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  • 简介:ThegenomeoftheenterohemorrhagicEscherichiacoliO157:H7EDL933contains177“O”-islands(OIs).TostudytheirpotentialcontributiontotheO157-specificpathogenicity,wesurveyedthedistributionof22OIsbyPCRandDNAhybridizationin17isolatesofShigatoxinproducing(Stx-positive)E.coliO157:H7,andcomparedwiththeirdistributionin21isolatesofStx-negativeE.coliO157and21isolatesofnon-O157entericpathogens.Fourteenof22OIswerepresentinnon-O157entericpathogensanalyzed.Eightof22OIswerefoundonlyinthe17Shigatoxin-(Stx)positiveE.coliO157:H7isolates,buttheywereabsentfromthe21Stx-negativeE.coliO157:NMandO157Hundisolatestested.Amongthe8OIs,onlyOI43orOI48wereexclusivelydetectedinStx-positiveE.coliO157:H7,absentfromneitherofStx-negativeE.coliO157andnon-O157entericpathogens,suchasSalmonella,ShigeUa,Citrobacter,Vibriocholera,enteropathogen-icE.coli(EPEC),enteroadherentE.coli(EAEC),enteroinvasiveE.coli(E1EC)andenterotoxingenicE.coli(ETEC).TheOI43andOI48are83kbinsizeandidenticalinDNAsequences,whichencodegenesforurease,telluriteresistanceandadherence.ByanalyzingtheirjunctiongeneswithPCRandDNAhybridization,wefoundthat21ChineseisolateshaveOI48only.However,for7Japanesepatientisolates,4haveOI43and3haveOI48;forAmericanisolates,2havebothofO143andOI48,2haveOI48only.ThesedataconfirmedthehighlyplasticityofthepathogenicE.coligenome.TheuniquepresenceofOI43/OI48inStx-positiveE.coli0157:H7denotesitscriticalroleinthepathogenicityspecifictothispathogen.

  • 标签: O-岛 埃希氏菌属 大肠菌O157 肠病原体 E.大肠菌 O157:H7
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  • 简介:肠出血性大肠杆菌是80年代初Rileg等发现的一种新的病原菌。目前已发现此菌株50多个血清型,其中90%以上为O157,这些菌株均产生对Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)有毒性作用的细胞毒素。除引起人类腹泻外并常导致3种严重并发症:(1)肠出血性结肠炎(HC);(2)溶血性尿毒综合征(HUS);(3)血栓形成血小板减少性紫癫(TTP)。为了摸清我国肠出血性

  • 标签: 肠出血性大肠杆菌O157:H7 溶血性尿毒综合征 HUS 血小板减少性 严重并发症 Vero细胞
  • 简介:目的:利用Red系统构建肠出血性大肠杆菌O157H7的sRNA基因E40缺失突变株。方法:选取本实验室预测并经过实验验证的sRNA基因,根据NCBI上相应的序列,设计2对引物分别扩增该sRNA基因的上下游分别长464和455bp的同源臂,经PCR扩增,构建到相应的载体,最后以构建好的含上下游同源臂和卡那霉素抗性基因的长约2500bp的线性片段作为打靶片段,在Red重组系统的作用下与sRNA基因E40的上下游同源区域发生同组,从而把sRNA基因从基因组上置换下来,之后利用质粒pCP20将FRT位点间的卡那霉素抗性基因消除。结果与结论:构建了出血性大肠杆菌O157H7的sRNA基因E40的缺失突变株,为进一步研究sRNA基因在出血性大肠杆菌O157H7生长及致病过程中所起的功能奠定了良好的基础。

  • 标签: 肠出血性大肠杆菌O157:H7 SRNA RED重组系统
  • 简介:目的初步调查湖南省长沙市岳麓地区不同乡镇大肠埃希菌O157H7宿主动物带菌情况,为制定防治措施提供科学依据。方法于2010年11月采集长沙市岳麓区境内散养的鸡、鸭、猪、牛等家畜家禽粪便标本33份,按国标常规培养法检测大肠埃希菌O157H7,并对数据进行统计分析。结果33份标本中共检出阳性标本4份,总阳性率为12.1%(4/33),其中散养的鸡的粪便中大肠埃希菌O157H7阳性检出率为13.6%(3/22);在4份散养的鸭子粪便中,检出1份阳性。结论长沙市岳麓地区已存在大肠埃希菌O157H7感染,应引起足够重视。

  • 标签: 肠出血性大肠杆菌 粪便 数据收集 宿主动物
  • 简介:ToconstructandexpressthefusionproteinStx2B-IntiminC300ofEHEC0157:H7,andtofurtherinvestigateitsimmunoprophyiacticpotential,thegeneofStx2B(stx2b)fromEHEC0157:H7chromosomewasclonedintopMD18-Tvector.Thereafter,theamplifiedgenewasclonedintoprokaryoticexpressionplasmidpET-28a(+)-eaeC300,whichwasconstructedpreviously.TherecombinantpasmidpET-28a(+)-stx2b-eaeC300wastransformedintoE.coliBL21(DE3).Afterinducement,theproteinStx2B-IntiminC300wassuccessfullyexpressedandanalyzedwithsodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis(SDS-PAGE),WesternblottingandN-terminalaminoacidresidualsequencing.Toevaluateitsimmunoprophyiacticpotential,itwasprimarilypurifiedbyion-exchangechromatographyandinjectedinto30BALB/cmicewithAl(OH)3inthesubscapularregion.Tendaysafterthelastboostervaccination,20micewereattackedwithEHEC0157:H7lysateandtheprotectiveefficacywasobserved.Inthepresentstudy,thegeneofStx2B-IntiminC300wassuccessfullyclonedintopET-28a(+)vector.TheresultsofSDS-PAGEandWesternblottingassayshowedthatthefusionproteinwassuccessfullyexpressedintheinclusionbodyform,accountingfor25%oftotalexpressionproducts,anditsmolecularweightwasabout43kDa.TheresultoftheN-terminalaminoacidresidualsequencingshowedthatitwasidenticaltothatofthemoleculardesigned.Thepuritywasabout75%afterprimarypurification.AnimaltestsrevealedthatthefusionproteinStx2B-IntiminC300haselicitedhightiterofprotectiveantibodyrelatively.TheseresultsdemonstratethatthefusionproteinStx2B-IntiminC300issuccessfullyexpressedinprokaryoticexpressionsystemandshowscertainimmunoprophyiacticpotential.

  • 标签: 疫苗 免疫机制 蛋白质 原核表达
  • 简介:应用压电免疫传感器快速检测了大肠杆菌O157H7(E.coliO157H7).将巯基乙酸(MACA)自组装在AT切向的压电金电极上,以N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)为反应介质,形成酰氨键固定大肠杆菌抗体.并通过α-甲基丙烯酸(MAA)把抗体修饰在纳米磁球上.采用夹心法将抗原夹在两个抗体间,压电石英晶体交流阻抗(PQCI)和循环伏安法对修饰过程进行了表征,抗原浓度与形成夹心复合物前后的PQCI振动频移相关.其免疲传感器能在3h内检测2×10^3~8×10^8CFU/mL范围内的目标细菌,10^6CFU/mL情况下重复性实验的RSD在7%以下。

  • 标签: 大肠杆菌 夹心免疫传感器 压电石英晶体阻抗 自组装膜
  • 简介:摘要肠出血大肠杆菌O157H7作为一种新型病原菌,这是当前世界上食源性疾病的重要诱因,由其所引发的各种感染问题,严重威胁着人类的生命健康,并且还会引发各种并发症。那么在这样的背景下,从分子生物学的角度出发,对肠出血大肠杆菌O157H7进行相应的检测调查,能够为肠出血大肠杆菌O157H7疾病的预防和诊断提供有效的支撑杆。因此本文就对肠出血大肠杆菌O157H7的分子生物学检测方法研究进展进行有效的分析和探究。

  • 标签: 肠出血大肠杆菌O157H7 分子生物学 检测方法
  • 简介:目的用Vero、HeLa、CHO及KMB17,细胞测定EHECO157:H7首例浙江株97-1-68菌株的细胞毒性,同时与其他菌株作比较。方法采用微量组织培养板的单层细胞培养测定菌体超声裂解液及细菌培养上清液的细胞毒性作用效价。结果77-1-68菌株对全部4株细胞均无细胞毒性作用,而阳性对照株对Vero、HeLa细胞具有较强的细胞毒性作用。结论本文提出在EHECO9157):H7感染中可能存在流行株和非流行株的"两类菌株"的观点。

  • 标签: EHEC O157:H7 细胞毒性 志贺样毒素
  • 简介:O157是大肠杆菌中一个较为罕见的具有致病能力的血清型。大肠杆菌O157能引起腹泻、出血性肠炎、血小板减少性紫癜以及溶血性尿毒症等。其中溶血性尿毒症治疗较困难,死亡率高达30%以上。1982年美国发生了全世界第一起由O157引起的出血性肠炎的暴发流行,41人患病,人类第一次认识到了O157的致病性。

  • 标签: 卫生检疫 O157 传入 大肠杆菌 流行病学 腹泻
  • 简介:中国一汽红旗H7是自上世纪80年代以来的第一款D级高级轿车,红旗H7外形设计十分大气,红旗车标和大尺寸直瀑镀铬格栅营造一种商务、尊贵的感觉。车身尺寸长宽高分别为5095/1875/1485mm,轴距为2970mm。定位于商务型中大型车。悬挂则采用双又臂式独立前悬架和多连杆独立后悬架结构、前置后驱的驱动模式。

  • 标签: 中国一汽 红旗 高级轿车 外形设计 车身尺寸 悬架结构
  • 简介:去掉"4"这个不吉利的数字,再去掉已经停产的"3"系车型,H7的到来让哈弗系列车型终于圆满了,从H1到H9,集齐了从小型SUV到中大型SUV共7款车型,这是召唤神龙的节奏啊!晗弗系列也终于可以拍一张全家福了!在哈弗H7到来之前,从H6到H8确实有点跳跃式的发展,一个始终占据着15万元以下SUV市场的霸主地位,另一个则是自主品牌首款直接冲上20万元以上价格区间的SUV车型。

  • 标签: HAVAL H7 首款 跳跃式 兰达 定速巡航
  • 简介:目的了解我国食品中分离的110株大肠埃希菌O157的耐药及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型特征,完善我国食品中大肠埃希菌O157菌株特征的基础信息,为该菌的风险评估提供依据。方法使用琼脂稀释法对确认的110株大肠埃希菌O157进行药敏试验,完成耐药特征的分析。参照美国疾病预防控制中心PulseNet试验方法,对110株大肠埃希菌O157,运用XbaⅠ酶进行酶切并完成PFGE分析,利用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析。结果1110株菌中,43株菌至少对一种抗生素有抗性。耐药率最多的前三种抗生素依次是四环素(30.0%,33/110),磺胺甲恶唑(29.1%,32/110),萘啶酸(26.4%,29/110);2一共有24个耐药谱,耐两种以上抗生素的菌株有34株,耐3种以上抗生素的多重耐药菌株有32株。最常见的三种耐药谱依次是SMX(6),AMP-NAL-SMX-SXT-TET(6),AMP-CHL-NAL-SMX-SXT-TET(4)/AMP-SMX-SXT-TET(4)/TET(4);3大肠埃希菌O157H7O157∶hund)对所测试的抗生素的耐药率明显高于大肠埃希菌O157H7(χ2=72.010P〈0.05)。其中37株携带了志贺毒素基因的大肠埃希菌O157H7仅对磺胺甲恶唑(2.7%,1/37)、萘碇酸(2.7%,1/37)有耐药,没有多重耐药菌株;4通过不同种类食品中大肠埃希菌O157菌株耐药率比较发现,从生猪肉、生禽肉中分离的菌株耐药率相对高于其他食品种类;5PFGE分子分型研究显示菌株具有基因多态性,且可以很好将大肠埃希菌O157H7和大肠埃希菌O157H7菌株区分开。结论我国食品中分离的大肠埃希菌O157耐药现象严重。我们应加强养殖环节和零售环节食源性致病菌,特别是大肠埃希菌O157(包括产志贺毒素大肠埃希菌O157)菌株药敏特征的监测,探明食品与养殖环节菌株耐药的传播关系,并为国家制定科学的养殖业抗生素用药提供依据。

  • 标签: 大肠埃希菌O157 药敏试验 脉冲场凝胶电泳 耐药 分子分型
  • 简介:AbstractWe conducted environmental surveillance to detect avian influenza viruses circulating at live poultry markets (LPMs) and poultry farms in Guangxi Autonomous Region, China, where near the China-Vietnam border. From November through April 2017-2018 and 2018-2019, we collected environmental samples from 14 LPMs, 4 poultry farms, and 5 households with backyard poultry in two counties of Guangxi and tested for avian influenza A, H5, H7, and H9 by real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (rRT-PCR). In addition, we conducted four cross-sectional questionnaire surveys among stall owners on biosecurity practices in LPMs of two study sites. Among 16,713 environmental specimens collected and tested, the median weekly positive rate for avian influenza A was 53.6% (range = 33.5% - 66.0%), including 25.2% for H9, 4.9% for H5, and 21.2% for other avian influenza viruses A subtypes, whereas a total of two H7 positive samples were detected. Among the 189 LPM stalls investigated, most stall owners (73.0%) sold chickens and ducks. Therefore, continued surveillance of the avian influenza virus is necessary for detecting and responding to emerging trends in avian influenza virus epidemiology.

  • 标签: Avian influenza virus Environmental surveillance Live-poultry-market
  • 简介:目的调查一起食物中毒事件,分离并鉴定其致病微生物是否为大肠埃希菌O157。方法根据患者临床表现和标本种类,按照临床微生物检验法规,利用小型全自动荧光酶免疫分析仪(mini-VIDAS)、全自动细菌鉴定药敏分析系统、全自动微生物鉴定仪(VITEK32),分别进行初筛和系统生化与药敏鉴定,并结合血清学试验作出最终鉴定。结果该起食物中毒的病原微生物被mini-VIDAS初筛为大肠埃希菌O157阳性菌株,后经系统鉴定为产毒型大肠埃希菌O8:K40,K47血清型。9份标本中有6份检出产毒型大肠埃希菌O8:K40,K47血清型,检出率为66.7%(6/9),其中食品1份,呕吐物3份,肛拭2份,所有标本均未检出金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、志贺菌、沙门菌及其他致泻性大肠埃希菌。结论该起食物中毒由产毒型大肠埃希菌O8:K40,K47血清型引起。产毒型大肠埃希菌(O8:K40,K47血清型)标本经mini-VIDAS初筛可以产生假阳性结果,需进一步确证。

  • 标签: 产毒型大肠埃希菌 血清学试验
  • 简介:一汽集团积极响应国家战略和法规要求,成功获批工信部新能源车开发项目,重点研发推广离合器耦合式电机总成(CCM)。离合器耦合式电机总成为“P2”构型,该构型技术门槛高、开发难度大,离合器耦合式电机总成集成双质量飞轮、分离离合器和驱动电机,集成化程度高,结构紧凑,其中双质量飞轮和分离离合器为二次开发,驱动电机总成为自主开发。CCM已成功搭载红旗H7PHEV车型,并于2016年投放市场,市场反馈良好。

  • 标签: 新能源车 P2构型 离合器耦合式电机总成(CCM) PHEV
  • 简介:报道了H5[H3AsMo7V5O40].9.5H2O的合成和元素分析、电位滴定、差热、红外光谱及紫外光谱等表征。并通过与H3+n[AsMo12-nVnO40].mH2O(n-1~4)系列的比较,对标题化合物的结构进行了确认。

  • 标签: 砷钼钒 杂多酸 KEGGIN结构