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摘要:目的 探究蚕蛹蛋白粉对免疫功能的影响。方法 将蚕蛹蛋白粉按照低、中、高剂量分别灌胃给予实验小鼠30天,观察小鼠各项免疫指标的变化情况。结果 与阴性对照组比较,各剂量组小鼠体重、体重增重、脏器/体重比值等未见显著性差异(P>0.05);各剂量组淋巴细胞增殖能力、单核-巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性均显著增强(P<0.01)。结论 实验结果符合《保健食品功能检验与评价方法》的评价标准,蚕蛹蛋白粉具有增强小鼠免疫力作用。
关键词:保健食品原料;蚕蛹蛋白粉;增强免疫力
免疫是机体识别和清除外来入侵抗原及体内突变或衰老细胞,并维持机体内环境稳定的功能[1]。随着社会发展,生活节奏越来越快,由于饮食不节制,缺乏锻炼,身体处于亚健康状态人群越来越多,寻求改善亚健康状态、增强免疫力的途径一直是保健食品研发的热点。蚕蛹在《关于将油菜花粉等食品新资源列为普通食品管理的公告》(卫生部公告2004年第17号)中,为普通食品,蚕蛹蛋白粉以蚕蛹为原料制得,可作为保健食品原料使用。蚕蛹蛋白粉中富含蛋白质,是一种优质的蛋白资源。蛋白质是人体中一类重要的营养素,人体的大多类免疫物质和组织器官的自然屏障都是由蛋白质或氨基酸构成,蚕蛹蛋白粉其可促进T细胞生殖,增强淋巴细胞转化,对细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫均有一定的促进作用[2]。本实验以蚕蛹蛋白粉为研究对象,探究其增强免疫力的保健功能,为其作为保健食品原料的开发提供依据。
1 材料与方法
1.1 受试样品及实验方法
蚕蛹蛋白粉,人体推荐剂量为每日0.8g/60kg,自制。雄性ICR小鼠200只,体重18g~22g,适应性喂养7天后,将小鼠分为5组,每40只为一组,第1组进行免疫器官/体重比值测定、血清溶血素的测定和抗体生成细胞检测;第2组进行碳廓清实验;第3组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和自然杀伤(NK)细胞活性测定;第4组进行迟发型变态反应实验;第5组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。血清溶血素的测定采用血凝法,抗体生成细胞检测实验采用Jerne 改良玻片法,碳廓清实验,小鼠脾淋巴细胞转化实验采用MTT法,NK细胞活性测定采用乳酸脱氢酶(LDH)测定法,迟发型变态反应实验采用二硝基氟苯诱导小鼠DTH实验法,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验采用滴片法。每个实验组均设3个剂量组以及1个阴性对照组,各剂量组经口一次给予受试物0.07、0.13、0.40 g/kg bw剂量,相当于人体推荐用量的5倍、10倍、30倍,阴性对照组给予等量纯化水。连续给予30天后,活杀小鼠并测定相应的免疫指标。
1.2 数据处理
各实验组结果均用“平均值±标准差”的方式表示,用SPSS软件对实验数据进行分析。
2 结果与分析
2.1 对小鼠体重、脏器/体重比值的影响
结果显示,在整个实验过程中,蚕蛹蛋白粉三个剂量组小鼠体重、体重增重与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05),说明不同剂量蚕蛹蛋白粉对小鼠体重无影响。
三个剂量组小鼠胸腺/体重比值、脾脏/体重比值与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05),说明不同剂量蚕蛹蛋白粉对免疫器官重量无影响。小鼠脏器/体重比值结果见表1。
表 1对脏器/体重比值的影响
组别 | 剂量(g/kg bw) | 动物数(只) | 胸腺/体重 ()(mg/g) | 脾脏/体重 ()(mg/g) |
阴性对照组 | 0 | 10 | 3.29±1.38 | 4.05±0.63 |
低剂量组 | 0.07 | 10 | 3.30±0.79 | 4.11±0.87 |
中剂量组 | 0.13 | 10 | 3.42±0.85 | 4.26±1.10 |
高剂量组 | 0.40 | 10 | 3.51±0.82 | 4.14±1.13 |
2.2 对小鼠细胞免疫功能的影响
结果显示,蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量组均能促进淋巴细胞的增殖,差异具有统计学意义(P<0.01)。说明蚕蛹蛋白粉能提高小鼠的细胞免疫功能。细胞免疫功能指标结果见表2。
表 2对小鼠细胞免疫功能的影响
组别 | 剂量(g/kg bw) | 动物数(只) | 足跖肿胀度差值 ()(mm) | 淋巴细胞增殖能力 (OD差值)() |
阴性对照组 | 0 | 10 | 0.108±0.073 | 0.061±0.016 |
低剂量组 | 0.07 | 10 | 0.116±0.066 | 0.098±0.013** |
中剂量组 | 0.13 | 10 | 0.174±0.096 | 0.188±0.018** |
高剂量组 | 0.40 | 10 | 0.175±0.098 | 0.225±0.011** |
注:VS阴性对照组,**P<0.01
2.3 对小鼠体液免疫功能的影响
结果显示,与阴性对照组比较,蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量组小鼠半数溶血值(HC50)、抗体生成细胞数有升高趋势,但无显著性,说明蚕蛹蛋白粉有增强小鼠的体液免疫功能的趋势。体液免疫功能指标结果见表3。
表 3对小鼠体液免疫功能的影响
组别 | 剂量(g/kg bw) | 动物数(只) | 半数溶血值 (HC50)() | 溶血空斑数(个/全脾细胞) () |
阴性对照组 | 0 | 10 | 66.76±1.30 | 100.27±16.33 |
低剂量组 | 0.07 | 10 | 67.27±0.45 | 103.62±14.56 |
中剂量组 | 0.13 | 10 | 67.53±0.92 | 105.91±18.44 |
高剂量组 | 0.40 | 10 | 68.64±1.46 | 110.20±51.37 |
2.4 对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
结果显示,与阴性对照组比较,蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量组能有效提高小鼠吞噬鸡红细胞吞噬率及吞噬鸡红细胞指数(P<0.01)。说明蚕蛹蛋白粉能增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能。小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能结果见表4。
表 4对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
组别 | 剂量(g/kgbw) | 动物数(只) | 碳廓清吞噬指数 (α)() | 吞噬鸡红细胞吞噬率 ()(%) | 吞噬鸡红细胞指数(α)() |
阴性对照组 | 0 | 10 | 4.305±0.261 | 0.83±0.17 | 0.009±0.002 |
低剂量组 | 0.07 | 10 | 4.446±0.190 | 1.52±0.11** | 0.015±0.001** |
中剂量组 | 0.13 | 10 | 4.504±0.122 | 3.04±0.38** | 0.030±0.005** |
高剂量组 | 0.40 | 10 | 4.708±0.259 | 4.23±0.41** | 0.042±0.004** |
注:VS阴性对照组,**P<0.01
2.5 对小鼠NK细胞活性的影响
结果显示,与阴性对照组比较,蚕蛹蛋白粉低、中、高剂量组能有效提高小鼠的NK细胞活性(P<0.01)。说明蚕蛹蛋白粉能增强小鼠的NK细胞活性。NK细胞活性结果见表5。
表 5对小鼠NK细胞活性的影响
组别 | 剂量(g/kg bw) | 动物数(只) | NK细胞活性 ()(%) |
阴性对照组 | 0 | 10 | 35.04±4.18 |
低剂量组 | 0.07 | 10 | 53.96±5.83** |
中剂量组 | 0.13 | 10 | 69.07±4.92** |
高剂量组 | 0.40 | 10 | 110.05±8.37** |
注:VS阴性对照组,**P<0.01
3 结论
本实验以蚕蛹蛋白粉为受试物,小鼠经口灌胃30天,实验结果说明,不同剂量的蚕蛹蛋白粉均不会导致小鼠体重异常,各组间小鼠胸腺、脾脏与体重的比值均无显著差异(P>0.05),对于免疫功能方面,蚕蛹蛋白能增强小鼠细胞免疫功能,可以提高单核-巨噬细胞吞噬功能,增强NK细胞活性,具有增强免疫力作用。为后续蚕蛹蛋白粉作为保健食品原料的开发应用提供理论依据。
参考文献:
[1]智宇星,李红梅,徐安龙.中西医学视角下对免疫的再认识——基于辨证论治和免疫态的讨论[J].中医杂志,2022,63(21):2001-2008.
[2]昌友权,戚颖欣,孙学伟,等.蚕蛹蛋白对小鼠免疫作用的研究[J].食品科学,2007,28(9):520-523.