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  • 简介:1前言蛋白组学研究是目前生命科学研究领域中的一大热点,蛋白组学研究中的关键技术之一是如何得到准确的多肽指纹谱图,以保证蛋白质的准确定性.基于方便、快速、简捷的要求,基体辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)技术是目前分析多肽指纹谱图中最常用的方法.

  • 标签: 蛋白组学 MALDI-TOF 基体辅助激光解吸电离 飞行时间质谱 多肽指纹谱图
  • 简介:MALDI-TOF质谱是分子生物学领域中最有效的工具之一。它可以用来表征相对分子质量范围在400~350000的生物分子,例如蛋白质、肽、寡糖和寡核苷酸。样品按照本文的方法进行认真处理后,可以获得很高的检测灵敏度。

  • 标签: MALDI-TOF 干燥 浓度 控制 应用 生物分子
  • 简介:摘要 : 目的:以 MALDI- TOF MS 为代表的蛋白质谱技术在微生物检验和科研中的应用 分析 。方法:文献检索及实际应用分析。结果:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI- TOF MS) 是一种软电离质谱,适用于分析蛋白质等生物大分子物质,可用来绘制微生物的蛋白质图谱,最终可达到鉴定目的。基于 MALDI-TOF MS 的蛋白质谱技术具有快速、准确、敏感性高、高通量等特点,目前已应用于细菌和真菌的鉴定,结论: MALDI-TOF MS 在微生物分型、耐药性分析等领域的应用初有成效,具有很大的应用发展空间。

  • 标签: 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 临床微生物 检验
  • 简介:在这份报纸,CD衍生物的三种不同类型作为原子转移激进分子聚合(ATRP)被综合开始者或可逆增加破碎链转移聚合(木排)链转移。为每衍生物的替换的度小心地被描绘通过<啜class=“a-plus-plus”>1H-NMR,<啜class=“a-plus-plus”>13C-NMR光谱学和飞行团spectrometry(MALDI-TOF-MS)的帮助矩阵的激光解吸附作用/电离时间。影响替换的度的因素被讨论。而且,在ATRP和木排之间的比较在N-isopropylacrylamide(NIPAM)的聚合被显示出。

  • 标签: MALDI-TOF-MS RAFT ATRP 链转移 原子转移自由基聚合 合成
  • 简介:摘要:目的:探讨是否可能利用MALDI-TOF MS质谱技术,帮助识别肿瘤患者中的ABO困难血型,以有效预防疾病引起的干扰。该方法采用血清蛋白法和PCR-SSP链反应法,这是一种基因测序技术,用于鉴别20例与ABO血型正反定型观念不符的肿瘤患者(其中10例为血液系统恶性肿瘤患者);还对这些患者的输血影响进行了回顾性分析。结果,这一组肿瘤患者中25%(5/20)的困难血型样本显示抗原a和/或b减弱,分别有两个MDS病例、一个前列腺癌病例和两个AL病例;45%(9/20)A或b抗体减弱,最初有4例MM、1例WM、1例AGL、1例肝癌、1例右结肠癌和1例食道癌;ABO子类型为30%(6/20):1 bel 09/02.1b(a)04/o2.1b(a)02/b.2 bel 03/o;一个例子是新的a型亚等基因:测序结果是797个位置发生突变,根据其他位置的突变判断,其特征为A102/O01。基因型与血清类型的一致性率为75%(15/20)。60%的病人(20人中有12人)接受了输血治疗,没有进行可溶性输血,75 %的病人(12人中有9人)获得了所需的效率。结论首次将MALDI-TOF MS质谱技术应用于国内困难临床标本血型遗传分组。与PCR-SSP相比,MALDI-TOF MS系统具有速度、高吞吐量和高特异性等优点,有助于识别困难血型和检测稀有血型。

  • 标签: MALDI-TOF MS质谱技术 疑难血型 鉴定
  • 简介:目的用MALDI—TOFMS技术和形态学方法对139株丝状真菌进行鉴定,评估MALDI—TOFMS技术在丝状真菌鉴定中的应用。方法将从临床呼吸道标本培养分离出来的139株丝状真菌,经过预处理后,用法国梅里埃公司生产的质谱仪(VITEKMs)进行鉴定,并将结果与传统形态学鉴定方法结果进行对比。结果质谱仪对139株丝状真菌正确鉴定率为82.7%(115/139);对曲霉属的鉴定正确率达到90.8%(108/119),其中烟曲霉和黄曲霉的鉴定正确率均为1。0%(77/77、21/21),黑曲霉的鉴定正确率50.0%(8/16),其他曲霉菌的鉴定正确率为40.0%(2/5);对青霉属的鉴定正确率为58.3%(7/12);对毛霉菌的正确鉴定率为0%(0/3)。呼吸道感染丝状真菌以曲霉菌属为主(89.2%),其中又以烟曲霉(55.4%)、黄曲霉(15.1%)和黑曲霉(11.5%)多见。结论MALDI—TOFMS技术能快速准确鉴定常见丝状真菌,为丝状真菌的鉴定带来革命性突破,但对少见丝状真菌的鉴定仍有待于数据库的进一步完善。

  • 标签: MALDI-TOF MS 呼吸道 丝状真菌 鉴定
  • 简介:摘要:微生物质谱技术,又称基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS),作为一种新兴的软电离质谱技术,由于其具有快速、准确、灵敏、自动化及高通量等检测特点,在近年来,已成为一项革命性病原体快速鉴定技术被用于临床微生物实验室,并将逐步取代常规病原体生化鉴定方法 并预计在将来取代常规病原体鉴定方法,并彻底改变微生物实验室细菌检测的面貌。

  • 标签: MALDI-TOF MS,质谱技术,病原体快速鉴定技术,病原微生物检测
  • 简介:摘要目的建立基于MALDI-TOF MS技术的临床微生物鉴定仪快速鉴定高毒力ST17亚型B组链球菌(GBS)的分类模型。方法回顾性研究。选取2015年至2018年全国多中心新生儿侵袭感染GBS菌235株,采用45株ST17菌和50株非ST17菌(20株ST19、15株ST12和15株ST10)主要ST亚型作为建模组,余下40株ST17、16株ST10、17株ST12和17株ST19为验证组,其他少见ST亚型菌50株视为模型分类观察组。以Bruker质谱仪采集菌株质谱图,通过ClinProTools 3.0软件用遗传算法(GA)进行建模、验证和差异肽峰筛选。结果ST17-GA法分类模型对建模菌株谱图识别率为99.4%,交叉验证值为96.9%。10个差异肽峰中,两个主要肽峰m/z 2 956和m/z 5 912权重均>1,而其他8个肽峰权重均<0.5。以90株主要ST亚型菌验证,仅1株ST17型菌被错判为非ST17,余下89株ST17与非ST17菌模型判断均正确,ST17型分类模型的诊断效能达98.9%,敏感度、特异度分别为97.5%、100%,阳性和阴性预测值分别为100%和98.0%。模型对其他50株少见ST型菌分类显示,21株(42.0%)被误判为ST17亚型。结论成功建立高毒力ST17型GBS菌的MALDI-TOF MS快速鉴定模型,并显示较好的诊断效能。

  • 标签: B组链球菌 MALDI-TOF MS 模型
  • 简介:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrixassistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOFMS)是近年发展起来的一种新型软电离质谱技术,目前不但应用于肿瘤、风湿性关节炎、阿尔茨海默病等的诊断,还可用于微生物鉴定,为微生物的鉴定带来了革命性的变化。

  • 标签: 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 诊断新技术 病原菌诊断
  • 简介:【摘要】:目的:分析利用MALDI-TOF MS技术分析鲍曼不动杆菌对替加环素的耐药情况。方法:选取2019年1月-2021年12月100株医院实验室培养获得的鲍曼不动杆菌,使用MALDI-TOF MS技术分析替加环素的敏感性,并统计检验结果。结果:100株鲍曼不动杆菌中对替加环素敏感的有34株,耐药有45株,中介有21株,并用K-B法进行进一步检验,替加环素敏感菌株正确检出率为78.4%,替加环素耐药菌株正确检出率为88.7%。结论:MALDI-TOF MS技术具有较好的检测价值,可以分析鲍曼不动杆菌对替加环素的耐药情况,可推广使用。

  • 标签: 鲍曼不动杆菌 替加环素 耐药性
  • 简介:摘要目的探索基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱仪不同算法快速识别甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌可行性。方法从北京同仁医院检验科2017年1月至2019年6月的细菌库中选取314株金黄色葡萄球菌临床分离株用MALDI-TOF MS鉴定,经头孢西丁纸片法(抑菌环直径≤21 mm)及聚合酶链反应(PCR)mecA基因初筛,将菌株分为甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)组(130株)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)组(184株);甲酸提取法采集谱图,将MRSA组和MSSA组再各分成3个亚组,即MRSA-1亚组(43株)、MRSA-2亚组(42株)及MRSA-3亚组(45株)和MSSA-1亚组(60株)、MSSA-2亚组(61株)及MSSA-3亚组(63株);使用Bruker MALDI-TOF质谱仪的ClinProTools软件中的遗传算法、快速分类算法、监督式神经网络算法以及中元汇吉质谱仪EX-Smartspec软件的卷积神经网络算法进行试验研究,重复3轮(第1轮MRSA-1和MRSA-2、MSSA-1和 MSSA-2为建模组,MRSA-3和MSSA-3为验证组,依此类推进行3轮)。以4种算法的受试者工作特征(ROC)曲线下面积展开性能确认。从北京同仁医院检验科2019年7—12月的细菌库中选38株MRSA和40株MSSA临床株,使用甲酸提取法采集谱图,对卷积神经网络算法建立的模型进行独立测试。结果在3轮建模和验证后,3个子组Bruker ClinProTools遗传算法的ROC曲线下面积分别为0.89、0.74和0.64,快速分类算法的ROC曲线下面积分别为0.77、0.95和0.94,监督式神经网络算法的ROC曲线下面积分别为0.90、0.98和0.98,中元汇吉质谱仪EX-Smartspec软件的卷积神经网络算法的ROC曲线下面积分别为0.95、0.99和0.99。卷积神经网络算法的独立测试结果显示其敏感度88.82%(810/912)、特异度81.15%(779/960)、准确性84.88%(1 589/1 872)、ROC曲线下面积0.92。结论Bruker ClinProTools软件中的监督式神经网络算法与中元汇吉质谱仪EX-Smartspec软件所用的卷积神经网络算法在快速识别MRSA时的性能指标可被临床接受。利用卷积神经网络算法,通过MALDI-TOF质谱技术可快速确认MRSA株,及时指导临床用药。

  • 标签: 质谱分析法 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 算法
  • 简介:目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-AssistedLaserDesorptionIonization-TimeOfFlightMassSpectrometry,MALDI-TOF-MS)技术对酵母样真菌鉴定的临床应用价值。方法将2015年6月-2016年6月临床检出的142株酵母样真菌标本同时采用MALDI-TOF-MS技术和传统真菌培养方法进行鉴定,记录结果并对结果进行对比分析。结果两种方法对于常见的白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和新生隐球菌的鉴定率很高(100%),符合率较高(100%);对于少见的葡萄牙念珠菌、解脂念珠菌、产朊念珠菌,两种方法的符合率较低,分别为25.00%、00.00%、00.00%。结论MALDI-TOF-MS技术对酵母样真菌的鉴定率较高,操作简便快速,是传统真菌培养鉴定的有力补充,可将其推广应用于酵母样真菌的早期快速鉴定。

  • 标签: 基质辅助激光解析电离飞行时间 酵母样真菌 鉴定
  • 简介:摘要目的评价血清分离胶促凝管法和HB&L微生物培养体系两种MALDI-TOF-MS预处理方法的鉴定率,为临床快速准确鉴定血流感染病原菌提供新思路。方法收集2020年1—12月北京解放军总医院第六医学中心实验室常规方法鉴定的149份血培养报警后单一细菌感染的阳性样本,分别采用分离胶促凝管法和HB&L微生物培养体系预处理后,并且以传统方法结果为标准,直接MALDI-TOF MS细菌鉴定,比较两种方法的鉴定率。结果在149份血培养阳性样本中,革兰阴性(G-)菌占47.0%(70/149)、革兰阳性(G+)菌占53.0%(79/149)。对G-菌种水平鉴定率,血清分离胶促凝管法为78.6%(55/70),HB&L微生物培养体系为91.4%(64/70),差异有统计学意义(P=0.033);对G+菌种水平鉴定率,二者分别为73.4%(58/79)和87.3%(69/79),差异有统计学意义(P=0.028)。在3.000~2.300分值段,G-菌鉴定率血清分离胶促凝管法和HB&L微生物培养体系分别为22.9%(16/70)和38.6%(27/70),差异有统计学意义(P=0.044);G+菌鉴定率两种方法分别为19.0%(15/79)和34.2%(27/79),差异有统计学意义(P=0.031)。结论HB&L微生物培养体系种水平鉴定率要高于血清分离胶促凝管法,经过预处理直接MALDI-TOF MS鉴定血培养阳性样本病原菌有一定临床应用价值。

  • 标签: 微生物学技术 血培养样本 血清分离胶促凝管法 HB&L微生物培养体系
  • 简介:目的寻找尿液中潜在的肾癌多肽标志物。方法收集肾癌患者根治性肾切除术前、术后组、非肾癌对照组晨起第二次中段尿液标本。铜螯合纳米磁珠提取尿多肽,MALDI-TOF-MS分析各组尿液中肾癌相关多肽标志物,并通过Tagldent程序对有意义多肽进行初步鉴定。结果m/z=1025、1116的多肽在术前组高表达,在术后组、对照组低表达。m/z=9730的多肽在术后组、对照组高表达,在术前组低表达。初步鉴定发现,m/z=1025信号峰与Urotensin-2B、LittleLEN匹配,m/z=1116信号峰与GRP匹配,m/z=9730信号峰与EA-92、Latecornifiedenvelopeprotein3C、Heparin-bindingEGF-likegrowthfactor匹配。结论肾癌患者尿液中高表达m/z为1025、1116的多肽,低表达m/z为9730的多肽,这些多肽可能是尿液中潜在的肾癌标志分子。

  • 标签: 肾癌 标志物 尿液 多肽组
  • 简介:ComparisionofFABandMALDIMassSpectrometryofGinsenosides¥ZhouYu;LiuZhiqiang;SongFengrui;LiuShuying;LiXianggao;YinJiangyuan(1Cha...

  • 标签: matrix-assisted laser desorption/ionization fast ATOM BOMBARDMENT
  • 简介:摘要:TOF是Time of flight的简写,为飞行时间测距法。原理是通过向目标物体打光,测量光在镜头和物体之间传输时间来测距,通过这些数据来判断这个物体距离我们有多远,进而知道画面里每一个物体的距离,从而实现深度图。

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