简介：聚合酶链式反应（PCR）技术的问世和发展是分子生物学研究领域中最重要的进步之一.在PCR技术中,DNA聚合酶起着至关重要的作用,从某种意义上说,DNA聚合酶的研究进展决定着PCR技术的发展趋势和应用范围,研究者们一直在努力探寻着酶学性能好、保真度高的PCR用DNA聚合酶.高中生物人教版选修1和选修3都对PCR技术的原理和过程作了详尽的介绍,但对热稳定DNA聚合酶的描述极少,仅仅提及Taq酶.因此,有必要对PCR用DNA聚合酶的基本类型和特点进行分析归纳.

简介：摘要目的分析聚合酶链对肝硬化患者腹水细菌DNA的检测效果。方法选择细菌通用引物，引入到16SrRNA基因保守区，本次研究中，选择48例腹水样本，对样本行PCR扩增处理和阳性阴性对照实验。分析实验结果。结果在分析48例标本时，在15例标本中获得了370bpDNA片段，进过检测，阳性率为31.25%。而阴性和空白对照标本则并未体现出特异性。在PCR扩增后，可以检测出10pgDNA。结论在肝硬化腹水患者的检测中，采用聚合酶链技术，可以达到特异性和敏感性的需求，便于检测患者的细菌情况，具有较高的临床诊断价值。

简介：摘要目的探讨真菌游离DNA(cfDNA)聚合酶链反应(PCR)诊断侵袭性真菌感染的临床价值。方法本研究为前瞻性研究，选取2017年1月至2021年1月宁德市蕉城区医院检验科收治的120例真菌感染患者，男81例，女39例，年龄(52.33±2.69)岁，年龄范围为35~79岁。根据《侵袭性真菌感染诊断标准》将所有患者分为非侵袭性真菌感染组(n＝39)和侵袭性真菌感染组(n＝81)，比较两组患者的半乳甘露聚糖(GM)和cfDNA含量，并对GM和cfDNA的诊断效能进行分析。结果侵袭性真菌感染组患者的GM含量[(0.74±0.37)OD]高于非侵袭性真菌感染组[(0.21±0.05)OD]，差异有统计学意义(P<0.001)。侵袭性真菌感染组患者的cfDNA含量[(9 526.33±511.33)GE/ml]高于非侵袭性真菌感染组[(8 014.65±501.45)GE/ml]，差异有统计学意义(P<0.001)。cfDNA诊断的灵敏度(98.77%)显著高于GM诊断(86.42%)。结论真菌cfDNA PCR诊断侵袭性真菌感染的灵敏度较高，具有推广价值。

简介：PCR（PolymerasChainReafion）即聚合酶链反应，于1985年就有报道，是一种模拟特异天然DNA复制过程的核酸扩增法。以DNA为模拟的特异靶序列，在引物介导下酶促扩增，可以从极少量基因组DNA合成百万拷贝数的某DNA片段。我们应用PCR测试法，对肝病患者及体检的青年工人血清中的乙肝病毒DNA进行有关血清分析及临床研究，获得了可靠数据和临床效果。

简介：摘要为探讨聚合酶链反应（PCR）DNA扩增对诊断活动性肺结核的临床价值，本文用PCR技术扩增结核杆菌特有的MPB64蛋白基因序列，对121例病人临床标本进行检测，发现34例活动性肺结核中有28例PCR阳性，疑诊为肺结核者33例中有18例阳性，非结核肺疾患54例中有10例阳性，其中有肺结核既往史者阳性6例，有结核接触史者阳性3例。提示PCR阳性并非为活动性肺结核所特有。

简介：

简介：【摘要】目的 研究实时荧光聚合酶链式反应（FQ-PCR）技术应用于慢性乙型肝炎（CHB）患者血清标本HBV-DNA定量检测中的效果。方法 选取我院2020年1月-2021年12月确诊入院的CHB患者（n=85）作为研究组，同期HBV早期感染者（n=80）作为对照组。均给予

简介：目的探讨高脂血、溶血标本对荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定低水平HBV-DNA检测结果的影响。方法对收治的100例三酰甘油（TG）正常（TG≤1.46mmol/L）、实时荧光定量PCR测定为（4.0-9.0）×10^3IU/mL的乙型肝炎患者采集血清标本,进行即刻检测,另外选择100份乙肝五项全阴且测不出HBV-DNA的高TG标本和100份乙肝五项全阴且测不出HBV-DNA的全血标本分别制备成高脂血、溶血血清标本,同时进行高脂血和非高脂血、溶血血清和非溶血血清的HBV-DNA荧光定量PCR检测,并进行配对t检验。结果高脂血和非高脂血、溶血血清和非溶血血清的HBV-DNA水平差异有统计学意义（P〈0.05）。结论高脂血、溶血标本低水平HBV-DNA荧光定量PCR定量检测结果较空腹采集即刻检测的结果降低。

简介：摘要重组酶聚合酶扩增（RPA）技术是一种新型核酸恒温扩增检测技术。该技术可以在37~42 ℃条件下实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点，特别适用于基层和现场即时检测。本文从RPA技术的基础理论和实验要点出发概述了开展该项研究需要注意的要点，综述了RPA技术在医学检验领域的应用现状和相关问题，并展望了其未来发展的广泛前景。

简介：摘要目的对聚合酶链反应（FQ-PCR）检测乙型肝炎病毒进行分析，了解其临床应用价值。方法用中山医科大学达安基因诊断中心设计的HBV-FQ-PCR试剂盒对101份临床血清标本同时进行PCR荧光定量和ELISA肝炎标志物检测，对检测结果进行分析。结果经过FQ-PCR检测，24份HbsAgHbeAgHbcAb都阳性的标本，其血清HBV-DNA也全部阳性，HBV-DNA拷贝数范围在1.4×105-7.0×109/ml之间；32份HbsAgHbeAbHbcAb都阳性的标本，阳性率为46.9%，HBV-DNA拷贝数范围在0-8.1×107/ml之间；14份HbsAb阳性的标本，阳性率为7.1%，HBV-DNA拷贝数范围在0-5.0×104/ml之间；18份全阴性的标本，阳性率为5.6%,HBV-DNA拷贝数范围在0-4.9×105/ml之间。结论FQ-PCR定量检测HBV-DNA灵敏度，特异性较高，能基本反映乙肝病毒在体内的真实复制情况，具有较高的临床应用价值。

简介：目的建立食品中沙门菌聚合酶链反应（PCR）的快速检测方法。方法根据沙门菌invA基因序列设计引物；氯化镁孔雀绿选择性增菌0到8h后，煮沸法提取DNA，用PCR扩增电泳。结果PCR法能特异性检测出食品中的沙门菌，扩增片段为389bp，增菌前的检出限为10^2CFU／g，增菌后为2CFU／25g。结论应用PCR检测沙门菌具有快速、特异、灵敏和简便的特点。

简介：摘要目的在pMDT-18克隆质粒载体的基础上，构建实用型的能够稳定转染甲型流感病毒RNPs并且可体外定量检测的RNA聚合酶I荧光报告系统。方法设计并人工合成人RNA聚合酶I启动子、小鼠终止子序列及毒株A/Puerto Rico/8/34的NP基因的UTR，利用嵌合PCR方法将绿色荧光蛋白（eGFP）基因与上述元件体外连接，形成小鼠终止子-3’UTR-eGFP-5’UTR-人RNA聚合酶I启动子报告元件，将报告元件克隆至不携带任何启动子的pMDT-18质粒载体中，构建实用型RNA聚合酶I荧光报告质粒，转染稳定表达流感病毒A/Puerto Rico/8/34 RNPs的HeLa细胞，观察荧光表达及测定相对荧光度。结果该系统在转染HeLa细胞后，无任何荧光产生，而转染稳定表达流感病毒A/Puerto Rico/8/34 RNPs的HeLa细胞后24 h、36 h、48 h和60 h均有荧光产生，强度随时间逐渐增强。结论成功构建了实用型RNA聚合酶I荧光报告系统，有助于提高流感病毒反向遗传系统的拯救效率、研究流感病毒聚合酶功能以及探索UTR多态性对特定基因的复制或转录的影响机制，为流感工作者在病毒分子机制领域的研究搭建了可靠的技术平台。

简介：摘要聚合酶链反应(PCR)是一种在试管进行的简便而快速的特异性DNA体外扩增技术，其基本原理与细胞内DNA复制的相似，但反应体系相对比较简单。主要应用于传统培养方法不能及时准确检出或敏感性太低或培养时间长的病原体的检测。PCR扩增能力极强、灵敏性极高，微量的样品污染便有可能导致假阳性结果的出现，为此，在实验操作中应谨防污染的发生，并设置严格的对照，以提高PCR结果的正确性。

简介：在本文中主要针对医学检验中聚合酶链反应的应用和进展做出了深入的探讨与分析，聚合酶链技术具有精准度高、操作方便等特点，在医学检验领域中得到广泛应用，文中主要从医学检验的不同的领域研究聚合酶链反应的具体应用，并且提出聚合酶链反应在医学检验中的具体要求，以此来进一步对医学检验中聚合酶链反应的应用进行优化，推动本次研究发展的同时，为相关工作人员提供良好的参考依据。

简介：本文试验水芹、龙胆、旋复花、人黄、黄芪5种中药粗提物对鸭乙型肝炎病毒逆转酶(DHBV-RT)和DNA聚合酶(DHBV-DNAP)的抑制作用。结果表明,药物对DHBV-RT和DHBV-DNAP的抑制特性类似。5种中药粗提物对上述两种酶都有不同程度的抑制作用,按强弱顺序依次为水芹、旋复花、龙胆、大黄和黄芪。阳性对照药-膦羧基甲酸钠(PFA)对DHBV-RT和DHBV-DNAP的抑制作用均较强。提示,水芹等5种中药可能有抗乙肝病毒作用。

简介：目的：筛选出对孢子丝菌结合效率相对较高的探针。方法以50株纯培养的孢子丝菌及标准株为样本，以毛霉、烟曲霉、念珠菌各1株为阴性对照，用聚合酶链反应-酶联免疫法（PCR-ELISA）对已报道的5个孢子丝菌特异性探针（U26852、U26866、U26866′、M85053及AF117945）进行筛选。记录各探针与合成DNA片段杂交底物显色与否及酶免疫测定指数（EI）值。结果PCR产物测序证实5个探针均位于产物序列上；在相同的ELISA条件下，探针U26852显色最强，EI值最高。结论针对28SrRNA的探针U26852是目前与孢子丝菌结合效率相对较高的探针。

简介：目的了解肺炎衣原体(TWAR)与心脏病的相关性，多方面探讨冠心病的发病因素。方法采用聚合酶链反应(PCR)法，对冠心病100例，高血压病40例，心肌疾病40例，心律失常40例，正常对照60例，血清TWARDNA进行检测。结果不同组别间TWAR阳性率的差别有高度显著性(χ2＝30.52，P＜0.05)，其中冠心病占31.0%，心肌疾病占32.5%，高血压7.5%，心律失常12.5%，正常对照1.67%，提示冠心病和心肌疾病TWAR阳性率较高。结论冠心病、心肌疾病TWAR阳性检出率比高血压，无临床心脏病证据的心律失常和正常对照组高，提示TWAR是引起冠心病和心肌疾病的原因之一。

简介：目的：通过在大肠杆菌中分段表达禽流感病毒聚合酶酸性蛋白（PA蛋白）,探索PA基因中可能影响表达的区域。方法：构建分段缺失的PA蛋白突变体,用IPTG在大肠杆菌RosettaGamiB（DE3）中诱导表达,比较各突变体的表达效率。结果：N端缺失长度在143～408个氨基酸残基之间的9个突变体在大肠杆菌中的表达水平较高;而突变体PA/K（Δ1-40aa）、PA/M（Δ1-56aa）、PA/N（Δ41-56aa）和PA/P（Δ57-75aa）的表达水平很低;全长PA蛋白和缺失N端20个氨基酸残基的突变体PA/L则检测不到表达。结论：PA基因的61～225bp和325～426bp可能是影响PA蛋白表达的2个重要区域,为下一步表达全长PA蛋白奠定了基础。

简介：目的研究聚合酶链反应分析急性视网膜坏死综合征眼内液病毒DNA的临床价值.方法聚合酶链反应检测28例37个眼内液标本疱疹病毒DNA,分析检测结果、影响因素及最终诊断.结果发现水痘-带状疱疹病毒DNA15例,单纯疱疹病毒1型DNA3例.适宜检测时间为炎症活动期,不用或短期使用抗病毒药.前房水和玻璃体均可取得可靠结果.结论聚合酶链反应检测眼内液病毒DNA,方法简便,尤其有助于疑难病例的诊断.

简介：摘要聚合酶链反应技术操作简便且灵敏程度较高，具有良好的特异性，是研究、检测以及鉴定标本中DNA片段的一种重要方式，在医学检验中具有较好的应用价值。本文就聚合酶链反应技术在医学检验中的实际应用情况进行分析，并对其未来发展进行展望，仅供相关人员参考。