无菌药品生产环境微生物的鉴定和种群研究

无菌药品生产环境微生物的鉴定和种群研究

林映美

广州白云山健护医疗用品有限公司 广东省广州市 510145

【摘要】目的：分析无菌药品生产环节微生物鉴定和种群研究。方法：对冻干粉针剂生产车间B洁净区动态监测发现的72株菌株进行分离纯化，采取全自动微生物鉴定系统进行鉴定和种群研究。结果：葡萄球菌属、微球菌属、节杆菌属种数和发现频次较多。结论：在洁净区环境监测中规范操作人员工作流程，严格进行清洁消毒，能够降低人为因素引起的微生物污染，从而保证药品质量。

【关键词】无菌药品；生产环境；微生物；鉴定；种群研究

随着医疗技术不断提高，人们对临床用药需求量逐渐增大，对药品质量安全管理要求也不断提高。降低药品微生物感染能够保证药品质量，保证患者用药安全^[1]。近年来我国医药行业对无菌药物生产洁净级别提出了更高要求，为保证药品质量，对生产质量管理和生产环节管理等多个方面进行了严格控制。对无菌药品生产环境进行微生物鉴定能够保证药品安全和生产环境安全。但是在对药品无菌检查是极容易受到各种因素影响污染药品，降低药品安全性^[2]。此次研究则分析无菌药品生产环境微生物鉴定和种群，为药品检查提供有效依据。主要内容见下文：

1 资料与方法

1. 1. 一般资料

对冻干粉针剂生产车间B洁净区动态监测发现的72株菌株进行分离纯化，采取全自动微生物鉴定系统进行鉴定和种群研究。试剂：胰蛋白陈大豆琼脂固体培养基，甲醇、盐酸、己烷、氢氧化钠、氯化钠、微生物样本、收集的72株分离菌种。

1. 2. 方法

观察微生物生长培养皿中取一铂金耳菌苔，在大豆胰蛋白胨营养琼脂培养基上，利用三区线进行污染菌分离。在三区线培养平板第三区上，利用直径4mm无菌接种环轻挂菌落表面，利用天平称取大概40mg湿重的菌体细胞，放置在洁净干燥带螺旋盖培养管当中。将气相色谱样品管放置气相色谱仪当中，采取全自动微生物生化检测，检测完成后打印检测报告。

1. 3. 观察指标

分析生产车间洁净区环境监测收集的72株菌株脂肪酸分析鉴定情况。

1.4 统计学方法

将数据纳入SPSS20.0软件中分析，计量资料比较采用t检验，并以（ ）表示，率计数资料采用χ²检验，并以率（%）表示，（P<0.05）为差异显著，有统计学意义。

2 结果

分析检测结果情况

72株分离菌株分属为12个属，其中葡萄球菌属、微球菌属、节杆菌属种数和发现频次较多。见表1。

表1 分析检测结果情况 [n,(%)]

3. 讨论

药品无菌检验是提高药品质量，降低用药不良反应的重要方法。目前药品无菌检测方法较多，比如：全自动微生物生化鉴定。全自动微生物生化鉴定系统是一项操作方便、快捷、自动化、标准化程度较高的微生物自动分析仪器，应用于药品无菌检验中效果较明显^[3]。微生物污染是无菌药品质量评价的关键指标，洁净区受到污染，需要及时探查原因，实施针对性处理。通过洁净区环境微生物鉴定和种属分析研究，能够为微生物污染处理提供有效依据。

此次研究中发现，72株分离菌株中葡萄球菌属：种数5，发现频次30；微球菌属：种数3，发现频次27；节杆菌属：种数4，发现频次19；短芽孢杆菌属：种数1，发现频次7；伯克氏菌属：种数2，发现频次4；假单胞菌属：种数2，发现频次4；芽孢杆菌属：种数1，发现频次3；类芽孢杆菌属：种数1，发现频次2；戈登氏菌属：种数1，发现频次3；棒状杆菌属：种数1，发现频次2；考克氏菌属：种数1，发现频次2；不动杆菌属：种数1，发现频次2。其中葡萄球菌属、微球菌属、节杆菌属种数和发现频次较多。葡萄球菌属、微球菌属、节杆菌属为人体皮肤上微生物，发现生产环境细菌性微生物污染以人源性葡萄球菌属细菌为主，人体为此次研究中最大污染源。有关研究发现，无菌环境中污染最主要来源是人员活动,无菌药品污染大多数由人员引起

^[4]。人体是微生物主要携带体，在正常环境下，人员不管为站立、行走还是喷嚏均会向周围环境释放较多微生物粒子，从而破坏无菌环境。所以在无菌药品生产环境中应该对洁净区人员行为进行规范，严格按照相关规定清洁消毒，从根本上减少人员导致的微生物污染。建立并严格实施卫生操作规范，对人员定期进行卫生教育，加强有关人员无菌意识，从根本上降低污染风险。

综上所述，在洁净区环境监测中规范操作人员工作流程，严格进行清洁消毒，能够降低人为因素引起的微生物污染，从而保证药品质量。

参考文献

[1]赵丽元,李寅生,丁红雨等.无菌药品生产企业洁净环境微生物16S rRNA数据分析与应用[J].中国医药工业杂志,2021,52(08):1064-1068.

[2]王似锦,余萌,王杠杠等.制药企业洁净区环境监控与环境菌库的建设[J].中国医药工业杂志,2020,51(10):1334-1340.

[3]徐全华,王羿.无菌药品生产环境微生物的鉴定和种群分析[J].中国药事,2019,33(12):1411-1418.

[4]刘卫德,刘绪平,熊骏等.无菌药品生产洁净车间环境菌鉴定与溯源分析[J].中国医药工业杂志,2019,50(11):1335-1340.