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8 个结果
  • 简介:Nanogproteinisexpressedintheinteriorcellsofcompactedmorulaeandmaintainedtillepiblastsbutdownregulatedbyimplantationstage.Itisalsoexpressedinembryonicstemcells,embryoniccarcinomacellsandembryonicgermcellsbutdisappearedindifferentiatedEScells.Inthisstudy,wehaveisolated,sequenced,andperformedthefirstcharacterizationoftheNanogpromoter.Thetranscriptionstartsitesweremappedbyprimerextensionanalysis.TwopromoterregionswerefoundupstreamthetranscriptionstartsitesandtheexpressionofmajorNanogpromoter/reportergeneconstructisabolishedindifferentiatedF9ECcellsascomparedtotheundifferentiatedcounterpart.Wealsoshowedthataputativeoctamermotif(ATGCAAAA)isnecessaryforthemajorpromoteractivity.GelshiftandsupershiftassaysshowedthatOct-1,Oct-4andOct-6proteinselectivelybindtotheoctamermotif.

  • 标签: 鼠科动物 NANOG基因 启动子 分离 F9 EC细胞
  • 简介:象LIF,BMP和Wnt那样的几个外来的信号能支持胚胎的茎(ES)的theself更新和pluripotency通过调整的房间“pluripotentgenes。“一个唯一的homeobox抄写因素,Nanog,是这些信号的关键下游的受动器之一。Nanog的提高的水平能维持老鼠ES细胞自强独立人士ofLIF并且没有喂入器饲料分送器细胞,启用人的ES细胞生长。除了外部信号,小径,象FoxD3那样的内在的抄写因素,P53和Oct4也涉及调整Nanog的表示。机能上地,Nanog和象Oct4和Sox2那样的另外的关键pluripotentfactors工作控制在EScellpluripotency有重要函数的一套目标基因。这些关键因素形成一个规章的网络支持或限制对方“sexpression铺平房间,它维持ES的性质。

  • 标签: 胚胎 干细胞 人体细胞学 多能基因
  • 简介:在哺乳动物的胚胎,内部房间团(ICM)的分离和trophectoderm(TE)的第一种房间命运选择,,被抄写因素,Oct4和Cdx2的互相对抗的效果调整pluripotency因素,Nanog,是必要的指定epiblast。我们分析了Nanog和Cdx2的倡导者,并且发现了这二个抄写因素同样相互地被调整。用有有条件的TE区别的一根胚胎的干细胞线,我们证明Nanogoverexpression压制TE标记的upregulation,当时Nanog击倒的upregulatesTE标记的表示。我们推进Nanog和Cdx2绑在并且镇压的表演对方的倡导者。而Nanog大美人在ICM导致可检测的Cdx2表示,我们不管多么不观察胚囊开发的公开混乱,显示Nanog起到在ICM和TE的分离的Oct4的一个谄媚的作用。

  • 标签: NANOG 哺乳动物胚胎 调控 转录因子 ICM 内细胞团
  • 简介:摘要:Nanog蛋白能够维持胚胎干细胞的自我更新与多能性,是关键的转录因子。目前Nanog蛋白的体外生产形式主要通过微生物进行异源表达,为了能够高效制备可溶性的人源Nanog蛋白,降低Nanog蛋白的应用成本,本研究通过分子克隆技术构建重组大肠杆菌,通过IPTG诱导来进行可溶性的融合表达。

  • 标签: Nanog 原核表达 蛋白质纯化 发酵优化
  • 简介:目的:探讨过表达多能相关转录因子Nanog对人牙髓细胞增殖及多向分化能力的影响。方法构建过表达Nanog的慢病毒载体质粒pSIN-EF2-Nanog-IRES-GFP-puro,采用psPAX和pMD2.G慢病毒包装系统转入293T细胞进行病毒液的生产和收取,转染生长良好的第3代人牙髓细胞,构建稳定过表达Nanog的人牙髓细胞株,以空载体转染的细胞为对照组,对细胞进行成脂及成牙本质诱导。采用BrdU法检测细胞的增殖情况,检测多能性转录因子Oct4和Sox2的表达,以及细胞成脂、成牙本质分化能力。采用单因素方差分析数据。结果成功构建Nanog过表达的人牙髓细胞株;BrdU法检测结果显示,Nanog过表达组比对照组细胞增殖能力强(F=90.421,P=0.000)。过表达组Oct4、Sox2mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组(FOct4mRNA=71.649,POct4mRNA=0.000;FSox2mRNA=106.278,PSox2mRNA=0.000;FOct4蛋白=41.632,POct4蛋白=0.002;FSox2蛋白=38.962,PSox2蛋白=0.002)。在矿化诱导条件下,Nanog过表达组DSPP、DMP1和OCN表达量、矿化结节产生量高于对照组(FDSPP=15.261,PDSPP<0.05;FDMP1=16.235,PDMP1<0.05;FOCN=17.019,POCN<0.05);成脂诱导21d后,Nanog过表达组LPL和PPARγ2表达量及脂质产生高于对照组(FLPL=15.542,PLPL<0.05;FPPARγ2=10.437,PPPARγ2<0.05)。结论过表达Nanog能提高人牙髓细胞增殖能力,促进多能性转录因子Oct4、Sox2的表达,增强细胞多向分化能力。

  • 标签: 牙髓细胞 NANOG 细胞增殖 多向分化能力 多能相关转录因子
  • 简介:目的探讨LGR5、Nanog基因在结肠腺癌组织中的表达及其临床意义。方法收集2011年10月至2014年6月航空总医院132例结肠腺癌、60例结肠腺瘤、72例因其他良性病而行结肠切除患者为研究对象。采用免疫组织化学法、Westernblotting法检测结肠腺癌及腺瘤组织中LGR5、Nanog的表达,记录患者临床病理参数并随访。结果①LGR5主要定位于细胞质,在细胞膜也有少量表达,Nanog则主要定位于细胞核。LGR5在正常组织、结肠腺瘤、结肠腺癌组织中的阳性率分别为16.7%、26.7%、63.6%。Nanog的阳性率分别为19.4%、33.3%、71.2%。LGR5、Nanog在结肠腺癌组织中的阳性率高于结肠腺瘤及正常结肠组织(P<0.05),但在结肠腺瘤与正常结肠组织之间表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。②WesternBlot检测结果显示,以β-actin为内参蛋白,LGR5、Nanog在结肠腺癌组织的表达高于正常结肠组织、结肠腺瘤组织(均P<0.05)。③单因素方差分析显示:结肠腺癌患者Dukes分期、分化程度、淋巴结转移是LGR5、Nanog表达的影响因素(P<0.05);多因素方差分析显示:结肠腺癌患者Dukes分期、分化程度、淋巴结转移是LGR5、Nanog表达的独立危险因素(P<0.05)。④随访时间截至2018年5月,中位随访时间56个月,Log-rank检验示LGR5(-)组患者生存率高于LGR5(+)组(χ^2=4.603,P=0.031),Nanog(-)组患者生存率高于Nanog(+)组(χ^2=13.870,P<0.001)。结论LGR5、Nanog可作为判断患者预后的潜在因子,未来可针对结肠腺癌中高表达LGR5、Nanog等具有干细胞特性的肿瘤细胞进行靶向治疗,提高疗效、降低复发率。

  • 标签: 结肠腺癌 结肠腺瘤 免疫组化 生存率 肿瘤干细胞 肿瘤标志物
  • 简介:目的探讨Nanog、Sox2、TFF3在肠型胃癌中的表达及其与肠型胃癌预后的关系。方法回顾性分析60例肠型胃癌患者的临床资料,应用免疫组化法检测Nanog、Sox2、TFF3在肠型胃癌患者中的表达情况,分析其表达情况与患者临床病理特征及预后的关系。结果60例肠型胃癌患者中,Nanog高表达者38例(63.3%)、TFF3高表达者33例(55.0%),Sox2低表达者35例(58.3%)。单因素分析结果显示,Nanog、TFF3、Sox2的表达情况与肠型胃癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及TNM分期有关(P﹤0.05),与肠型胃癌患者的年龄、性别、肿瘤部位无关(P﹥0.05)。多因素分析结果显示,Nanog、Sox2、TFF3的表达情况与肠型胃癌患者的无病生存期和总生存期有关,同时具有Nanog高表达、TFF3高表达、Sox2低表达的肠型胃癌患者预后最差。结论Nanog、Sox2、TFF3可成为评价肠型胃癌患者预后的生物标志物,联合检测更利于判断肠型胃癌患者的预后。

  • 标签: 肠型胃癌 NANOG SOX2 TFF3
  • 简介:目的探讨维吾尔族和汉族子宫颈癌(CC)患者中肿瘤干细胞相关基因POU5F1和NANOG在mRNA水平表达的差异及其与临床病理的关系。方法采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR),检测69例子宫颈癌组织和16例子宫颈癌组织及其相应的癌旁新鲜组织标本中POUSFl、NANOG在mRNA水平上的表达情况,了解其在维吾尔族和汉族问的表达差异。根据患者临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移进行分组,比较不同亚组患者中维吾尔族和汉族患者间POU5F1、NANDG表达水平的差异性。结果子宫颈癌组织中POU5F1mRNA、NANOGmRNA的表达水平均较癌旁组织高(P〈0.05)。维吾尔族CC患者POU3F1mRNA、NANOGmRNA表达水平均高于汉族CC患者(P〈O.05)。临床分期为Ⅱa-Ⅲ期、淋巴结转移阴性时,维吾尔族与汉族CC患者子宫颈癌组织中POUSFlmRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P〈0.05):临床分期为IIa~III期、中.高分化、淋巴结转移阴性时,维吾尔族与汉族CC患者子宫颈癌组织中NANOGmRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P〈O.05)。结论CC中肿瘤干细胞相关基因POU5F1mRNA和NANOGmRNA的表达在维吾尔族和汉族人群中存在差异性,而此种差异性在Ⅱa~Ⅲ期、中高分化、淋巴结转移阴性的CC中表现更加明显。

  • 标签: 子宫颈癌 肿瘤相关干细胞 P0USF1基因 NANOG基因