陆军军医大学第二附属医院 重庆400037
周露平
摘要:目的 研究由大豆分离蛋白粉、大豆肽粉、乳清蛋白粉为原料制得的复合蛋白粉增强免疫力活性作用。方法 根据法规开展增强免疫力功能实验,灌胃给予小鼠0.67 g/kg bw、1.33 g/kg bw、4.00 g/kg bw剂量的复合蛋白粉,共计30天,进行细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能指标及NK细胞活性测定。结果 各剂量组小鼠吞噬鸡红细胞的吞噬指数、吞噬率、NK细胞活性均显著高于阴性对照组(P<0.05)。各剂量组对小鼠体重、脏体比值、迟发型变态反应、淋巴细胞转化能力、半数溶血值(HC50)、溶血空斑数、碳廓清指数无影响(P>0.05)。结论 复合蛋白粉具有良好的增强免疫力活性作用。
关键词:保健食品;复合蛋白粉;增强免疫力
蛋白质按食物来源可分为动物性蛋白质和植物性蛋白质两大类[1]。本品复合蛋白粉由大豆分离蛋白粉、大豆肽粉、乳清蛋白粉配比而成,既包括植物性蛋白又包括动物性蛋白,符合当今营养学界推广发展双蛋白的理念。本文通过小鼠增强免疫力功能实验,研究复合蛋白粉增强免疫力的活性作用,为开发增强免疫力功能的保健食品提供依据。
1 材料与方法
1.1 受试样品、实验分组、剂量设计
受试物复合蛋白粉呈粉状,成人每日推荐服用量为8 g。三种原料日用量分别为:大豆分离蛋白粉6.4 g/d、大豆肽粉0.8 g/d、乳清蛋白粉0.8 g/d。
取体重18~22g的SPF级ICR雄性小鼠200只,实验小鼠分为5组,每40只为一组,实验Ⅰ组小鼠用于胸腺/体重、脾脏/体重比值测定、迟发型变态反应实验(DTH);实验Ⅱ组小鼠用于碳廓清实验;实验Ⅲ组小鼠用于血清溶血素的测定(半数溶血值测定法)和抗体生成细胞检测;实验Ⅳ组小鼠用于小鼠淋巴细胞转化实验(MTT法)和小鼠NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法);实验Ⅴ组小鼠用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(滴片法)。根据受试物人体推荐用量,每个实验大组均设三个剂量组0.67 g/kg bw、1.33 g/kg bw、4.00 g/kg bw(分别为推荐剂量的5、10、30倍)及对照组,各剂量组灌胃相应受试物,对照组灌胃等剂量纯化水,30天后,检测免疫指标。
2 结果与分析
2.1 不同剂量受试物对小鼠体重及增重的影响
由表1可知,经口给予小鼠受试物30天,各剂量组小鼠初始体重、终止体重及体重增重与对照组比较差异均无显著性(P>0.05),说明不同剂量复合蛋白粉对小鼠体重及增重无影响。
表 1不同剂量受试物对小鼠体重的影响
组别 | 剂量(g/kg bw) | 初始 | 终止 | 体重增重(g) | |||
鼠数 | 体重(g) | 鼠数 | 体重(g) | ||||
Ⅰ组 | 对照组 | 0 | 10 | 20.03±0.75 | 10 | 37.21±2.34 | 17.18±2.03 |
低剂量组 | 0.67 | 10 | 20.04±0.73 | 10 | 36.69±1.98 | 16.65±1.88 | |
中剂量组 | 1.33 | 10 | 19.96±0.65 | 10 | 37.10±2.05 | 17.14±1.96 | |
高剂量组 | 4.00 | 10 | 20.02±0.78 | 10 | 37.11±2.11 | 17.09±2.13 | |
Ⅱ组 | 对照组 | 0 | 10 | 19.83±0.47 | 10 | 36.38±1.96 | 16.55±1.97 |
低剂量组 | 0.67 | 10 | 20.01±0.62 | 10 | 35.74±2.08 | 15.73±1.78 | |
中剂量组 | 1.33 | 10 | 20.03±0.71 | 10 | 36.14±2.31 | 16.11±2.14 | |
高剂量组 | 4.00 | 10 | 19.84±0.83 | 10 | 36.33±1.88 | 16.49±3.04 | |
Ⅲ组 | 对照组 | 0 | 10 | 20.11±0.60 | 10 | 39.49±2.08 | 19.38±2.56 |
低剂量组 | 0.67 | 10 | 20.08±0.47 | 10 | 38.81±1.94 | 18.73±2.75 | |
中剂量组 | 1.33 | 10 | 20.12±0.55 | 10 | 38.27±3.15 | 18.15±3.02 | |
高剂量组 | 4.00 | 10 | 20.03±0.69 | 10 | 37.27±2.10 | 17.24±2.10 | |
Ⅳ组 | 对照组 | 0 | 10 | 19.97±0.33 | 10 | 38.34±2.22 | 18.37±2.08 |
低剂量组 | 0.67 | 10 | 19.95±0.41 | 10 | 39.00±3.06 | 19.05±2.11 | |
中剂量组 | 1.33 | 10 | 20.02±0.64 | 10 | 38.15±1.87 | 18.13±2.07 | |
高剂量组 | 4.00 | 10 | 20.03±0.57 | 10 | 38.59±2.05 | 18.56±1.16 | |
Ⅴ组 | 对照组 | 0 | 10 | 20.10±0.84 | 10 | 38.19±2.14 | 18.09±1.13 |
低剂量组 | 0.67 | 10 | 20.07±0.66 | 10 | 38.24±1.28 | 18.17±1.22 | |
中剂量组 | 1.33 | 10 | 20.08±0.78 | 10 | 39.32±2.46 | 19.24±1.98 | |
高剂量组 | 4.00 | 10 | 20.11±0.39 | 10 | 38.93±1.59 | 18.82±2.33 |
2.2 不同剂量受试物对小鼠胸腺/体重、脾脏/体重及迟发型变态反应的影响
由表2可知,经口给予小鼠受试物
30天,各剂量组小鼠胸腺/体重、脾脏/体重、小鼠足跖肿胀度与对照组比较差异均无显著性(P>0.05),说明不同剂量复合蛋白粉对小鼠胸腺/体重、脾脏/体重比值及迟发型变态反应无影响。
表 2不同剂量受试物对小鼠胸腺/体重、脾脏/体重比值及迟发型变态反应的影响
组别 | 剂量 (g/kg bw) | 动物数 (只) | 胸腺/体重 ()(mg/g) | 脾脏/体重 ()(mg/g) | 足跖肿胀度差值 ()(mm) | ||
对照组 | 0 | 10 | 1.837±0.394 | 3.520±0.604 | 0.399±0.170 | ||
低剂量组 | 0.67 | 10 | 1.792±0.287 | 3.476±0.558 | 0.402±0.183 | ||
中剂量组 | 1.33 | 10 | 1.703±0.314 | 3.602±0.613 | 0.411±0.208 | ||
高剂量组 | 4.00 | 10 | 1.814±0.259 | 3.498±0.538 | 0.422±0.137 | ||
2.3 不同剂量受试物对小鼠细胞免疫功能及NK细胞活性的影响
由表3可知,经口给予小鼠受试物30天,各剂量组小鼠淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),说明复合蛋白粉对小鼠迟发型变态反应能力及小鼠的脾淋巴细胞增殖能力无影响。各剂量组小鼠NK细胞活性均高于对照组,且具有显著性意义(P<0.05),即复合蛋白粉能增强小鼠NK细胞活性。
表 3不同剂量受试物对小鼠迟发型变态反应和淋巴细胞转化能力及NK细胞活性的影响
组别 | 剂量 (g/kg bw) | 动物数 (只) | 淋巴细胞增殖能力 (OD差值)() | NK细胞活性转换值 () | |
对照组 | 0 | 10 | 0.315±0.056 | 0.381±0.128 | |
低剂量组 | 0.67 | 10 | 0.342±0.117 | 0.511±0.063* | |
中剂量组 | 1.33 | 10 | 0.343±0.119 | 0.513±0.072* | |
高剂量组 | 4.00 | 10 | 0.345±0.087 | 0.520±0.081* |
注:与对照组比较,*P<0.05
2.4 不同剂量受试物对小鼠体液免疫功能的影响
由表4可知,经口给予小鼠受试物30天,各剂量组小鼠抗体生成细胞数和半数溶血值均高于对照组,且具有显著性意义(P<0.05),即复合蛋白粉能增加小鼠抗体生成细胞数和血清溶血素水平。
表 4不同剂量受试物对小鼠抗体生成细胞数和血清溶血素水平(HC50)的影响
组别 | 剂量 (g/kg bw) | 动物数 (只) | 半数溶血值 (HC50)() | 溶血空斑数(×103 /全脾)() |
对照组 | 0 | 10 | 179.33±33.47 | 27.16±9.325 |
低剂量组 | 0.67 | 10 | 203.10±40.08 | 28.02±13.877 |
中剂量组 | 1.33 | 10 | 206.49±46.13 | 32.73±16.947 |
高剂量组 | 4.00 | 10 | 210.78±39.20 | 33.22±17.657 |
注:与对照组比较,*P<0.05
2.5 不同剂量受试物对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能及小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力的影响
由表5可知,经口给予小鼠受试物30天,各剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数均高于对照组,且具有显著性意义(P<0.05),即复合蛋白粉能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。各剂量组小鼠碳廓清吞噬指数与对照组比较均无显著性意义(P>0.05),即复合蛋白粉对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力无影响。
表 5不同剂量受试物对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能及小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力的影响
组别 | 动物数(只) | 吞噬率平方根反正弦转换值 | 吞噬鸡红细胞指数(α)() | 组别 | 动物数(只) | 碳廓清吞噬指数 (α)() |
对照组 | 10 | 0.372±0.073 | 0.143±0.052 | 对照组 | 10 | 6.62±0.57 |
低剂量组 | 10 | 0.498±0.056* | 0.234±0.043* | 低剂量组 | 10 | 6.85±0.73 |
中剂量组 | 10 | 0.507±0.073* | 0.252±0.064* | 中剂量组 | 10 | 6.91±0.84 |
高剂量组 | 10 | 0.546±0.082* | 0.271±0.078* | 高剂量组 | 10 | 7.19±0.91 |
注:与对照组比较,*P<0.05
3 结论
现代营养学更多的强调蛋白质中氨基酸的平衡,大豆分离蛋白和乳清蛋白必需氨基酸含量都较高,其必需氨基酸总量及氨基酸组成都与FAO/WHO模式相近。但是大豆分离蛋白中的人体必需氨基酸蛋氨酸和胱氨酸含量较低,而其在乳清蛋白中的含量非常丰富;大豆分离蛋白中人体必需氨基酸苯丙氨酸和酪氨酸的含量的极其丰富[2]。大豆肽的氨基酸结构组成合理,且易于消化吸收[3]。因此,三者复配之后,使得复合蛋白粉在增强免疫力方面效果更显著。本文通过小鼠增强免疫力功能实验验证了三种原料配比而成的复合蛋白粉增强免疫力作用,可以显著提高小鼠吞噬鸡红细胞的吞噬指数、吞噬率、NK细胞活性(P<0.05)具有增强免疫力的作用。
参考文献:
[1]陈垚,吕志敏,高景芳,等.某蛋白粉增强免疫功能的研究[J].预防医学论坛,2017,23(2):146-149.
[2]陆罗定,徐德州,杨明晶.大豆分离蛋白和浓缩乳清蛋白复配蛋白粉增强小鼠免疫功能的研究[J].
毒理学杂志,2022,36(3):254-257.
[3]李红胜,高存川,谢为天,等.大豆肽对小鼠免疫功能的影响[J].广东农业科学,2012,39(5):109-111.