桃江县2013年到2016年水产品霍乱弧菌污染分析

桃江县2013年到2016年水产品霍乱弧菌污染分析

杨柳青

桃江县疾病预防控制中心湖南桃江413400

【摘要】目的分析桃江县2013年到2016年水产品霍乱弧菌污染状况，为制定科学有效的防控措施提供依据。方法以桃江县水产品批发市场为霍乱弧菌监测点，于每年5月份-10月进行监测，严格按照《全国霍乱监测方案》和《湖南省霍乱监测方案》采样、送检、检验、结果鉴定等，分析监测结果。结果2013-2016年共检验样本510份，检出35株霍乱弧菌，阳性检出率为6.86%，各年份阳性检出率之间比较差异无统计学意义（P>0.05）；各类水产品中，牛蛙的霍乱弧菌检出阳性率最高，为16.67%，其次为甲鱼和鳝鱼，分别为7.37%和6.25%；检出的35株霍乱弧菌中，其中O139群霍乱弧菌19株（54.29%），O1群霍乱弧菌16株（含稻叶型15株和小川型1株），占比为45.71%，未检出其他菌型霍乱弧菌。结论桃江县2013年-2016年水产品霍乱弧菌阳性检出率较高，存在霍乱疫情风险，应继续加强水产品霍乱弧菌监测工作，及时发现传染源，进行有效防控。

【关键词】桃江县；水产品；霍乱弧菌；污染状况

【Abstract】objectivetoanalyzetaojiangcountyfrom2013to2016，vibriocholeraepollutionconditionofaquaticproducts，andtoprovideevidenceforscientificandeffectivepreventionandcontrolmeasures.methodsIntaojiangcountyaquaticproductwholesalemarketforvibriocholeraemonitoring，frommaytoOctobereachyeartomonitor，instrictaccordancewiththenationalcholeramonitoringplanandthecholeramonitoringschemeofhunanprovincesampling，inspection，testing，resultappraisal，analysisofmonitoringresults.Resultssamplesfrom510in2013-2016，35strainsofvibriocholerae，checkoutthepositivedetectionrateof6.86%，comparingdifferencesbetweenpositiverateineachyearwasnostatisticalsignificance（P>0.05）；Allkindsofaquaticproducts，bullfrogthehighestdetectionrateofvibriocholerae，at16.67%，followedbyturtleandeels，of7.37%and6.25%respectively；Among35strainsofvibriocholerae，vibriocholeraeO139group19cases（54.29%），16strainsofvibriocholeraeO1group（includinginaba15strainsandogawatype1strain），45.71%，didnotcheckoutothertypebacteriumvibriocholerae.Conclusiontaojiangcountyin2013-2013，aquaticproductsvibriocholerapositivedetectionrateishigher，theriskofacholeraepidemicshouldcontinuetostrengthenaquaticproductsvibriocholerasurveillance，discoverthesourceofinfection，effectivepreventionandcontrol.

【Keywords】taojiangcounty；Aquaticproducts；Vibriocholerae.Pollutioncondition

霍乱属于我国法定甲类传染病，是国家检疫传染病原之一，资料显示，霍乱弧菌可分为200多个血清群，在这些血清菌群中，以O1群和O139群霍乱弧菌引起的腹泻最为普遍，其不但发病急、传播速度快，而且波及面广泛且危害严重，是世界各国高度关注的菌型[1]。研究发现，多数霍乱疫情的发生与人们食用被霍乱弧菌污染的水产品密切相关。作为湖南省霍乱防治监测点，桃江县疾病预防控制中心严格遵守国家及省疾病预防控制规定进行霍乱病菌的监测，于2013年-2016年的5月-10月每月在本县最大水产品批发市场采集10-30份水产品样品检验，以了解我县水产品霍乱弧菌污染状况，现将分析结果报告如下。

1资料与方法

1.1样品采集2013年-2016年，每年5月-10月在本县水产品批发市场每月采集10-30份水产品样品，样品采集方法为肛拭子或体表涂抹法，每3个水产品拭子为一个样品，将样品浸泡在装有碱性蛋白胨水的采样管中，及时送检。其中2013年、2014年、2015年、2016年每年采集样品分别为120份，115份、130份、145份，共采集样品510份。

1.2方法

1.2.1检测仪器采用美国ABI7500核酸检测仪、上海一恒LＲH－150F生化培养箱，济南鑫贝西生物技术有限公司BSC-1100ⅡB2-X生物安全柜和山东新华医疗器械股份有限公司LMQ.C高压灭菌器。

1.2.2试剂霍乱弧菌培养试剂（批号：20100326，20130418），由海博生物技术有限公司提供，霍乱弧菌诊断血清（批号：20100201，20130416），由宁波天润生物药业有限公司生产提供，霍乱实时荧光PCＲ诊断试剂（批号：H20100501，H20130316），由上海之江生物科技有限公司提供，均确保试剂在有效期内使用。

1.2.3检测方法依据《霍乱防治手册》第六版[2]及《湖南省霍乱监测方案》进行操作，用棉签反复涂抹水产品体表后置入碱性蛋白胨水中浸泡，在37℃环境下培养6-8h，夏季气温高时将送检时间计算在内，进行第一次增菌，然后将胨水管平稳取出后，使用无菌棉拭子从菌膜下表层取菌液，然后将其置入碱性蛋白胨水，进行二次增菌，取一代、二代增菌液表层菌膜，将其接种于庆大霉素琼脂平板，分离培养。从庆大霉素琼脂平板上选择可疑菌落，玻片凝集，然后将血清凝集阳性样本接种在普通琼脂平板上，进行形态学和生化试验，符合菌株送湖南省益阳市疾控中心进行血清学鉴定和毒力基因实验，以CT值≤35判为阳性[3]。

1.2.4霍乱弧菌CT毒力基因检测CT下游引物5，－ATAAAGCAGTCAGGTGGTCT-3＇，上游引物5，-ATTTTGAGGTGTTCCATGTG-3＇。PCR上下游引物（20μM）各1μL，反应体系为50μL反应体系：10×buffer5μL，dNTP4μL。

1.3统计学处理研究数据采用SPSS20.0处理分析。计数资料用%表示，组间进行卡方检验，研究结果以P＜0.05为差异具有统计性。

2结果

2.1桃江县2013年-2016年霍乱弧菌阳性检出情况2013-2016年共检测样本510份，检出35株霍乱弧菌，阳性检出率为6.86%，各年份阳性检出率之间比较差异无统计学意义（x2=1.347，P>0.05），见表1。

2.3水产品霍乱弧菌菌型分布检出的35株霍乱弧菌中，其中O139群霍乱弧菌19株（54.29%），O1群霍乱弧菌16株（含稻叶型15株和小川型1株），占比为45.71%，未检出其他菌型霍乱弧菌。

3讨论

大量研究资料显示，近年来我国的霍乱疫情主要以食源性爆发为主，尤其是食用水产品因素居多[4]，桃江县是湖南省霍乱频发地区，为了制定科学有效的防控措施、有效防控霍乱的发生和蔓延，我们系统分析了2013年-2016年我县水产品霍乱监测资料，从监测结果来看，有如下几个特点。

我县水产品霍乱弧菌阳性检出率较高，为6.86%。这提示我县近几年水产品中霍乱弧菌带菌率处于较高水平，因此也提示本地区发生霍乱疫情的危险性较大。本监测结果还显示，各类水产品中，牛蛙的霍乱弧菌检出阳性率达16.67%，其次为甲鱼（7.37%）和鳝鱼（6.25%）。牛蛙是食用蛙中体型最大的品种，其适应能力强，很多地区都有养殖，其霍乱弧菌携带率高可能与牛蛙生长环境及饲养方法有关。因此，食用时一旦加热不彻底，易被人体吸收而致病。据研究文献提示，甲鱼引起的霍乱疫情中，绝大多数由“温水甲鱼”引发[5]，此类甲鱼养殖水温常年保持在30℃左右，易感染霍乱弧菌。此外，监测结果显示，O139群霍乱弧菌占比54.29%，其余为O1群霍乱弧菌，未检出其他菌型霍乱弧菌，这与其他文献报道基本一致。

鉴于以上分析结果，建议继续加强对水产品的常规监测，对于检出霍乱弧菌的产品，要追踪供货渠道和销售去向，有效防控霍乱疫情，同时，相关部门应加强对水产品流通市场的监管，并督促水产品养殖场进行养殖模式和方法的改善，此外，也要积极开展健康宣传教育工作，提高人们的健康意识。

综上，桃江县2013年-2016年水产品霍乱弧菌阳性检出率较高，存在霍乱疫情风险，应继续加强水产品霍乱弧菌监测工作，及时发现传染源，进行有效防控。

参考文献：

[1]谢朝梅，谢燕湘，肖慧芳，等.常德市2010年－2013年水产品中霍乱弧菌的监测分析[J].中国卫生检验杂志，2014，24（9）：1321-1322，1327.

[2]肖东楼.霍乱防治手册［M］．第6版．北京：人民卫生出版社，2013．

[3]覃迪，湛志飞，夏昕，等．2010年湖南省霍乱弧菌病原学特征及溯源分析［J］．实用预防医学，2012，19（4）：513－517．

[4]邱兴庆，吴家兵，高永军，等．一起聚餐所致O139霍乱疫情和甲鱼市场调查［J］．实用预防医学，2013，20（2）：171－173．

[5]卫生部疾病控制局.霍乱防治手册[M].第六版.北京：人民卫生出版社，2012.