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  • 简介:摘要目的比较ELISA和TRUST检测方法的敏感性和特异性,评价其在临床诊断中的应用价值。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、联合检测1235例血清标本,包括手术前和输血前患者血清标本、皮肤门诊患者血清标本,可疑阳性结果采用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)确诊。结果共检测标本1235例,用TPPA法确诊38例为阳性。用TRUST法检出36例阳性,其中30例确诊阳性,6例为假阳性,灵敏度为78.9%(30/38),特异性为83.3%(30/36)。用ELISA法检出39例阳性,其中38例确诊为阳性,另有1例为假阳性,灵敏度为100%(38/38),特异性为97.4(38/39)%。结论ELISA方法操作简单,结果判断可标准化,特异性和敏感性好,可作为早期梅毒检测较理想的方法,适合大批量标本检测。TRUST法不宜继续作为梅毒筛选试验,但可作为其观察效果的治疗指标。

  • 标签: 梅毒螺旋体 梅毒甲苯胺红不加热血清试验 梅毒螺旋体明胶凝集试验
  • 简介:ELISA室内质控方法一般沿用Levery-Jen-nings质控图(以下简称L-J图)进行;利用West-gard规则判定失控.但由于ELISA试剂盒效期短,更换频繁,同一批号试剂盒和质控血清长期使用难度较大;同时在建立L-J框架图的检测过程中失控的情况不易被发现.针对这种情况,笔者建立了L-J质控图与"即刻法"质控相结合的一套室内质控方法,收到良好效果,以HBsAg检测为例介绍如下.

  • 标签: 室内质控方法 质控图 质控血清 HBSAG检测 即刻法 ELISA检测
  • 简介:本文建立了一种ELISA检测牛乳铁蛋白的方法。主要摸索了ELISA的工作条件,采用方阵滴定法确定抗原包被浓度和一抗稀释浓度,进而确定了二抗工作浓度,通过重复性试验和交叉性试验验证了该法的重现性和特异性。结果表明一抗工作浓度为1∶200000稀释,二抗工作浓度为1∶100000稀释,在此条件下检测牛乳铁蛋白的限度为1.56-100ng/mL,在此范围内,牛乳铁蛋白浓度与OD值之间呈指数相关,其回归方程为y=1.2770×(1.0145-e-0.0338x)(R2=0.9992)。本研究为研制牛乳铁蛋白检测试剂盒奠定了基础。

  • 标签: 牛乳铁蛋白 ELISA 检测 食品工业
  • 简介:摘要目的探讨ELISA法测定HBsAg的室内质控方法方法选择0.5IU/ml的HBsAg阳性质控品进行20次检测,先用即刻法和L-J质控图联合排除异常值后算出X、SD、CV,用该值绘制L-J质控图框架,再直接使用未经取舍的20次检测数据计算其X、SD、CV,绘制L-J质控框架,最后用同一批号的质控品测定值分别在上述两个不同质控框架中进行绘图验证.结论先用即刻法和L-J质控图联合排除临界阳性质控品(0.5IU/ml)异常值后得出X、CV、SD,再用该组值绘制常规L-J质控图适合用于ELISA法检测HBsAg室内质控。

  • 标签: ELISA法 室内质控 异常值取舍
  • 简介:伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的多种家畜和野生动物患病的一种急性传染病。除猪以外的其他动物发病后通常具有发热、奇痒及脑脊髓炎等典型症状,均为致死性感染,

  • 标签: 伪狂犬病毒 ELISA方法 抗体 野毒 检测 野生动物
  • 简介:摘要目的比较TP-ELISA与TPPA两种血清学梅毒抗体检测方法的性能。方法采用TP-ELISA法和TPPA法对633份门诊患者血清进行检测比较,其中包括81份梅毒患者血清。结果两种方法同为阳性的78例,其中不含假阳性,两种方法同为阴性的545例,其中含假阴性1例。TP-ELISA法的阳性检出率为96.30%,TPPA法的阳性检出率为98.77%。TPPA未有假阳性结果,TP-ELISA的假阳性率为1.45%。结论TP-ELISA法的敏感性高,TPPA的特异性高,但两种方法均不能判断是初次感染还是既往感染。

  • 标签: TP-ELISA TPPA 梅毒检测
  • 简介:摘要目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)法与胶体金免疫层析(GICA)法检测乙型肝炎表面抗原(HBSAg)的应用价值。方法对医院650例体检和门诊病人分别进行ELISA法语GICA法检测HBSAg。结果ELISA法检测HBSAg后,阳性例数为69例,阳性率为10.63%,GICA法检测HBSAg后,阳性例数为64例,阳性率为9.85%,差异无统计学意义(P>0.05);ELISA法灵敏度为95.5%、特异性为92.8%,GICA法灵敏度为88.4%,特异性为91.6%,ELISA法与GICA法相较,灵敏度较高,特异性无明显差异。结论ELISA法与GICA法检测HBSAg均有良好的效果,ELISA法灵敏度较高适合常规检测,GICA法操作简便、快速,适合普查筛查。

  • 标签: 酶联免疫吸附试验法 胶体金免疫层析法 乙型肝炎表面抗原
  • 简介:摘要目的分析目前部分基层血站筛选HBV阴性供血员用ELISA方法只检测HBsAg。为了筛选出更可靠的血源,进一步排除部分HBsAg阴性而抗-HBc阳性具有传染性的供血员。方法ELISA方法测定607例来院健康体检者三对乙肝标志物。结果HBsAg阴性,抗-Hbe阳性占1.43%,抗-HBc阳性占3.87%(其中抗-HBc-IgM阳性占0.2%)。结论检测HBsAg不能作为唯一HBV标志物来筛选供血员。如不能做三对乙肝标志物,必须检测抗HBc。

  • 标签: 检测HBsAg 筛选供血员 加测抗-HBc
  • 简介:对102份血清标本分别用PCR和ELISA方法检测HBV—DNA,HBsAg,抗—HBs,HBeAg,抗—HBe,抗—HBc(IgG),抗—HBc(IgM)和Pre—S2。PCR检测结果表明:在HBsAg(+)血清中,HBV—DNA的检出率为70%。在HBeAg(+)血清中,HBV—DNA的检出率为100%。在抗—HBs(+)/抗—HBc(+)血清中,HBV—DNA的检出率为20%。因此大多数HBsAg携带者具有乙型肝炎病毒(HBV)传染性,抗—HBs(+)抗—HBc(+)血清不能排除HBV的传染性。

  • 标签: PCR ELISA HBV HBSAG携带者
  • 简介:摘要目的比较PCRHBV-DNA和ELISAHBsAg两种检测方法在检测内窥镜中HBV的检测情况,从而确定本次研究的试验方法方法现场采集内窥镜各关键部位(镜身、孔道、活检钳)的样品207份,平均分成两份,按各自所用试剂盒的要求分别进行试验,比较两种试验的阳性检出率、一致性等试验评价指标。结果PCRHBV-DNA阳检率为27.54%、ELISAHBsAg阳检率为2.42%,经χ2检验,χ2=4.63P=0.031、一致性检验,kappa=0.089,P=0.008,由此说明两种检验方法在内窥镜中痕量的HBV的检测过程中有显著性差异。结论PCRHBV-DNA对与内窥镜中痕量的HBV的检测试验方法优于ELISAHBsAg方法,在本次调查研究中应该采用PCRHBV-DNA的检测方法

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  • 简介:目的研究ELISA法定量测定钙调素(CaM)的最优条件。方法用重组人CaM、免抗CaM,通过对聚苯乙烯反应板进行紫外辐照处理,改善抗原因相化条件;通过对抗原包被液、包被时间等条件优化,建立简便、快速、准确的ELISA定量技术。结果以pH7.40.01mol/L的PB为包被液,包被及后续封闭时间为4℃静置72h,CaM包被浓度为5-8g/ml,抗原抗体反应时间为37℃60min,可获最佳CaM定量结果。结论建立的检测CaM的ELISA测定方法,敏感性、重复性均在临床检测可接受的范围内,标准曲线的线性也较好,可用于细胞内外CaM的定量研究。

  • 标签: 钙调素 ELISA 定量检测 实验条件优化 包被液 抗原包被浓度
  • 简介:摘要目的分析ELISA方法检测HCV抗体的相关影响因素,寻求提高ELISA方法检测HCV抗体准确性的科学方法方法以2013年1月-2014年12月在本院进行丙型肝炎抗体检测的2568份标本作为研究对象,先采用ELISA法测定HCV抗体,对于检测阳性的标本进行HCV-RNA确证试验,对患者基本情况、使用试剂、标本状况、操作过程等影响检测结果的相关因素进行统计分析。结果ELISA法共计检测出HCV抗体阳性样品78份,阳性率3.04%,HCV-RNA确证试验检测阳性标本数为64份,确证符合率82.05%,在采用ELISA方法检测HIV抗体的整个过程中,包括病人的基本情况、标本的采集、标本的保存、试剂的准备、样品的加入、酶标孔的孵育、酶标孔的洗涤、显色、结果判断等因素都会影响到检测结果。结论要提高ELISA法检测HCV抗体的准确度,必须制定严格的标准操作程序并按照标准操作程序进行操作,每次检测都要加入外部质控品,绘制质量控制图。

  • 标签: HCV抗体 ELISA法 影响因素分析
  • 简介:摘要ELISA自1971年问世以来,由于其简便、灵敏、特异性高的、酶标记物有效期长、以及是一种快速、低成本的检测方法,广泛应用于医学和生物学科各个领域。排除外因操作过程、药物及干扰物、反应温度、离子强等影响因素后。临床还有不可解释的少见模式或矛盾结果时,我们应该重新认识实验本身的方法学设计上的缺陷。为我们的检查过程提出如何应对这些缺陷的策略。

  • 标签: ELISA 乙肝 方法学 影响因素 应对策略
  • 简介:胡桃是坚果类食品中引起过敏反应的首要食品。采用胡桃总蛋白产生的多克隆抗体,建立检测胡桃成分的间接竞争ELISA方法,并通过特异性试验和样品回收试验对该方法进行验证。结果表明:该方法对胡桃蛋白的定量检测限(LOQ,相当于IC80)为94ng/mL;在特异性试验中,只有美洲山核桃出现交叉反应,其它植物样品均未出现交叉反应;将50~1000ng/mL[相当于10-200μg/g]的胡桃蛋白添加到小麦蛋白中,胡桃蛋白的回收率在78%-93%之间。

  • 标签: 过敏原 胡桃总蛋白 ELISA 检测
  • 简介:摘要目的探索即时、快速、准确的新型冠状病毒(2019-nCoV)抗原检测方法,提高新型冠状病毒感染者检出率,并建立2019-nCoV的S蛋白特异性检测方法方法本研究利用ELISA方法对前期研发的2019-nCoV基因工程单克隆抗体(mAb)进行配对检测,从中挑选出最优检测抗体组合,建立了新型冠状病毒抗原检测双抗体夹心ELISA方法,并对检测方法进行条件优化。结果本实验室前期筛选出的12株2019-nCoV基因工程单克隆抗体对2019-nCoV S蛋白具有良好的结合活性,是抗原检测候选抗体。本研究所建立的新型冠状病毒抗原检测双抗体夹心ELISA方法可快速有效的检测2019-nCoV S蛋白,灵敏度较高,对S蛋白检出限小于1 ng/ml。结论本研究所建立的抗原检测方法可特异性检测2019-nCoV的S蛋白,为COVID-19感染的早期、敏感、特异诊断提供了有意义的参考。

  • 标签: 2019-nCoV 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA 抗原检测
  • 简介:摘要目的对定量检测新生牛血清中乙脑抗体的ELISA方法进行初步验证。方法ELISA方法的灵敏度、精密性、特异性、线性和在新生牛血清中的适用性进行验证。结果该法的灵敏度为14096;板内和板间CV平均值分别为1.2%和2.0%;抑制率均>79%;线性较好,相关系数r均>0.993;在新生牛血清中的检测回收率均>90%。结论该法具有较高的灵敏度、精密性、特异性和线性,适用于检测新生牛血清中的乙脑抗体。

  • 标签: 乙脑抗体 ELISA 新生牛血清
  • 简介:摘要目的优化用于检测唾液中乙肝表面抗原的ELISA法,并对其进行评价。方法ELISA的不同条件样品类型、加样体积和孵育温度及时间进行优化,筛选最佳条件;并采用三种不同的临界值计算方法,判断最佳临界值。结果采用优化后方法,47例血清阳性对应的唾液样品中,44例检测结果为阳性;68例血清阴性对应的唾液样品中,63例检测结果为阴性。血清和唾液样品检测结果的一致性比较高,κ指数为0.87。且该方法的特异度和敏感度分别达到92.6%和93.6%。结论优化后的ELISA方法在唾液样品的乙肝表面抗原检测中具有潜在的应用价值。

  • 标签: 乙肝病毒表面抗原 唾液 ELISA
  • 简介:摘要目的对庆大霉素单克隆抗体的制备以及检测进行研究;方法本研究采用碳二亚胺法将庆大霉素与载体蛋白偶联形成完全抗原,用基质辅助激光解吸/电离质谱进行了表征,以人工抗原免疫BALB/C小鼠;结果通过杂交瘤技术获得了分泌抗庆大霉素单克隆抗体并能稳定传代的杂交瘤细胞株,建立了庆大霉素间接竞争ELISA检测方法,其线性检测范围为0.1~5ng/mL,半数抑制浓度(1C50)为0.8ng/mL,与其他化合物的交叉反应率小于0.01%。

  • 标签: 庆大霉素 制备 检测