简介：目的克隆人HMGBlA—box的cDNA，构建高效稳定的大肠杆菌（E．coli）表达菌株并对其诱导表达纯化．同时探讨其对间充质干细胞（Mesenchymalstemcells，MSC）的促分化作用。方法根据优选合成的HMGBl基因序列设计引物，PCR扩增目的基因片段，插入克隆载体pGEM—T并进行序列测定。重组克隆载体经BamHI和xhoI酶切．琼脂糖凝胶电泳分离目的基冈，插入含His标签的表达载体pET24a。将构建的质粒转染BL21大肠杆菌，经IPTG诱导后．SDS—PAGE观察表达量。HIS—link层析柱纯化重组人HMGBlA—box．蛋白印迹鉴定重组蛋白。将重组蛋白加入hBMSC培养体系中培养一周后，碱性磷酸酶染色检测其促MSC成骨分化作用。结果经RT—PCR扩增得到了261bD的DNA片段，经测序分析．与GenBank中报道的已知序列完全一致，构建了含融合蛋白的重组表达质粒。经诱导后细菌高表达A—boX，表达量为总蛋白的45％。经层析柱纯化后，蛋白印迹证实目的蛋白为高纯度的A—box。将A—box加入MSC培养体系中培养后，细胞活性无明显改变．但细胞碱性磷酸酶表达明显增高。结论成功构建了重组人HMGBlA—Box的表达载体．纯化的重组蛋白能有效促进MSC向成骨细胞分化。

简介：摘要：目的 研究消毒供应中心改良的医用纯化水终端输送管路对纯化水电导率的影响。探讨改造后的管路消毒间隔时间。方法 通过将储水桶至用水点的普通不锈钢软管更换为卫生级304不锈钢管道，保证终末漂洗供水管路单独与球阀送水口通过304不锈钢卡盘连接等对纯化水终端供应系统进行一系列改造。在终端管路改造前管网消毒次日和改造后管网消毒后次日、第2周、第3周、第4周在采样口、终末漂洗水出口以及储水桶内取水依次进行电导率监测，并进行微生物培养，计算菌落数，使用SPSS19.0统计软件对微生物检查结果进行方差分析。结果与结论 对改造后管路进行微生物和电导率监测结果进行方差分析，以90天为纯化水储存分配系统的分析，符合WS-2016医院消毒供应中心规范要求，可保证医疗消毒供应中心清洗、消毒，有效控制或杜绝医院内感染的发生，保障医疗护理质量。

简介：目的利用免疫磁珠分离成人骨髓神经生长因子受体(nervegrowthfactorreceptor,NGFR)阳性细胞,获得同质性骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs).方法采用Percoll密度梯度离心法分离成人骨髓中单个核细胞(mononuclearcells,MNCs).对MNCs进行常规贴壁培养或应用磁分离技术分离NGFR+细胞.分别检测NGFR+细胞和常规贴壁培养所获BMSCs体外扩增和集落形成能力,分析其细胞表型和细胞周期,并进行成骨、成脂肪诱导.结果免疫磁珠分离获得NGFR+细胞的纯度为(90.4±4.7)%,NGFR+细胞较贴壁培养获得BMSCs具备更强增殖能力和成骨及成脂肪分化潜能.结论利用免疫磁珠分离骨髓NGFR+细胞可以获得同质性原始BMSCs.

简介：摘要：纯化水系统是整个制药工程中非常重要的一个组成部分，制药水的质量、设备质量，对于药品的合格率，有着非常直接的影响。如果药品无法满足实际的要求，不仅会对人体健康造成一定影响，同时也不利于制药业实现积极的发展。因此，在生产药品的过程中，需要有效的控制纯化水系统，实施有效的在线检测工作，通过准确应用相关的自动检测工艺，保证在线检测工作能够有质量的开展。

简介：摘要优化黄芩中黄芩苷的提取工艺。方法采用正交实验设计，以黄芩苷的提取率为指标，优选黄芩苷的最佳工艺条件。结果黄芩中黄芩苷的最佳提取工艺为14倍量的沸水煎煮2次，1h/次，提取液调pH值1～2，80℃保温1小时，弃上清液，沉淀过滤，80℃干燥，粉碎即得。结论该工艺简单易行，时间周期短，适用于生产。

简介：目的介绍一种改良的纯化细菌质粒DNA的方法。方法针对传统的PEG纯化方法,取消PEG8000的纯化步骤,增加溶菌酶的浓度及酚-氯仿处理次数。结果新的纯化方法提取的质粒量比传统方法要多,而且纯度足以用于细胞研究。结论尽管目前已有质粒纯化试剂盒出售,但经改良的传统质粒纯化法仍然具有经济、实用的价值。

简介：摘要：本研究旨在探讨不同种类宫内节育器对子宫内膜影响的分子机制，主要关注元宫环、固定环、吉尼环（固定式）、花环、O环和T环的使用效果。研究结果表明，元宫环由于其特殊的形态和成分设计，对子宫内膜的影响较小，具有较好的避孕效果和较低的副作用。本中心放置元宫环的比例较高，原因在于其形状与子宫形状相似，接触面积较小，减少了副作用的发生。

简介：腺病毒（Adeno）基因组为线状双链DNA，长度大约36kb．适合于容纳较大片段外源基因。与逆转录病毒载体相比，腺病毒载体能有效地将外源基因转染到各种靶细胞中。其宿主范围广，感染性强，尤其能感染分化后的非分裂期细胞。在Adeno生活周期中，其基因不整合到宿主细胞DNA中，故无插入突变激活癌基因的危险，外源基因能游离地表达。商品化的腺病毒载体一般剔除了其基因组的E1区，经体外重组后，产生可复制缺陷型腺病毒。

简介：摘要2010版GMP要求纯化水的制备、贮存和分配应当能够防止微生物的滋生。企业应结合纯化水系统特点及日常监测微生物限度，制定微生物控制方法及微生物的警戒、纠偏限度，定期进行趋势分析，有效控制纯化水系统的微生物污染。

简介：【摘要】 目的 筛选中药半枝莲中总黄酮的提取纯化最佳工艺。方法 采优选 D101大孔树脂，对影响总黄酮纯化工艺的因素进行研究，确定总黄酮纯化的最佳工艺。结果 以 pH为 2.0，总黄酮浓度为 3.5 mg·ml-1的溶液做为上样液，以 2 BV·h-1的流速上样，吸附完全后，以纯化水洗脱至无色，再以体积为 20 BV的 60%乙醇进行洗脱。结论 优选得到的工艺稳定，方法切实可行，为规范半枝莲中总黄酮的提取纯化工艺提供了理论依据。

简介：【摘要】本文以伊索克酸为起始物料，在氢化钠的作用下，与3-(二甲基氨基)丙基]三苯基磷溴化物氢溴酸盐发生witting反应，经过异丙醇纯化得到较高Z构型选择性的目标产物盐酸奥洛他定。

简介：摘要目的应用生物信息学技术对人类巨细胞病毒(HumanCytomegalovirus,HCMV)分子进行抗原表位预测,构建并表达具有多表位的重组融合蛋白并进行免疫原性鉴定.方法GenBank中查询HCMV氨基酸序列,利用BepiPred、ABCpred、BcePred、PREDICTED四种在线表位预测软件进行细胞表位预测,筛选出可能的抗原决定簇表位,构建、原核表达,并利用免疫印迹实验筛选出可用的表位抗原,原核表达出融合蛋白,用WesternBlot和ELISA检测其抗原性.结果综合预测分析结果,得出１３种可能的表位,构建出pET３２a原核表达载体,表达并纯化这１３种表位的融合蛋白,经免疫印迹技术筛选出gp５２、GB３、PP１５０－１、GB－５具有较强的抗原性表位,通过Ni２＋亲和柱纯化,对gp５２融合蛋白免疫印迹试验结果表明,蛋白抗原性较强;ELISA法鉴定具有较高的抗原性及特异性.结论在原核表达系统中能获得高效表达,纯化的融合蛋白具有较强的免疫反应性,对后期建立人HCMV免疫检测试剂提供了可能性.关键词预测软件;抗原表位;原核表达;纯化;鉴定中图分类号R３９２．１文献标识码B文章编号１００８－６３１５(２０１５)１２－０１４０－０１

简介：摘要：紫杉醇以其独特的抗癌作用机制及显著的疗效，被认为是近十几年来天然抗癌药物研究领域最重大的发现。由于紫杉醇在红豆杉树皮中含量极低，提取精制困难等原因，导致紫杉醇纯品价格昂贵。因此完善紫杉醇的提取纯化工艺，降低生产成本，对保障人类健康都具有重要的意义。本文对紫杉醇提取纯化工艺的研究进展进行了探讨。

简介：[摘 要]  目的 将小鼠Sox2基因、穿膜肽TAT以及小分子泛素样修饰蛋白SUMO融合并转入大肠杆菌中进行表达，最终获得大量具有高效穿膜活性的Sox2蛋白。 方法 利用PCR技术扩增得SUMO-TAT融合基因，并插入到pET-3c载体。再通过扩增获得小鼠Sox2基因，将其与pET3c-SUMO-TAT基础载体连接，构建得重组表达载体pET3c-SUMO-TAT-Sox2，然后转化到Rosseta(DE3)表达菌中，经IPTG诱导表达，使用Ni-NTA亲和层析进行分离纯化。 结果 成功构建了pET3c-SUMO-TAT-Sox2原核表达载体，经终浓度为1 mmol /L的IPTG诱导4 h后表达约为57kDa的融合蛋白，以包涵体形式存在，Western Blotting检测显示良好特异性，经300 mmol/L咪唑洗脱可获得纯度较高的SUMO-TAT-Sox2融合蛋白。 结论 得到大量带有穿膜肽TAT的融合蛋白Sox2，为今后利用重编程因子融合蛋白诱导体细胞重编程为iPS细胞奠定基础。

简介：摘要：本文深入探讨了纯化水制备工艺在制药生产中的发展趋势与展望。随着科技的不断进步和制药行业的快速发展，对纯化水的水质和制备效率提出了更高要求。文章首先分析了纯化水制备工艺的技术创新与升级趋势，包括新型膜分离技术、离子交换技术等的应用，以及自动化和智能化发展对制备过程的优化。其次，文章强调了环保与节能在纯化水制备中的重要性，提出了通过技术改进和设备优化实现节能减排的策略。此外，文章还展望了个性化定制服务在纯化水制备中的兴起，以及智能化与信息化对提升制备工艺稳定性和可靠性的促进作用。最后，文章指出跨界合作与产业整合将成为推动纯化水制备工艺进步的重要力量。综上所述，纯化水制备工艺正朝着更高效、更环保、更智能化的方向发展，为制药行业的持续发展和进步提供有力支持。

简介：本文综述了金表面自组装技术固定生物分子的方法及其在核酸传感器和免疫传感器中的应用.包括金表面自组装技术的原理:金硫键的形成;金电极及金膜的沉积制作技术:热蒸发沉积、电子束蒸发沉积、飞溅沉积等;金表面Piranha溶液的清洁与处理;自组装常用试剂:含巯基或二硫键的化合物;金自组膜单层的取向度特性、针眼对固定生物分子的影响;自组膜活泼尾基的活化方法及偶联生物分子的方法;金自组装技术在核酸传感器及免疫传感器中固定核酸、蛋白质的应用,包括在电化学、表面等离子体共振、石英微天平、光学波导测定等核酸与免疫传感器中的应用.

简介：

简介：【摘要】目的：分析两癌筛查中宫颈癌筛查结果。方法：选取我院2020年1月-2021年12月期间进行两癌筛查的女性9085例，除肉眼检查异常或可疑9人直接阴道镜，其余所有女性行宫颈细胞学检查，宫颈细胞学检查异常或可疑的行阴道镜检查，阴道镜检查异常惑可疑的行宫颈组织活检病理检查，对存在宫颈病变的患者进行统计分析，并对宫颈癌患者进行后续治疗随访。结果：9085例（其中有临床症状9例直接阴道镜检查）受检人员之中其中宫颈细胞学检查异常或可疑患者共404例，其中包含ASC-US357例，ASC-H17例，LSIL16例，HSIL14例，SCC0例，AGC0例，未检出不典型颈管腺细胞倾向瘤变、颈管原位癌、腺癌。接受阴道镜检查的患者有375例，共325例受检人员存在检查结果异常或可疑，对325名受检人员行病理学检查，其中低级别病变（CIN1）共72例，高级别病变（CIN2、CIN3）共37例，原位腺癌1例，微小浸润癌0例，浸润癌1例。结论：通过两癌筛查，能够更好地发现宫颈病变情况，及时有效地发现宫颈癌变，并为患者采取具有针对性的治疗、护理措施，确保患者生存率以及生活质量得到提升。

简介：

简介：摘要目的通过分子生物学技术对结核分枝杆菌Rv0350基因克隆、表达与纯化。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv为模板，经聚合酶链式反应(PCR)扩增，克隆Rv0350基因，与质粒pET-28a连接构建重组质粒，转入大肠杆菌BL21(DE3)，经异丙基半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍亲和层析获得纯化的重组蛋白。结果对扩增后的基因进行电泳试验，证实成功重组目的基因，对重组纯化后的蛋白进行考马斯亮染、Weston-blot验证已成功重组Rv0350。结论通过分子生物学技术可成功获得大量结核分枝杆菌Rv0350抗原，为后续功能与机理研究奠定基础。