血细胞形态学检查措施涉及哪些

血细胞形态学检查措施涉及哪些

袁璐

四川省人民医院健康管理中心晓康之家分部 四川成都 610000

血细胞形态学检验是目前临床血液样本检验的重点项目之一，通过使用自动化仪器、显微镜检查人体血细胞的形态、数量，在多种疾病的诊断鉴别中发挥出重要作用。血细胞形态学检查措施设计涂片制备、染色、显微镜形态学检查等，适用于不同的检查项目。下面让我们一起了解一下血细胞形态学检查措施涉及哪些方面，提高对血细胞形态学检查的认识与理解。

一、血细胞形态学检查应用情况

血细胞形态学检查是诊断鉴别血液疾病的主要检查手段之一，在血液病治疗效果、预后判断方面也有很重要的价值。通过对患者进行血细胞形态学检查能够对周围血细胞异常的病理形态进行发现，通过显微镜观察血细胞形态、数量变化判断积极健康程度。白细胞增高原因、感染程度判断均可以通过血细胞形态学检查确认。血细胞形态学检查可以分析贫血的病因，进行形态学分类。血细胞形态学检查可以有效、准确鉴别血小板减少，对机体血小板功能进行了解。

二、血细胞形态学检查前准备工作

血细胞形态学检查需要对患者静脉血、末梢血进行采集，通过直接制片手段制备检查样本，利用专用仪器、显微镜完成血细胞形态学检查。血液样本制片时经常会使用乙二胺四乙酸抗凝，对血液样本进行摇晃均匀，保证血液样本质量符合血细胞形态学检查要求。血液样本不能振荡，在发现血液样本中存在凝块时不能进行血细胞形态学检查，需要重新采集血液样本，重新制片。对患者进行血细胞形态学检查前，需要向患者及家属做好宣教工作，需要详细介绍血细胞形态学检查的目的、操作方法、注意事项等，以此加深患者对血细胞形态学检查的认识与重视程度，能够了解血细胞形态学检查对于血液疾病诊断鉴别的重要意义，提高检查依从性。嘱咐患者接受血细胞形态学检查前不能剧烈运动、劳动，检查前需要患者平静呼吸、稳定情绪15分钟左右。如果在天气寒冷的冬天对患者进行血细胞形态学检查，采集血液样本前需保证患者暖和，血液循环需要保持通畅。血细胞形态学检查前一般情况下患者不需要空腹，在需要同时进行血糖、血脂、肝肾功能测定时，要求患者空腹。血细胞形态学检查前一天要求患者清淡饮食、忌烟酒。需要空腹情况下需要在晚上10点后开始禁食、水。

三、血细胞形态学检查措施

血细胞形态学检查措施有很多种，适用的情况存在差异，需要根据患者的实际情况、疑似疾病类型等进行合理的选择，保证血细胞形态学检查准确性的同时，尽量节省检查费用、时间等。临床上进行常规的血细胞形态学检查时，一般采取光学显微镜进行细胞形态学观察。血细胞形态学检查中采取细胞化学染色措施可以进行感染性疾病鉴别诊断，判断白血病的分型。显微镜检查措施可以进行血液样本中活细胞内部结构与活动的观察，了解细胞生长情况，对细胞成熟与衰亡的过程进行了解，同时可以观察到活细胞在不同刺激下的实际反应。荧光显微镜检查措施主要用于血细胞DNA、RNA检查中，现如今已经逐渐被流式细胞仪替代，血细胞形态学检查效率更高、准确率更高。通过透射/扫描电子显微镜可以对血细胞的超微结构进行观察。血细胞形态学检查的涂片制备是获得准确检查结果的关键，需要严格按照涂片制备规范进行操作。对患者完成血液样本采集后，取1滴新鲜的血液样本（或抗凝血液样本）滴在载玻片的一侧近端处，以30°-45°进行推片，血液样本涂片制备的血膜长度控制在3-5cm内，薄厚适宜、头尾清楚。血液样本涂片制备完成以后，需要进行染色，使用比较多的染色方法为瑞氏染色、吉姆萨染色。将制备好的血液样本涂片在染色架上放好，取适量的瑞氏染液进行血膜的全面覆盖，静置30秒左右。按照1:1.2-1:1.5比例将磷酸盐缓冲液进行滴加，进行10-15分钟染色。染色完成后将血液样本涂片使用流动水冲洗干净瑞氏染液，让涂片自然晾干或者使用滤纸吸干水分，进行显微镜检查。使用显微镜进行血细胞形态学检查时，根据不同的检查要求、项目可以分别使用低倍显微镜、油镜。低倍显微镜主要作用是观察血液样本涂片的染色结果是否理想，对涂片体、尾部细胞的实际分布情况进行观察和确认。使用低倍显微镜观察到血液样本涂片染色不理想、不合格时，需要进行涂片重新制备。在血液样本涂片检查中通过低倍显微镜可以对白细胞数量、血小板数量进行估计。低倍显微镜可以发现血细胞中幼稚细胞与寄生虫。油镜可以对血细胞中是否存在异常细胞与寄生虫进行观察。通过油镜对血液样本涂片体、胃部交界处的100个白细胞进行观察，可以进行中性粒细胞、单核细胞、异常细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞的占比进行准确计算。使用油镜可以对血小板的病理形态变化进行观察，进行血小板数量计算。油镜可以观察红细胞、白细胞形态有无异常表现。

四、血细胞形态学检查结果解读

血细胞形态学检查相关指标包括红细胞形态、白细胞形态、血小板形态。其中：（1）红细胞形态：血细胞形态学检查通过使用显微镜可以观察血液样本中红细胞大小、形态、染色、结构等，计算红细胞数量，主要用于诊断鉴别各类型贫血、红细胞形态异常、红细胞增多症等。血液系统疾病诸如缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜、再生障碍性贫血等均可以根据红细胞形态学检查进行诊断。健康人体的红细胞无核，直径一般在6-9μm之间，对红细胞进行瑞氏染色后呈现为粉红色，双面微凹，细胞中央1/3处粉红色较轻。红细胞形态学检查结果中的异常情况，观察到球形红细胞提示脾功能亢进、溶血性贫血。观察到泪滴形红细胞提示骨髓纤维化、弥散性血管内凝血。观察到口形红细胞提示酒精性肝病、红细胞增多症。观察到镰形红细胞提示血红蛋白病、镰形红细胞贫血。靶形红细胞提示缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。红细胞染色后浅染情况多见于缺铁性贫血、地中海贫血、铁粒幼细胞增多，浓染情况多见于球形细胞增多症、红白血病、溶血性贫血、骨髓增生异常综合征。

（2）白细胞形态：血细胞形态学检查过程中通过显微镜观察血液样本涂片的白细胞形态，主要观察中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞形态变化，可以诊断鉴别急慢性白血病、评估感染程度等。急性感染、急性中毒、急性失血、急性溶血，恶性贫血、再生障碍性贫血等血液系统疾病患者均需要进行白细胞形态学检查。中性粒细胞核左移常出现白细胞增高，可能同时出现中性粒细胞的中毒性改变，提示急性感染、急性失血、急性中毒。中性粒细胞核右移常见于恶性贫血、再生障碍性贫血、炎症恢复期，疾病进行期内发生中性粒细胞核右移表明预后不良。淋巴细胞出现卫星现象提示细胞染色体损伤，与核辐射、大剂量电离辐射有关。观察到异形淋巴细胞多因为病毒感染，例如EB病毒感染。嗜酸性粒细胞增多提示寄生虫感染、淋巴瘤、嗜酸性粒细胞综合征。嗜碱性粒细胞增多常发生于慢性粒细胞白血病、嗜碱性粒细胞白血病、骨髓纤维化，恶性肿瘤（转移癌）、变态反应性疾病也会发生嗜碱性粒细胞增多。单核细胞增多多见于急性感染恢复期、恶性组织细胞病、黑热病。

（3）血小板形态：显微镜下观察血小板形态可以判断血小板相关性疾病，例如缺铁性贫血、再生障碍性贫血、特发性血小板减少性紫癜等。正常的血小板聚集成团、成簇。血小板颗粒减少、无颗粒，胞质淡蓝色、灰蓝色，提示骨髓增生异常综合征。血小板出现卫星现象，可见血小板吞噬。血小板增多、在油镜试液中聚集，提示原发性血小板增多症。血小板数量正常但是未聚集，呈单个散在分布，提示血小板无力症。

血细胞形态学检验措施很多，普遍用于血液相关性疾病的诊断鉴别，通过观察红细胞、白细胞、血小板形态异常变化等进行疾病判断，为疾病诊断、治疗提供可靠依据。