吲哚胺2,3-双加氧酶在慢性髓系白血病中的表达及意义

吲哚胺 2,3-双加氧酶在慢性髓系白血病中的表达及意义

申娜 贺靖澜 于艳芳 王帅

河北工程大学附属医院 056000

摘要：目的：慢性髓系白血病经酪氨酸激酶抑制剂治疗后疗效较前明显改善，但仍有复发或急变可能，且病情凶险。故判断病情可能预后极其重要。本研究探讨吲哚胺2,3-双加氧酶在慢性髓系白血病各期中的表达及意义。方法：于我院收集病例，分为正常对照组、CML-CP组， CML-BP/AP组。用ELISA方法检测IDO水平。结果：对照组IDO水平显著低于CML-CP组， CML-BP/AP组IDO水平明显高于CML-CP组，且差异均具有统计学意义。结论：慢性髓系白血病患者中，IDO水平高表达，表明IDO水平与慢性髓系白血病发生发展密切相关。

关键词: 吲哚胺2,3-双加氧酶 慢性髓系白血病 ELISA

Expression and Role of IDO in Chronic Myelogenous Leukemia/ Shen Na He Jing-lan Wang Shuai YU yan-fang //Affiliated Hospital of Hebei University of Engineering,Handan,056002

　【Abstract】　Objective：Treated by tyrosine kinase inhibitors ( TKI) ，some Chronic Myelogenous Leukemia（CML）patients respond initially to TKI，but later some of them may transform from CP to more advanced phase such as accelerated phase or blastic phase. Thus，it is very important to judge the patient’s condition. In this study to investigate the expression and significance of indoleamine2, 3-dioxygenase(IDO) in control group and in different phases of CML. Method：This study includes the control group, CML-CP group and CML-BP/AP group.The enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）was used to detect expression of IDO in control group and in different phases of CML. Result：Expression of IDO in control group was significantly lower than that in CML-CP group，expression of IDO in CML-BP/AP was notably higher than that in CML-CP group. Conclusion：In CML patients，overexpression of IDO plays an important role in CML blast crisis and prognosis.

　　【Key words】　IDO；　CML；　ELISA

慢性髓系白血病（CML）是获得性造血干细胞恶性克隆性疾病，其表现为骨髓和外周血中粒细胞过度生成，Ph染色体及BCR/ABL融合基因表达阳性，经酪氨酸酶抑制剂治疗后易于缓解，但仍有微小残留的白血病干细胞不能完全根除，成为疾病复发的根源。一旦病情急变，病情凶险，半数以上患者在3个月内死亡。基于本病的发生发展特点，为指导疾病评估与预后，我们对不同时期CML患者血清哚胺2,3-双加氧酶（IDO）水平变化进行研究，现报告如下。

1.病例与方法

1.1病例选择

收集我院血液科2009年12月至2014年12月收治的慢性髓系白血病患者血液标本。研究对象分为慢性期组（CML-CP组）、加速或急变组（CML-BP/AP组）、正常对照组。其中，慢性期15例，男10例，女5例，中位年龄48岁；加速期和急变期16例，男8例，女8例，；对照组为健康体检者16例，男10例，女6例，中位年龄45岁。慢性髓系白血病诊断依赖WHO分型，细胞遗传学检测Ph染色体，分子生物学检测BCR/ABL融合基因。所有病例都获得病人知情同意。

1.2标本采集

晨起无菌抽取CML-CP组、CML-AP/BP组所有观察人员的空腹静脉血6ml，血凝块形成后离心20min，速度为2000r/min，然后分离血清，置-80℃冰箱保存待用。正常对照组为健康体检时抽取，血标本处理方法同上。

1.3观察指标与方法

观察CML-CP组、CML-AP/BP组及正常对照组所有人员采用ELISA法测定血清哚胺2,3-双加氧酶水平，依据该试剂盒说明书实施操作。

1.4统计分析

应用SPSS 17.0 统计软件进行统计学处理，计量资料采用（x-±s）进行表示，两组间均数比较采用t检验，检验水准为α=0.05，P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

血清IDO在CML各期患者血清中的表达

对照组IDO水平显著低于CML-CP组， CML-BP/AP组IDO水平明显高于CML-CP组，且差异均具有统计学意义，见表1。

表1 CML不同时期IDD水平变化

Table1 Expression of IDO in different phrase of CML

3 讨论

吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）是色氨酸分解代谢的限速酶，而色氨酸是细胞维持活化和增殖所必需的氨基酸，蛋白质组成不可或缺的重要成分^[1]。正常机体存在少量IDO，但在自身免疫性疾病和各种肿瘤时IDO活性增强或过度表达。儿童急性髓系白血病中IDO表达组比不表达组的8年无事件生存率显著下降^[2].目前已公认血液系统肿瘤细胞中确实有IDO表达^[3-4]。经实验检测发现在人类急性单核系白血病细胞、急性淋巴系白血病细胞、急性髓系白血病细胞中均有IDOmRNA和蛋白的表达^{[3] [5]}。肿瘤微环境中IDO高表达，与肿瘤细胞免疫抑制及其临床预后差密切相关^[6-7]。研究证实，急性髓系白血病细胞高表达IDO，可降解局部环境中的色氨酸，进而抑制外周血T淋巴细胞增殖，阻抑T细胞活化，使得白血病细胞出现免疫逃逸现象^[8]。

本实验中发现，较正常对照组，慢性髓系白血病患者体内IDO水平显著升高，且随病情进展，体内IDO水平呈进行性升高趋势。由于肿瘤细胞具有凋亡受阻和增殖失控的特点，故而在疾病发展过程中，肿瘤患者的免疫系统无法有效彻底杀灭肿瘤细胞，使得这些细胞逃避自身免疫系统监视而存活^[9]。当前经酪氨酸激酶抑制剂治疗后大部分慢性期患者可达到完全缓解，但仍有部分病例复发甚至进入加速或急变期，结合本实验结果，可见IDO表达越强患者预后越差。鉴于目前越来越认识到IDO高表达可导致肿瘤微环境及引流淋巴管内色氨酸的大量耗竭，并产生大量有毒代谢产物，进而抑制免疫系统最终引起肿瘤免疫耐受使得肿瘤细胞逃避免疫系统监测^[10]。因而，监测IDO活性对慢性髓系白血病发病、疗效及预后具有指导意义。但由于本研究样本量较少，有待进一步深入研究。

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第一作者 申娜 硕士研究生 主治医师 河北工程大学附属医院

通讯作者 王帅 硕士研究生 主治医师 河北工程大学附属医院

本课题为邯郸市科技局项目（编号为1523108076-22）