高效液相色谱测定美沙拉嗪的有关物质

高效液相色谱测定美沙拉嗪的有关物质

宋岳

（佳木斯市食品药品检验检测中心黑龙江佳木斯154000）

【摘要】目的：探讨高效液相色谱法对美沙拉嗪的有关物质的测定。方法：应用高效液相色谱法（HPLC法），确定检测波长，进行色谱条件及系统适用性实验，进行对照品储备液和标准曲线的制备，回收率和RSD试验。结果：通过对美沙拉嗪进行多次高效液相色谱测定发现，美沙拉嗪范围在100～500μg/mL，r=0.9991，5-氨基水杨酸同峰面积线性关系良好，回收率达到了平均值为99.98%，RSD≈1.25%。结论：高效液相色谱法测定对美沙拉嗪的有关物质，灵敏度高，可以广泛应用于药物研究。

【关键词】高效液相色谱法；测定；美沙拉嗪；物质

【中图分类号】R975【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）35-0305-01

美沙拉嗪（5-氨基水杨酸，5-ASA）属解热镇痛药。它与磺胺吡啶以偶氮键结合的化合物就是前面所说的柳氮磺胺吡啶，临床上被广泛应用于治疗溃疡性结肠炎。由于5-ASA口服对酸不稳定，并可被小肠吸收，而不能到达结肠部位。而美沙拉嗪是以丙烯酸树脂包衣制成的5-ASA口服剂型，目的是使活性成分释放进入结肠[1]。对美沙拉嗪采用高效液相色谱（HPLC）法进行测定。

1.仪器与试药

高效液相色谱议、XSl05分析天平、UV-2550型紫外分光光度计、乙腈、甲醇溶液、辛烷磺酸钠，样品美沙拉嗪胶囊，规格250mg，3-氨基水杨酸对照品，水为纯净水。

2.方法与结果

2.1进行溶液等制备取细粉化药物加入流动相，供试品溶液的制备，制成每1毫升中约含有0.5毫克美沙拉嗪的溶液。精密度要达到了实验检测的标准。加入的流动相被500倍精确稀释，并做为对照溶液。在流动相中加入适量氨基水杨酸进行溶解，制得容量为1μg的1ml3-氨基水杨酸溶液为对照品溶液。称量一定量的空白辅料，加入到流动相中，制备空白辅料溶液，通过实验对比分析[2]。

2.2波长选择应使用3-氨基水杨酸溶液，在瓶中倒入适量后，溶质应为10mg左右。在放置一段时间后，应将少量流动相添加到测量瓶中进行稀释，混合对两种溶液并观察溶解程度。在量瓶中取2毫升溶液，连续稀释，摇匀，紫外光下观察波长，波长范围测定采用分光光度法。为确保波长范围的确定精度，我们要对结果进行扫描。波长的选择实验中以297nm处吸收速率最高，在美沙拉嗪的原料药220nm处吸收速率最高。两者之间有明显的差异。因此，可以将测定波长控制在220nm左右，以确保有效获得实验的有效性。

2.3检测限试验称取美沙拉嗪对照品溶液稀释多次进样测定，当信噪比为3：1时测定为最低检测限。美沙拉秦的最低检出量为16.64ng，注射量为20μL。

2.4定量限试验

将3-氨基水杨酸溶液对照品溶液稀释多次，定量限为信噪比为10：1时的浓度；3-氨基水杨酸的测定限为86.69ng/ml，制作进样6份为最低定量限浓度溶液，测得6份溶液的色谱峰保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）分别为0.15%和2.65%。

2.5线性范围

以适量的3-氨基水杨酸杂质为对照比溶液，通过精密称重和稀释，制备成每1ml中含约10μg的3-氨基水杨酸溶液。用流动相稀释贮备液，制备一系列浓度为0.2～2.0μg/ml的溶液，并将每种溶液20μg/ml注入液相色谱仪进行色谱记录。横坐标（X）为3-氨基水杨酸浓度，纵坐标（Y）为相应峰面积进行线性回归。美沙拉嗪范围在100～500μg/mL，r=0.9991，线性关系良好。

2.6回收率试验配制低、中、高3个浓度的样品溶液，进行含量测定，测定值与加入量比较，计算回收率。

美沙拉嗪加入量为100μg/ml，检测量（99.80±1.40）μg/ml，RSD1.40%，回收率99.80%；加入量为300μg/ml，检测量（299.55±3.64）μg/ml，RSD1.20%，回收率99.86%；加入量为500μg/ml，检测量（501.22±6.01）μg/ml，RSD1.21%，回收率100.30%；平均值为99.98%。

3.讨论

当使用高效液相色谱法测定美沙拉嗪的相关物质时，准备对检测波长，参考相关文献和根据文献报道来确保测定结果的准确性，相关物质在220nm时美沙拉嗪具有最大吸收，因此对色谱条件确定时，检测波长设定为220nm。色谱条件的选择是一项重要任务。将流动相定义为磷酸盐缓冲液-甲醇-乙腈，该流动相分离效果良好，使主峰和相邻杂质达到峰值，做出良好的区分。高效液相色谱（HPLC）的特异性较强，测定结果的准确性较高[3]。它具有良好的重现性，可广泛用于药物研究。采用高效液相色谱法（HPLC）测定美沙拉嗪的相关物质时，要做好原料的质量控制，并检测相关制剂，确保杂质含量不超过标准。在检测过程中，可以确定美沙拉嗪的物质含量，可确保药物的安全性有很大帮助，以提高药品质量和药品安全性的有效检测措施。

【参考文献】

[1]张蜀，易军，等.反相高效液相色谱法测定5—氨基水杨酸相关物质、原料含量及缓释片含量[J].中国医院药学杂志，2001，21(3):139-141.

[2]周庆颂，牛青梅，孙若飞，等.美沙拉嗪高效液相色谱分析方法的不确定度评价与比较[J].医药导报，2016，35(10):1109-1113.

[3]胡容峰，晏霆，吕凌，等.高效液相色谱法测定5-氨基水杨酸结肠溶胶囊的含量[J].中国医院药学杂志，2002,22(7):411-412.