微生物检验知识你了解吗

微生物检验知识你了解吗

曾筱

成都市疾病预防控制中心，四川 成都 610041

近几年，在新发病原体的持续出现、多重耐药菌占比提升和医院发生流行感染的背景下，微生物检验在临床医疗中的地位越来越重要。相关工作人员不但承担着精准、快速发现并鉴定微生物的任务，还需要顺应临床对药物过敏解释和鉴定的要求。但是在日常医疗工作当中，通常因为微生物检验时间长、鉴定结果繁杂、药物在体内、外作用不同等情况，致使临床医疗人员和检验人员之间出现隔阂，这就要求检验人员增强和医疗人员的交流，科学合理的解释检验结果。另外，在进行微生物检验工作的时候，应确保检测环境和所需器具的干净程度，还应确保检验人员的规范操作，最大程度保证检验操作的无菌性，避免由于人为因素导致错误检验结果，另外应合适的温度环境中培养，从而给正确决策和科学生产提供依据。

一、临床微生物检验的目的和要求

(一)临床微生物学检验的目的

①给临床诊断感染性疾病提供依据。

②给临床治疗感染性疾病提供用药参考。

③给感染疾病提供病原微生物和耐药性参数。

④创新或优化临床微生物检验技术手段。

(二)临床微生物学检验的要求

①精准且快速的获得检验报告。

②操作人员应具备扎实的理论知识、熟练的检验技能，需要形成无菌检验以及有菌观念的良好习惯。

③在进行微生物检验时需要全方位控制操作质量，同时开展相关的质量控制考核。

④注重实验室的全面杀菌消毒工作。

(三)诊断试验的选择原则

①选取有操作价值的实验：应鉴定2种不同的细菌，选取一项2种细菌反映出的不同实验结果，也就是一种呈阳性，一种呈阴性，此实验才有鉴定意义。

②选取快捷、简便的实验：第一，鉴定细菌有很多方式，不是必须要逐一开展试验，仅选取当中一两种实现目标就可以。第二，选取使用简单、便捷的方式。第三，使用复合培养基，操作一次能够看到好多个生化反应，比如动力靛基质脲酶和克氏双糖铁等。

③对实验的特异性及敏感性进行充分考虑：敏感性和特异性高就代表假阴性结果少。实验的特异性与敏感性是互相关联的，其敏感性上升，会导致特异性降低。

二、培养基的灭菌及使用

①在配置培养基的过程中，应查看其使用期限是否超过了保质期，还有瓶口的密封性，确保其没有出现变质和吸潮现象。

②配制培养基时，应精准称量，比如应精准分装盐水。

③必须要确保既配制既灭菌，配制完但没有灭菌的培养基不可以长期放置，更不能过夜。

④灭菌期间应确保恒压以及恒温，另外应确保合理的灭菌时间。

⑤培养基完成灭菌后应放进冰箱储存，能够储存一个星期，通常低于三天。并且应坚持“先入先出”的原则，使用先配制的培养基。

⑥使用培养基的时候，应针对具体的用量，使用水浴锅溶化培养基成也液体形态，之后马上降低水浴温度等待后续使用，绝对不能让培养基一直处于高温。

⑦进行微生物检测的过程中，倾倒培养基的温度不能太高，最好控制在45℃，防止烫死细菌；与不能太凉，防止熔化的培养基再次凝固，影响对结果的分析和观察。

⑧所有培养基瓶中都要留出空白。

⑨最好统一做样，防止总是打开培养基，增加被污染的概率，产生错误结果。

⑩如果剩余的培养基很少，可以先把其倾倒为空白用板。

三、检测环境的维持

（一）大环境（检测室）

①检验过程中，应关闭空调及所有窗户，或者使用酒精给房间消毒，防止屋内空气流通对超净台内环境产生影响。

②倘若在初始的微生物检测室开展检验工作，应不定时打开紫外灯，给室内进行消毒杀菌。

（二）小环境（超净工作台）

①对初效过滤器进行定时清洁并更换。

②进行检测工作前，全面清洁超净台内部，使用百分之七十五的酒精进行消毒，同时预先三十分钟打开紫外灯，对其进行杀菌处理。

③关闭紫外灯并打开风机，适当调节进风量，注意不能太低。

④检测完成之后，应清理超净台内部，使用百分之七十五的酒精进行消毒。⑤针对紫外灯的使用期限定期更换。

⑥检测过程中，应做好检测菌落的环境空白。

（三）工器具的洁净度

①通过干热灭菌的方法给玻璃器皿灭菌。

②应确保检测需要的勺子和剪刀等物品的专用性，不能混合其他器具使用，在使用前用酒精进行消毒，然后通过灼烧方法灭菌。

③通过灼烧方法给接种环灭菌，但是在检测过程中应先冷却接种环。

四、样品的采集及检测

（一）确保采样器具的无菌性

①通过干热灭菌的方法给玻璃器皿灭菌，确保时间与恒温的合理性。

②使用取样筐之前应使用百分之七十五的酒精进行消毒。

③给取样勺进行清洁消毒，然后再用酒精进行消毒。

④使用酒精给取样袋消毒，再放置于超净台通过紫外灯进行消毒。

⑤使用酒精给电子秤表面进行擦拭消毒。

2. 人员操作

①在取样和检测之前都必须洗手并消毒，确保手部干净、无菌。

②取样应极具代表性，并且需标志清晰。

③完成取样后，不能一直停留在室内，应把样品第一时间放进超净台，通过紫外灯给其消毒。

④应在规定的检测区域开展各项操作。

⑤在检测之前，应使用酒精棉球擦拭样品袋口部，消毒之后再打开。

⑥在把样品放入盐水瓶中的时候，应尽可能避免袋子和勺子直接接触瓶口。

⑦应精准计量样品，且稀释倍数也应精准，在稀释一百倍的过程中，应在盐水中放入一毫升的吸管，不能把样品顺着管壁流下去，另外应防止捅破管底部。

⑧最好保持盐水温度在40℃上下，不可以太热，会烫死一些微生物；也不可以太冷，不会完全熔化样品。

⑨在稀释过程中应保证摇匀，确保溶液的均匀性。

⑩倾倒平皿的时候应尽量不要让培养基瓶口不直接触碰到平皿；应倾倒适量的培养基，不能过少，不然在培养期间容易干掉，导致微生物死亡，最佳倾倒量为十五毫升左右。

⑪给大肠菌群做样的过程中，应预先根据所需量准备好乳糖胆盐培养基和培养管，然后放到超净台中通过紫外线进行消毒杀菌。

⑫接第二环节的时候，应预先冷却接种针，防止发生接不上菌落的现象，致使没有办法进行确认、判断。

⑬完成检测后，第一时间放到培养箱中，同时对超净台进行清洁。

综上所述，微生物检验对现代临床疾病的预防和治疗具有非常积极的意义。在临床广泛采用抗生素的背景下，再加上不确定一些疾病的引发因素，很多病菌出现了变异性，增加了其抵抗力与耐药性，无疑会导致很多细菌性疾病的治疗增加难度，严重威胁了人们的身体健康。在医疗技术的持续发展下，微生物检验已经成为了预防疾病的主要方式，将其作为标准给患者建立出科学可行的治疗方案，还能够研发出高效的抗菌药物。