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  • 简介:目的:通过对TRIzol一步法进行改进,建立一种从富含胶原蛋白、多糖及色素的仿刺参体壁提取RNA的有效方法。方法:样品在液氮中研磨并用TRIzol匀浆后再进行抽提;对TRIzol一步法提取的RNA进行DNaseⅠ消化和酚氯仿抽提,用2.5mol/L的醋酸钾沉淀,并加入适量糖原(10mg/mL)与RNA共沉淀。结果:琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法以及RT-PCR检测结果表明,改进的方法能够有效去除基因组DNA、蛋白、多糖及色素的污染,RNA的产率提高。结论:制备的RNA纯度高,完整性好,能够满足mRNA差异显示RT-PCR等分子生物学研究的要求,是一种提取仿刺参体壁及其他富含黏多糖、胶原蛋白和色素的动物组织RNA的有效方法。

  • 标签: 仿刺参 体壁 总RNA提取
  • 简介:目的:为了从分子水平上了解厌氧颗粒污泥中微生物的种类和数量,研究一种高效提取环境微生物DNA的方法。方法:厌氧颗粒污泥样品经液氮速冻、沸水浴融化、溶菌酶处理和SDS裂解后,琼脂糖凝胶电泳检测所提取的DNA,以提取的DNA为模板,进行细菌核糖体小亚基16SrDNA基因V8、V9区的PCR扩增。结果:经检测,其DNA片段约为20kb,样品D260nm/D280nm值为1.88,扩增结果理想,与OMEGA公司提供的试剂盒提取效果基本一致。结论:为薯类酒糟厌氧发酵污泥中微生物群落的分子生态学研究提供了一种简便、可靠的DNA提取方法。

  • 标签: 颗粒厌氧污泥 DNA提取 PCR扩增
  • 简介:从动物组织中提取RNA是现代分子生物学研究中经常使用的重要实验技术,按常规方法获得的RNA产品中常伴有大分子量染色体DNA污染.为此,我们摸索出了保证RNA制品纯度、质量和产量的DNA酶消化最佳反应条件.利用改良后的方法提取了小鼠脏器组织RNA,进行了新基因mPC-1在小鼠脏器中表达的组织分布研究.

  • 标签: 动物组织 提取 高纯度总RNA 改进 应用
  • 简介:营林生产质量统计主要是针对在营林生产活动中的具体营林情况进行分类统计。分类方式主要有按当年造林面积分类、按造林方式分类、按用途分类、按是否速生丰产林分等类。并对这些分类中的苗木壮苗率、I级苗率、合格苗率等进行统计。并进行营林经营成果与效益统计,统计的指标主要内容包括:森林覆被率、企业森林覆被率、林木覆被率、单位面积蓄积量、单位面积林木生长量以及营林经济效益指标。通过对这些技术指标的统计与分析就可以进一步了解营林生产中的作业效率、营林企业的生产效益等与营林生产质量相关的关键指标。本文就是对这些统计相关的指标做深入的探讨。

  • 标签: 营林生产 质量统计
  • 简介:由于现代化的发展,图书馆已投入到市场经济的竞争中,怎样构建图书馆的核心竞争已成为图书馆将来生存和发展的关键。文章解释了图书馆核心竞争的定义,目前图书馆核心竞争的现况,并从资源、人才、管理理念、服务创新等几方面论述了图书馆核心竞争的构建。

  • 标签: 高校 图书馆 核心竞争力 构建
  • 简介:油茶被划归成木本油料特有的类别,培植的区段很广。油茶树提炼得来的油料,固有的营养属性最优。发展各地段内的油茶产业,能促动整体范畴内的林业进展,促动林业特有的经济延展。为此,有必要明辨油茶生产的注重事宜,摸索最优的产出路径。

  • 标签: 油茶生产 林业产业 发展途径
  • 简介:由中科院生命科学与生物技术局、科技部中国生物技术发展中心、天津市科委和中国生物工程学会主办,中科院微生物所、中科院天津工业生物技术研发中心(筹)和天津市高新技术成果转化中心联合承办的“中国工业生物技术发展高峰论坛2008”4月18日上午在天津港保税区开幕。来自海内外30余家企业、60多个高校和科研机构的400余名代表参加了本届论坛活动。

  • 标签: 工业生物技术 生产模式 中国生物工程学会 高新技术成果转化 中科院 天津市
  • 简介:目的:从航天诱变向日葵种子中提取高质量的RNA。方法:采用改进的SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提一次,经LiCl过夜沉淀、DNaseⅠ处理、1/2体积的无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积的醋酸钠和2倍体积的无水乙醇沉淀RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用PT-PCR鉴定RNA的质量。结果:提取的RNA电泳条带清晰,D260nm/D230nm、D260nm/D280nm值分别为2.09、2.00,其产量为35.30μg/100mg,用PT-PCR能扩增出肌动蛋白基因片段。结论:采用该方法提取的RNA纯度高、完整性好,适于进一步的分子生物学研究

  • 标签: RNA提取 向日葵 航天诱变 多酚 多糖
  • 简介:目的:建立北京株水痘疫苗生产工艺,采用此生产工艺生产水痘减毒活疫苗。方法:采用细胞工厂培养2BS细胞,感染北京株水痘-带状疱疹病毒工作种子批,同时感染Oka株水痘-带状疱疹病毒工作种子批作对照,经洗涤、离心、收获、原液合并、冻干制备水痘减毒活疫苗,并进行各项检定。结果:对照两种不同毒株生产的水痘减毒活疫苗无明显差异,且各项检测指标均符合要求。结论:根据结果显示,可使用此毒株生产工艺大规模生产北京株水痘疫苗,与Oka株生产水痘疫苗无差异。如果用此毒株生产水痘疫苗供应市场,将会打破Oka株水痘疫苗国内市场的垄断。

  • 标签: 水痘减毒活疫苗 细胞工厂 2BS细胞 北京株水痘-带状疱疹病毒工作种子批
  • 简介:目的:在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pET28a(+)-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS株,生产重组颗粒溶素(GNLY)。方法:选取含pET28a(+)-GNLY的BL21(DE3)pLysS菌株单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中,控制溶氧为30%~50%,温度为37℃;在基础培养基内生长4h后,补加以甘油为碳源的补料,继续生长到11h;加入葡萄糖至终浓度为1%,30℃诱导表达6h;收集菌体,纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白的抗原性,用CFU方法检测其生物学活性。结果:发酵液中最终菌体密度达80g/L;纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白的5%,含量为60mg/L;经鉴定所获重组颗粒溶素有较好的免疫学活性和生物学活性。结论:用含重组质粒pET28a(+)-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达系统,可得到具有生物活性的重组颗粒溶素,为大批量生产提供了条件。

  • 标签: 颗粒溶素 分批补料 发酵培养 重组蛋白质
  • 简介:利用植物表达系统生产外源蛋白是一个有吸引力的廉价生产系统,它有可能替代外源蛋白的发酵生产系统。本文对分子农业的意义、植物表达外源蛋白的影响因素和植物生产外源蛋白质的研究进展等方面作了论述

  • 标签: 分子农业 基因表达 异源蛋白
  • 简介:近年来,随着现代化经济建设水平的不断提高,制药企业发展速度日益加快,制药企业生产车间的规范化管理也不断提上日程.技术水平与管理方法的创新在一定程度上促进了制药生产车间的科学化管理,6S管理在制药生产车间的广泛应用,使制药生产车间的管理更细化,最大限度的提高了制药生产车间工作人员的工作效率,增强了员工的工作积极性.本文就6S管理的基本内容进行阐述,并对6S管理在制药生产车间的应用展开详细论述.

  • 标签: 6S管理 制药生产车间 概念 应用
  • 简介:用纯化的CTB后腿肌肉注射免疫小鼠,每次12.5μg,每隔14天加强一次,共注射三次,末次免疫后两周收集血清,免疫小鼠诱导产生了特异性抗CTB抗体。在CHO细胞中,免疫小鼠血清能够中和CT的细胞病变效应;小鼠肠结扎实验表明,抗CTB血清能够抑制CT结合细胞表面受体GM1神经节苷脂。这表明转基因烟草产CTB在小鼠中能够产生抗细菌毒素的保护免疫

  • 标签: 霍乱毒素B亚单位 小鼠 疫苗 免疫
  • 简介:对双歧杆菌凝固型无糖酸奶的生产工艺进行了研究。采用接种双歧杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌3菌株进行发酵。确定最佳工艺条件为双歧杆菌发酵剂接种量5%、木糖醇6%于39℃条件下培养8h后,再接入接种比例为1:1、接种量为4%的保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌混合发酵剂,于42℃条件下培养3h。在此工艺条件下生产的酸奶风味纯正,凝乳状态良好,口感细腻,具有天然的奶香味。

  • 标签: 双歧杆菌 无糖 酸奶 二次发酵
  • 简介:本论文在对污水处理工艺认识的基础上,重点分析A^2/O工艺,得出A^2/O工艺在污水处理生产的上的不可忽视的地位.A^2/O工艺生物处理部分主要由厌氧池、缺氧池和好氧池三个部分组成.厌氧主要是释放磷,同时对有机物进行部分氨化;缺氧池主要是用来脱氮的;好氧池能够去除BOD还能进行消化和吸收磷,功能多样.

  • 标签: A^2/O工艺 脱氮除磷
  • 简介:颗粒剂的灌装是制药生产中关键的一环内容,设计和采取科学合理的灌装方式可以更好地提高制药生产水平和效率.本文就对于制药生产中颗粒剂灌装的相关问题进行了分析与探讨.

  • 标签: 制药生产 颗粒剂 灌装方式
  • 简介:西药质量安全直接关系到患者的身体健康与人身安全,具有较高的质量标准.但由于多种因素的影响,我国西药生产过程中仍存在较多问题.鉴于此,本文就西药生产过程中常见的质量问题进行了分析,并针对性提出解决对策,希望能为西药生产质量的控制提供有益的借鉴.

  • 标签: 西药 生产过程 质量控制
  • 简介:目的:建立一种简便的对抗体相对亲和进行定性比较的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便快速、简便地从大量抗体突变体中挑选高亲和突变体。方法:将待测抗体倍比稀释后用直接ELISA方法进行定量,同时用相同浓度抗体作为一抗与抗原进行间接ELISA反应,以前者吸光度值为横轴、后者吸光度值为纵轴绘制散点图,通过拟和后的曲线判断抗体亲和高低,并通过BIA-core法对该方法的准确性进行验证。结果:通过该方法获得的抗体亲和高低情况与经测定抗体亲和得出的结果一致。结论:该ELISA方法是一种简便可行、准确有效的抗体亲和定性比较方法,可以应用于不同抗体的亲和成熟比较研究。

  • 标签: 抗体亲和力 定性比较 酶联免疫吸附测定