简介：目的：比较不同蛋白质提取方法在牙胚蛋白提取中的效果，寻找适合牙齿发育高通量蛋白质组学分析的蛋白质提取方法。方法：取猪胚胎第40、50、60天第三乳磨牙牙胚，利用碱性碳酸盐溶液提取牙胚初步钙化部分的蛋白，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳比较液氮研磨法和电动研磨器研磨法提取牙胚总蛋白效果，BCA（bicinchoninicacid）蛋白浓度测定法比较RIPA裂解液与尿素溶液提取牙胚总蛋白含量。结果：与液氮研磨法相比，电动研磨法提取蛋白后的聚丙烯酰胺电泳图谱蛋白条带明显更深，蛋白含量高。尿素溶液对牙胚总蛋白的提取量高于RIPA裂解液组，蛋白电泳分离效果均可。结论：采用电动研磨器研磨牙胚，组织损失量小，提取蛋白效果好于液氮研磨；采用尿素溶液提取牙胚总蛋白效果优于RIPA裂解液。初步找到适合下游高通量蛋白质组学分析的牙胚蛋白提取方法。

简介：目的：目的：研究与牙齿发育相关的骨形态发生蛋白7（bonemorphogeneticproteins7，BMP7）信号分子在小型猪乳磨牙胚中的特异性时空表达情况。方法：采用小型猪第三乳磨牙胚作为研究对象，获取不同孕期的小型猪胎猪胚胎的下颌骨，分别进行HE染色、免疫组织化学染色、放射性核素标记探针的原位杂交及实时定量RT－PCR检测BMP7分子在小型猪乳磨牙不同发育时期的表达情况。结果：HE染色显示小型猪第三乳磨牙在胚胎E40、E50、E60分别处于帽状期、钟状期以及钟状晚期（分泌期）。免疫组织化学染色从蛋白水平显示，BMP7在E40时在成釉器和间充质均有表达，成釉器表达相对强于间充质；在E50时，BMP7仍然表达在牙胚成釉器和间充质，与E40表达情况类似；在E60时则主要集中表达在间充质特别是前成牙本质细胞和前成釉细胞。原位杂交与实时定量RT－PCR从mRNA水平也验证了其表达趋势与免疫组织化学基本一致。结论：BMP7信号分子在小型猪乳磨牙发育过程中呈特异性的时空表达，提示其与牙齿形态发生和细胞分化相关。

简介：牙源性干细胞的分化受其所处的局部微环境所调控。以往研究表明牙胚细胞条件培养基可诱导牙髓干细胞向成牙的细胞谱系分化。然而，采用人牙胚细胞条件培养基诱导在实际操作中不可行，所以推测异种的牙胚细胞条件培养基可能对人牙髓干细胞产生类似的效应。本研究采用猪的牙胚细胞条件培养基（pTGC-cM）来诱导人牙髓干细胞，评估其诱导前后的细胞形态学、集落形成、体外多向分化、与成牙相关的蛋白和基因表达、体内分化能力等。

简介：目的探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg—Gly—Asp，RGD）多肽修饰的啧砂大颗粒酸蚀（sandblasted，large—gritandacid—etched，SLA）钛片对糖尿病小型猪骨结合的影响。方法本研究于2014年6月至2015年10月在南京军区总医院比较实验室进行。选取健康的广西巴马小型猪5只，用链脲佐菌素（STZ）随机诱导3只小型猪建立糖尿病模型，作为糖尿病组（diabetesmodelgroup，DM组）；另2只正常饲养，作为非糖尿病组（non—diabetesmodelgroup，NDM组）。利用化学偶联法将RGD多肽接枝到SLA钛片上。每只小型猪上颌骨按预定方案植入6枚直径为5mm的钛片，其中包含3枚SLA钛片（分别为DM—SLA组和NDM—SLA组）、3枚RGD多肽修饰的SLA钛片（分别为DM—RGD—SLA组和NDM—RGD—SLA组）。在植入钛片后1个月处死动物，取上颌骨，4％多聚甲醛固定。用MicroCT、硬组织切片以及SPSS21．0软件对实验结果进行分析。结果MieroCT检测结果显示，在观察期内各组骨密度（BMD）、骨小梁厚度（Th．Th）、骨小梁数量（Th．N）和骨小梁间隙（Th．Sp）的差异均无统计学意义（均P〉0．05）。硬组织切片分析显示，NDM—RGD—SLA组的钛片周围骨结合率（64．8％±18．4％）与DM—RGD—SLA组（33．9％±11．7％）、NDM—SLA组（39．5％±20．9％）和DM—SLA组（36．4％±15．9％）比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；而其他各组两两比较，差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论（1）RGD多肽对SLA钛片周围骨结合有明显促进作用。（2）在实验的观察期内，动物是否患有糖尿病，对钛片与颌骨的骨结合无明显影响；当SLA钛片复合RGD多肽后，能明显促进非糖尿病动物的骨结合，但对糖尿病动物的骨结合作用不明显，提示糖尿病可能抑制了RGD多肽的促成骨作用。

简介：本实验的目的是从临床学，影像学、组织学的角度来评价口内非牙支抗式的粘膜下的改良式矫治器对微型猪下颌骨的离断扩展效应。这种矫治器是在螺旋扩大器的两侧焊接不锈钢翼，每个翼上有两个用于固定的栓钉孔。使用时用栓钉将此矫治器固定于骨或骨皮质断端的两侧。在三只生...