的探讨非肿瘤老年慢性肾脏病患者是否存在血清肿瘤标志物水平的改变，并分析影响其改变的相关因素。方法随机选取复旦大学附属华东医院慢性肾脏病245例和健康体检者178例，比较两组血清肿瘤标志物水平的差异，并将慢性。肾脏病患者按。肾功能等级和年龄分组，比较各组间血清肿瘤标志物水平的差异。利用多因素Logistic回归分析了解老年慢性肾脏病患者血清肿瘤标志物水平的影响因素。结果慢性肾脏病患者组血清CA199、CA125、NSE水平高于健康对照组（P〈0．05）。血清CA199、NSE水平在不同估算肾小球滤过率（estimatedglomerularfiltrationrate，eGFR）组间存在统计学差异（P〈0．05），血清CA199、CA724、CA211、CEA、PSA和fPSA水平在不同年龄组间存在统计学差异（p〈0．05）。血清CA125水平在不同eGFR组间差异无统计学意义（P〉0．05）。Logistic回归分析发现血清肿瘤标志物水平与患者的年龄、eGFR水平、血白蛋白水平和浆膜腔积液呈相关。结论老年慢性肾脏病患者存在部分肿瘤标志物水平的异常升高。在根据血清肿瘤标志物诊断肿瘤时，须结合患者年龄及肾功能情况等综合考虑。

简介：全球人口老龄化，尤其是我国人口老龄化已成为全社会关注的焦点问题之一，人们对于衰老和长寿相关问题的研究从未间断。近年提出的长寿及衰老机制主要为多凶性（multiple）、综合性（comprehensive）及复杂性（complexity），对衰老机制中的炎性衰老也逐渐引起重视。现就衰老、长寿机制中促炎／抗炎细胞因子与ApoE基因相关性的研究进展综述如下。

简介：目的探讨护骨素（osteoprotegerin，OPG）基因T950C位点基因多态性与冠心病（coronaryarterydsease，CAD）及其严重程度的相关性。方法290例行冠状动脉造影患者根据造影结果，分为正常冠脉组102例和冠心病组188例。冠心病组根据病变冠脉病变支数，分为单支组57例、双支组50例、三支组68例、四支组13例；冠心病组再根据病史分为急性冠脉综合征（acutecoronarysyndrome，ACS）组133例和稳定型冠心病组55例。介质纯化法提取白细胞DNA，聚合酶链式反应（polymerasechainreaction，PCR）扩增包含护骨素T950C位点的DNA片段，连接酶检测反应（ligasedetectionreaction，LDR）检测PCR产物，识别多态性位点。结果在正常冠脉组和冠心病组之间，在正常冠脉组和ACS组之间，在ACS组和稳定型冠心病组之间，在正常冠脉组和不同病变冠脉数量组之间，护骨素基因T950C的各基因型频率和分布差别无统计意义；冠心病组CC基因型的Gensini评分要高于TT基因型的Gensini评分。结论研究中未发现护骨素基因T950C位点基因多态性与冠心病相关；T950C位点多态性与冠心病的严重程度有相关性，CC基因型的冠脉狭窄程度较TT基因型更严重。

简介：目的研究自然衰老大鼠和D-半乳糖诱导的衰老模型大鼠肠道组织形态学、小肠黏膜上皮细胞间紧密连接蛋白表达的变化，评估两种衰老模型大鼠肠道屏障结构和功能。方法将大鼠分为26月龄组（A组）、D-半乳糖组（B组）和3月龄组（C组）3组。取各组大鼠回肠组织常规HE染色观察形态学改变，透射电镜下观察肠上皮细胞间紧密连接超微结构，采用Real—timePCR检测小肠黏膜组织中紧密连接蛋白（ZO-1和Occludin）的mRNA表达，采用Westernblot检测ZO-1和Occludin的蛋白表达。结果A组和B组大鼠小肠黏膜厚度及绒毛高度均比C组大鼠降低[小肠黏膜厚度：A组（89．88±6．12）gm、B组（87．62±6．32）μm、C组（162．91土7．28）μm，P〈0．05；绒毛高度：A组（59．95土4．47）μm、B组（56．43±5．38）μm、C组（108．12土6．42）μm，P〈0．05]。透射电镜下观察到A组和B组大鼠的肠上皮细胞间紧密连接比C组疏松，间隙增宽，密度降低。与C组比较，A组和B组大鼠的小肠组织中ZO-1、OccludinmRNA和蛋白的表达均减少（均P〈0．05）。而A组与B组大鼠的小肠黏膜厚度、绒毛高度、小肠组织中ZO-1、OccludinmRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义。结论自然衰老大鼠和D-半乳糖诱导的衰老模型大鼠小肠黏膜结构和上皮屏障功能均受损，小肠黏膜厚度、绒毛高度等肠道组织形态学指标，上皮细胞间紧密连接结构的改变和紧密连接蛋白表达下调等变化具有高度一致性。

简介：目的利用家兔膝关节前交叉韧带切断（ACLT）及内侧半月板前1／3切除的方法制作骨关节炎（OA）模型，测定关节炎发病的不同时期，关节软骨中基质金属蛋白酶-1（MMP-1），基质金属蛋白酶-13（MMP-13）以及细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）蛋白表达水平的变化情况，探索它们之间的变化规律及关系。方法实验组家兔30只行ACLT及内侧半月板前1／3切除术造模，分别于术后4W、8W、12W处死10只，假手术对照组家兔10只于术后12W处死。进行股骨髁关节软骨退变的大体评分；取退变的软骨组织，用Westernblot印记杂交方法测定软骨组织中MMP-1，MMP-13和ERK1／2的蛋白表达水平。结果ACLT及内侧半月板前1／3切除术后4W即可见软骨退变，8W和12W时退变进一步加重，对照组元明显软骨退变，不同组动物关节软骨评分差异有统计学意义。MMP-1和ERK1／2的蛋白表达在正常对照组水平均较低，造模4W开始升高，到第8W及第12W持续升高；而MMP-13在造模4w时表达开始升高，造模第8W时持续升高，但在造模第12W时MMP-13的蛋白表达下降。结论家兔膝关节ACLT及内侧半月板前1／3切除制作OA模型的方法简便可行，MMP-1和MMP-13在骨关节炎的发病过程中有不同程度的升高．可以作为OA研究的评价指标。本实验结果提示，在OA发展的过程中，MMP-1和MMP-13的表达不平行．两者上游信号调控通路可能存在差异。蛋白激酶ERK1／2的表达水平从造模第4w开始持续升高，说明ERK1／2信号转导通路在骨关节炎发病过程中持续发挥作用。