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  • 简介:介绍了酶联免疫吸附法(ELISA)的基本原理和肉制品检测所面临的问题,综述了ELISA在肉制品检测中的研究进展,主要包括ELISA用于肉制品中抗生素、激素、致病菌、中枢神经系统组织、辐照食品和肉的组成的检测。更多还原

  • 标签: ELISA 肉制品 检测
  • 简介:目的国外已经有富含共轭亚油酸的食用油商品。为了使共轭亚油酸在我国得到广泛的应用,进行富含共轭亚油酸的食用油免疫调节作用的试验研究。方法按0.50、1.00、1.50g/kg.bw共轭亚油酸的剂量,采用SPF昆明种小鼠连续给予受试物一个月,与空白组进行比较。结果1)低、中、高剂量组能明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力;2)低、中剂量组能明显增强二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应;3)低、中剂量组能明显升高小鼠血清溶血素含量;4)低、中剂量组能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能;5)低、中剂量组能明显增强小鼠碳廓清能力;6)低、中剂量组能明显增强抗体生成细胞能力;7)低、中剂量组能明显增强小鼠NK细胞活性。结论富含共轭亚油酸的食用油具有显著的免疫调节作用。

  • 标签: 共轭亚油酸 食用油 免疫调节 试验研究
  • 简介:目的用免疫分析法检测水产品中无色孔雀石绿残留,研究无色孔雀石绿人工抗原的制备及其鉴定。方法用混酸法对无色孔雀石绿进行衍生化,连接上氨基基团,再经重氮化法与载体蛋白相结合,制备人工抗原。结果对无色孔雀石绿中间合成产物的液质联用分析结果表明,氨基产物中,无色孔雀石绿占51.83%,单氨基加成的无色孔雀石绿产物占40.48%,二氨基加成的无色孔雀石绿产物占7.69%。采用紫外法和Bradford法测定,人工抗原中无色孔雀石绿与载体蛋白的结合比为18∶1~23∶1。结论合成的人工抗原属于高质量的人工抗原。

  • 标签: 无色孔雀石绿 烷烃类 抗原 疫苗 合成
  • 简介:将去氢甲睾酮多克隆抗体同CNBr-Sepharose4B进行偶联,制成了对去氢甲睾酮具有特异性吸附的免疫亲和柱(IAC),优化了免疫亲和柱的制备和使用条件;同时用间接竞争ELISA(icELISA)和高效液相色谱法(HPLC)对该免疫亲和柱的性能进行评价。结果表明:CNBr-Sepharose4B偶联抗体的最佳反应时间为2.5h,抗体最佳初始质量浓度为0.5mg/mL;IAC的柱容量约为1700ngDMT/g干胶;最适洗脱条件为80%的甲醇-水溶液,平均加标回收率为97.87%。该亲和柱重复使用3次,回收率仍不低于90%。

  • 标签: 免疫亲和柱 去氢甲睾酮 间接竞争ELISA HPLC
  • 简介:随着生活水平的不断提高,人们越来越重视膳食与人体健康的关系.一种"用中药添加饲料的方法获取金属硫蛋白等多种功能营养牛奶、鸡蛋的新技术"将赋予食品更多的新功能.

  • 标签: 金属硫蛋白 免疫力 保健功能 饲料添加剂 牛奶 鸡蛋
  • 简介:当用某种抗原免疫产蛋母鸡时,鸡可产生相应的多克隆抗体─—免疫球蛋白,并被运送和储存于鸡卵的卵黄中,此种免疫球蛋白称为IgY(ImmumoglobulinofYolk)。一只母鸡一经免疫应答后,即可从其不断生产的鸡卵的卵黄中获得大量的、均一的、高效价的IgY,而且lgY有许多独到的优点,具有许多潜在的应用价值,可代替由免疫小鼠、兔等哺乳动物制备的抗体。因而近年来,国外对IgY的研究应用十分活跃,特别是将IgY作为食品的免疫型强化剂的应用研究正在不断开展,前景非常广阔。一、IgY的特点:1.IgY类似于哺乳动物的igY.分子量为180lH>,其重链有四个稳定区,没有铰链区,而哺乳动物lgG的重键只

  • 标签: 食品添加剂 鸡卵黄免疫球蛋白 IGY 免疫型强化剂 应用
  • 简介:在碱性条件下,降解青霉素G并与6-氨基己酸反应,首次成功合成了纯度较高的半抗原。采用活化酯法与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联,成功制备了具有青霉素G结构特征的人工抗原。通过免疫获得了高效价、高特异性的多克隆抗体,抗血清效价达1∶240000。绘制了青霉素G酶联免疫直接竞争法的标准曲线,检测限可达0.04μg/L,灵敏度0.37μg/L。

  • 标签: 青霉素G 人工抗原 酶联免疫
  • 简介:目的评价转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规、血生化及免疫指标的影响。方法以转sFat-1基因猪肉、普通猪肉为受试物,配成配合饲料后分别设立低、高2个剂量组和基础饲料对照组,经口喂饲小鼠30天后,比较各组小鼠血常规、血生化、免疫球蛋白和外周血T淋巴细胞比例。结果同性别的各组血常规和免疫球蛋白指标差异均无统计学意义;转sFat-1基因猪肉高剂量组血清BUN浓度与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05);雌性小鼠中,转sFat-1基因猪肉低剂量组的CD3+CD4+细胞比例、转sFat-1基因猪肉高剂量组的CD3+CD8+细胞比例与普通猪肉低剂量组相应指标比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论在本研究的剂量下,未发现转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规、血生化和免疫指标有影响。

  • 标签: 免疫球蛋白 转sFat-1基因猪肉 淋巴细胞 血常规 血生化 EPA
  • 简介:以远缘链球菌(S.sorbrinus6715血清型g)免疫产卵母鸡,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定鸡卵黄中免疫球蛋白(ImmunoglobulinofYolk,lgY)的活性,研究鸡免疫应答并制备出高免抗-S.sorbrinuslgY。结果显示出10^9cfu/只剂量免疫的母鸡,第一次免疫后的第七天卵黄中出现特异性lgY,加强免设后抗体效价上升更快,经ELISA法检测,卵黄中的抗体效价到1:384。而冷冻干燥后的lgY,其效价要超过1:2000。

  • 标签: 活性检测 变链球菌 鸡卵黄免疫球蛋白 ELISA 鸡蛋 鸡免疫应答
  • 简介:目的:制备用于特异性分离阪崎肠杆菌的免疫磁性壳聚糖微球以及对阪崎肠杆菌的捕获效果。方法:采用反向悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球.并对微球的表面进行氨基化修饰。然后与阪崎肠杆菌多克隆抗体进行偶联,制备免疫磁性壳聚糖微球。优化磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联条件,包括偶联时间、磁性壳聚糖微球用量、偶联体系pH,对抗体的饱和偶联量。通过与显色培养基结合的方法研究免疫磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌的捕获能力。结果:制备的磁性壳聚糖微球通过表面修饰能连接上大量的活性氨基。在pH7.4的偶联体系中,10.0min即可完成对阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联,0.01g磁性壳聚糖微球对抗体的饱和偶联量为25~50μL。当阪崎肠杆菌浓度较低时,制备的免疫磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌的捕获率达94.7%,对阪崎肠杆菌的灵敏度为5cfu/mL。结论:获得阪崎肠杆菌免疫磁性壳聚糖微球,该微球是一种非常有潜力的快速富集、分离阪崎肠杆菌的有效方法。

  • 标签: 壳聚糖 免疫磁性微球 阪崎肠杆菌 分离
  • 简介:研究了单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮的方法.样品通过乙腈-水(体积比9∶1)提取,提取液用免疫亲和柱净化,WatersC18色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量.对添加不同含量的玉米赤霉烯酮进行6次重复实验,平均回收率为87.8%~90.9%,变异系数(CV)为8.6%~11.3%,检测低限为0.01mg/kg.

  • 标签: 单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法 测定 玉米 玉米赤霉烯酮 毒素
  • 简介:目的采用免疫亲和柱净化鱼肉和肝脏中的河鲀毒素,建立高效液相色谱-三重四级杆质谱串联(LC-MS/MS)方法检测鱼肉和肝脏中的河鲀毒素,为水产品中的河鲀毒素检测提供方法依据。方法选用Zic-Hilic色谱柱(150mm×2.1mm,5μm),以10mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离。样品用1%乙酸-甲醇沉淀蛋白提取,上清液加入PBS缓冲液后经免疫亲和柱净化,将洗脱液氮吹至干定容后上机测定。多重反应监测(MRM)方式检测。结果河鲀毒素的线性范围为1.0~1000.0ng/ml,鱼肉和肝脏中河鲀毒素的检出限分别为0.3和0.2μg/kg,回收率在52.4%~72.6%之间。结论本方法特异性强、提取效果好、无基质抑制效应,适用于鱼肉和肝脏中河鲀毒素的痕量检测。

  • 标签: 河鲀毒素 肝脏 免疫亲和柱 液相色谱-串联质谱法 基质效应
  • 简介:探究纳豆菌制剂(BNPr)对SPF小鼠免疫功能及其细胞因子分泌的影响。选取体质健康小鼠128只,随机分为8组:空白对照组C,调节组R共4组,预防组P共2组,模型组M。灌胃30d后测定免疫指标及其细胞因子分泌变化情况。结果表明:与模型组相比,BNPr调节组脾脏和胸腺指数极显著升高(P〈0.01),iNOS活力和小鼠血清中的白蛋白、球蛋白和白球比的值极显著上升(P〈0.01),BNPr调节组极显著增加血清中IL-2,IL-10,TNF-α,IFN-γ的分泌量(P〈0.01)。试验组的小鼠血清溶血素水平较对照组极显著升高(P〈0.01)。BNPr显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用(P〈0.05)。与空白对照组比较,BNPr预防组的脾脏指数与正常水平无显著差异(P〉0.05)。随着制剂的浓度的升高,吞噬百分率和吞噬指数都不断升高。高剂量BNPr调节组显著增加了IL-2的释放(P〈0.05),中剂量BNPr调节组能调节TNF-α水平至正常水平。中剂量BNPr预防组IL-10的分泌量极显著减少(P〈0.01),白蛋白和球蛋白的含量升高。结论:BNPr具有免疫增强作用和调节细胞因子分泌的作用。

  • 标签: 纳豆菌制剂 抗生素 免疫调节作用
  • 简介:建立免疫磁珠分离(ImmunomagneticSeparation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(PolymeraseChainReaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(InternalTranscribedSpacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(InternalAmplificationControl,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg,孵育30min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cyclethreshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3CFU/mL,可在3h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。

  • 标签: 免疫磁珠 荧光定量PCR 内参 阪崎肠杆菌 快速检测