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  • 简介:AbstractBackground:Long non-coding RNA (lncRNA) actin filament-associated protein 1 antisense RNA 1 (AFAP1-AS1) functions as a competing endogenous RNA to regulate target genes expression by sponging microRNAs (miRs) to play cancer-promoting roles in cancer stem cells. However, the regulatory mechanism of AFAP1-AS1 in cervical cancer (CC) stem cells is unknown. The present study aimed to provide a new therapeutic target for the clinical treatment of CC.Methods:Hyaluronic acid receptor cluster of differentiation 44 variant exon 6 (CD44v6)(+) CC cells were isolated by flow cytometry (FCM). Small interfering RNAs of AFAP1-AS1 (siAFAP1-AS1) were transfected into the (CD44v6)(+) cells. The levels of AFAP1-AS1 were measured by quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Sphere formation assay, cell cycle analysis, and Western blotting were used to detect the effect of siAFAP1-AS1. RNA pull-down and luciferase reporter assay were used to verify the relationship between miR-27b-3p and AFAP1-AS1 or vascular endothelial growth factor (VEGF)-C.Results:CD44v6(+) CC cells had remarkable stemness and a high level of AFAP1-AS1. However, AFAP1-AS1 knockdown with siAFAP1-AS1 suppressed the cell cycle transition of G(1)/S phase and inhibited self-renewal of CD44v6(+) CC cells, the levels of the stemness markers octamer-binding transcription factor 4 (OCT4), osteopontin (OPN), and cluster of differentiation 133 (CD133), and the epithelial-mesenchymal transition (EMT)-related proteins Twist1, matrix metalloprotease (MMP)-9, and VEGF-C. In the mechanism study, miR-27b-3p/VEGF-C signaling was demonstrated to be a key downstream of AFAP1-AS1 in the CD44v6(+) CC cells.Conclusions:LncRNA AFAP1-AS1 knockdown inhibits the CC cell stemness by upregulating miR-27b-3p to suppress VEGF-C.

  • 标签: Hyaluronic acid receptor cluster of differentiation 44 variant exon 6 Cell stemness Cervical cancer Long non-coding RNA actin filament-associated protein 1 antisense RNA 1 MicroRNA-27b-3p
  • 简介:摘要目的研究长非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对甲状腺癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常甲状腺和甲状腺癌细胞株中AFAP1-AS1的表达。将甲状腺癌细胞株WRO分成3组,AFAP1-AS1沉默表达组(AFAP1-AS1-siRNA组)、阴性对照组(NT-siRNA组)及空白对照组(Blank组),AFAP1-AS1-siRNA组和NT-siRNA组采用Lipofectamine™ 3000分别转染AFAP1-AS1-siRNA、NT-siRNA,Blank组加入PBST对照。CCK-8检测3组细胞增殖能力,Transwell实验检测侵袭能力,Western blotting检测Rho A、Cyclin D1和MMP-9蛋白的表达情况。结果正常甲状腺细胞株FRTL-5、甲状腺癌细胞株SW579、CAL-62、FRO、WRO的AFAP1-AS1相对表达量分别为1.03±0.04、2.95±0.17、5.31±0.35、7.26±0.49、9.67±0.53,5组间比较差异具有统计学意义(F=16.932,P=0.027);AFAP1-AS1在WRO细胞中表达量最高,因此,选择WRO细胞进行后续实验。AFAP1-AS1-siRNA组、NT-siRNA组、Blank组3组细胞AFAP1-AS1的相对表达量分别为0.23±0.02、1.02±0.04、1.03±0.05,差异具有统计学意义(F=13.590,P=0.006),与NT-siRNA组相比,AFAP1-AS1-siRNA组AFAP1-AS1表达量显著降低(P<0.001)。3组细胞转染后3、4 d的A450值分别为0.68±0.06、1.17±0.09、1.22±0.09,0.96±0.08、1.69±0.11、1.72±0.12,差异均具有统计学意义(F=7.318,P=0.016;F=10.351,P=0.004),第3、4 d AFAP1-AS1-siRNA组、NT-siRNA组两组比较,差异均有统计学意义(P=0.043;P=0.013)。3组侵袭细胞数分别为(72.8±5.7)个、(145.6±8.9)个、(148.4±7.3)个,差异具有统计学意义(F=37.273,P=0.034),AFAP1-AS1-siRNA组侵袭细胞数少于NT-siRNA组(P=0.021)。3组细胞Rho A蛋白表达量分别为0.34±0.03、1.02±0.04、1.04±0.03,差异具有统计学意义(F=9.667,P=0.013),AFAP1-AS1-siRNA组Rho A蛋白表达量显著低于NT-siRNA组(P=0.018);3组Cyclin D1蛋白表达量分别为0.52±0.04、1.03±0.02、1.05±0.04,差异具有统计学意义(F=15.464,P=0.010),AFAP1-AS1-siRNA组Cyclin D1蛋白表达量显著低于NT-siRNA组(P=0.023);3组MMP-9蛋白表达量分别为0.42±0.04、1.05±0.03、1.02±0.04,差异有统计学意义(F=10.328,P=0.032),AFAP1-AS1-siRNA组MMP-9蛋白表达量显著低于NT-siRNA组(P=0.035)。结论AFAP1-AS1沉默可抑制甲状腺癌细胞增殖、侵袭,其机制可能与下调Rho A、Cyclin D1、MMP-9蛋白表达相关。

  • 标签: 甲状腺肿瘤 RNA,长链非编码 细胞增殖 肿瘤侵润 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1
  • 简介:你知道不莱梅吗?噢——它是一个美丽快乐的地方。不莱梅在哪儿呢?噢——有梦想的地方就有不莱梅。没错儿,不莱梅这个地方,早就存在于“很久很久以前”的童话里了……

  • 标签: 小学 阅读教学 《1+1+1+1=?》 张蕾
  • 简介:1名学生+1位教师=1所学校。这个特殊的场景,出现在重庆綦江区赶水镇太公山村小。学校唯一的学生叫谭陆森,而陪伴教导他的是老教师令狐克洪。太公山村小的生源逐年减少,学生陆陆续续转到镇上就读,只剩下谭陆森一人。谭家四世同堂,家庭负担颇重,小陆森为了能与祖母互相照顾,不方便转校下山就读。于是,令狐克洪向学校申请:"让我在太公山站好最后一班岗,照顾好最后一名学生。"

  • 标签: 陆森 家庭负担 重庆綦江 打乒乓球 课外辅导
  • 简介:世间有一种最甜美的呼唤,那就是妈妈;世间有一种最伟大的爱,那就是母爱。那个特殊的夜晚,我读懂了那份母爱,也证明了11=1这个让我疑惑很久的式子。

  • 标签: 《1+1=1》 中学生 语文学习 作文
  • 简介:“我们人类总是不满足的。小孩生下来,刚刚学会爬,就不满足,就想学走,刚刚学会走,就又想学跑了。”大鼻子教授一上课,就说了这样一段话,“但人们还是不满足,于是,发明了——”

  • 标签: 《1+1=?》 儿童文学 童话 李白坚
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  • 简介:=?●魏鹏程前不久,县国税局召开征管改革现场会。两位老所长看完我们所税负核定清册后,问我们:“你们月初核定的税款,当月能如数收上来吗?”我们回答:“能”。两位老所长不信的摇摇头,并笑着说:“在农村收税,要想=2,哪是不可能”。听了老所长的...

  • 标签: 税收征管改革 所长 国税局 农村 前不久 税款
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  • 简介:近日,多家媒体报道,加多宝集团出品的王老吉红色罐状饮料出现断货,究其原因,商家们给出了出乎人们意外的答案:王老吉向地震灾区捐款1亿元人民币,创下国内单笔最高捐款额度。这一善举,让消费者看到了一个负责任企业的形象,短时间里得到市场更多关注和追捧,品牌价值不断提升。

  • 标签: 媒体报道 地震灾区 品牌价值 王老吉 人民币 负责任
  • 简介:清明小长假,作业不多,爸爸也难得从部队回家休假。晚饭后,一家人去广场散步。我快乐得像只小鸟,一手牵着爸爸,一手拉着妈妈,边走边唱。突然,爸爸说:“我出一个题目.11=1.你们相信吗?就是某种事物加某种事物等于一种新的事物,我们三个人来比一比,看谁说得多。”

  • 标签: 小长假 事物 回家
  • 简介:如果给你四个数1、2、3、6,请你想想,这四个数有什么样的关系?那就是下面这两个等式:1+2+3=6,1×2×3=6.

  • 标签: 解题 妙用 个数 等式
  • 简介:世界上最有效、最奇妙的机器是什么描匕是你的大脑和神经系统。这也是我们每个人迈向成功的有效辅助机器,美国心理学家马尔茨通过多年的研究发现:大脑具有帮助人们分析环境、选择目标、提供方法、矫正错误,引导人们最终走向成功的功能。我们每个人都具有这种世界上最奇妙、无可比拟的成功辅助机器.成功的关键在于我们是否善于运用它。

  • 标签: 小学生 数学学习 阅读知识 课外阅读
  • 简介:法国农业工程师林格曼曾设计过一个发人深省的“拉绳实验”:把被试者分成一人组、两人组、三人组和八人组,要求各组用尽全力拉绳,同时用灵敏度很高的测力器分别测量其拉力。结果发现,两人组的拉力只是单独拉绳时两人拉力总和的95%,三人组的拉力只是单独拉绳时三人拉力总和的85%,而八人组的拉力只是单独拉绳时八人拉力总和的49%。

  • 标签: 拉力 工程师 灵敏度
  • 简介:法国农业工程师林格曼曾设计了一个发人深省的“拉绳实验”:把被试者分成一人组、两入组、三人组和八人组。要求各组用尽全力拉绳,同时用灵敏度很高的测力器分别测量其拉力。结果发现。两人组的拉力只是单独拉绳时两人拉力总和的95%。三人组的拉力只是单独拉绳时三人拉力总和的85%,而八人组的拉力只是单独拉绳时八人拉力总和的49%。

  • 标签: 《1+1〈2》 中学生 语文学习 阅读
  • 简介:看完了这些段落,是不是有了些启发呢?下面就进入我们的《素材11》。各位在欣赏下面的文章的同时,也不要忘记仿写一下啊!快把你仿写的段落寄给我们吧!

  • 标签: 素材 段落 仿写 文章