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  • 简介:目的:通过弱化筛选基因二氢叶酸还原酶基因(dhfr),构建双顺反子全抗体表达载体,实现全抗体在CHO细胞中高效表达。方法:将dhfr基因分为分别编码1-105和106~187氨基酸残基2部分,分别通过linker与亮氨酸拉链GCN4融合,分别通过内部起始位点序列与抗体轻重链基因偶联,构建成2个双顺反子表达载体pIRESLZdhfr—H和pIRESLZdhfrL。用脂质体2000转染CHO-dhfr-细胞,用无次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷IMDM筛选培养基筛选阳性克隆。结果:筛选到阳性克隆表达水平为1.47-3.5μg/(106细胞·d),经氨甲蝶呤(MTX)梯度加压,在MTX浓度为5×10^-8mol/L时,表达水平达到11.5μg/(10^6细胞·d)。结论:构建了基于亮氨酸拉链二聚化基础dhfr弱化方式双顺反子表达载体,实现了全抗体在CHO—dhfr-细胞中高效表达。

  • 标签: 双顺反子表达载体 二氢叶酸还原酶基因 弱化 全抗体
  • 简介:为获得高效抗氧化菌株,采用直接提取方式从20个大型真菌菌株菌丝体培养液中提取抗氧化活性物质,采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸法、DPPH法测定各菌株菌丝体培养粗提液对超氧阴离子自由基(O2-)、羟基自由基(·OH)及1,1-二苯代苦味酰基自由基(DPPH-)清除作用.结果表明:各菌株菌丝体培养粗提液对(O2)、·OH及DPPH-均有一定清除作用,其中菌株NG菌丝体培养粗提液对OH-清除效果最好,清除率为75.56%;菌株02菌丝体培养粗提液对(O2-)清除效果最好,清除率为37.51%;菌株EG菌丝体培养粗提液对DPPH-清除效果最好,清除率为66.91%.

  • 标签: 抗氧化 菌的筛选 菌丝体培养 粗提液 真菌菌株 清除效果
  • 简介:锥栗在将乐县广泛分布,笔者经多年探索,整理了一套适合山地锥栗生产锥栗育苗、定植、早期密植高效栽培技术。

  • 标签: 筐培 密植 高效栽培
  • 简介:营林生产质量统计主要是针对在营林生产活动中具体营林情况进行分类统计。分类方式主要有按当年造林面积分类、按造林方式分类、按用途分类、按是否速生丰产林分等类。并对这些分类中苗木壮苗率、I级苗率、合格苗率等进行统计。并进行营林经营成果与效益统计,统计指标主要内容包括:森林覆被率、企业森林覆被率、林木覆被率、单位面积蓄积量、单位面积林木生长量以及营林经济效益指标。通过对这些技术指标的统计与分析就可以进一步了解营林生产作业效率、营林企业生产效益等与营林生产质量相关关键指标。本文就是对这些统计相关指标做深入探讨。

  • 标签: 营林生产 质量统计
  • 简介:由中科院生命科学与生物技术局、科技部中国生物技术发展中心、天津市科委和中国生物工程学会主办,中科院微生物所、中科院天津工业生物技术研发中心(筹)和天津市高新技术成果转化中心联合承办“中国工业生物技术发展高峰论坛2008”4月18日上午在天津港保税区开幕。来自海内外30余家企业、60多个高校和科研机构400余名代表参加了本届论坛活动。

  • 标签: 工业生物技术 生产模式 中国生物工程学会 高新技术成果转化 中科院 天津市
  • 简介:对7个外生菌根真菌菌株在不同石油浓度培养基中生长及其对石油降解作用进行了研究。结果表明:(1)不同菌株在同一石油浓度培养基中生长速度不同,同一菌株在不同石油浓度培养基中生长速度亦不同。菌株010和菌株025在不同石油浓度培养基中生长速度均较其他菌株快。菌株010菌丝干重随着石油浓度增加而增加,当石油质量浓度为500mg/L时,菌丝干重达到最大值,高于对照5.27%,石油对其生长产生了促进作用;当石油质量浓度为700mg/L时,菌丝干重低于对照,随着石油质量浓度升高,菌株生长呈下降趋势。石油质量浓度为100mg/L时,菌株025生长最慢,菌丝干重低于对照9.1%。随着石油浓度增加,菌株生长加快,当石油质量浓度为500mg/L时,菌丝干重高于对照;当石油质量浓度为700mg/L时,菌株025菌丝干重最高,高于对照25.65%。随着石油浓度再度升高,菌株生长呈下降趋势。(2)不同菌株在同一石油浓度下对石油降解能力不同,同一菌株在不同石油浓度下对石油降解能力亦不同。菌株025对石油降解能力最强,对石油降解能力随着石油浓度升高而提高。当培养基中石油质量浓度为900mg/L时,菌株025对石油降解率最高,达到73.65%。(3)菌株0100、09、035、LH004菌丝生物量与对石油降解能力呈正相关。

  • 标签: 石油 外生菌根真菌 生长量 石油降解
  • 简介:LTR位于HIV前病毒同DNA基因组两末端,Gag基因位于5′端LTR下游。LTR对转录调控作用主要是由5′端LTR进行。LTR具有启动子作用,在结构上具有真核启动子典型特征。另外,HIV-1Gag蛋白还有能够自我装配成病毒样粒子(viruslikeparticle,VLP)并从细胞中释放出来重要特性。我们利用痘苗病毒表达系统,探索了在细胞质环境中LTR中多种功能结构对Gag蛋

  • 标签: GAG蛋白 表达调控 重组痘苗病毒 HIV-1 病毒样粒子 启动子
  • 简介:目的:建立北京株水痘疫苗生产工艺,采用此生产工艺生产水痘减毒活疫苗。方法:采用细胞工厂培养2BS细胞,感染北京株水痘-带状疱疹病毒工作种子批,同时感染Oka株水痘-带状疱疹病毒工作种子批作对照,经洗涤、离心、收获、原液合并、冻干制备水痘减毒活疫苗,并进行各项检定。结果:对照两种不同毒株生产水痘减毒活疫苗无明显差异,且各项检测指标均符合要求。结论:根据结果显示,可使用此毒株生产工艺大规模生产北京株水痘疫苗,与Oka株生产水痘疫苗无差异。如果用此毒株生产水痘疫苗供应市场,将会打破Oka株水痘疫苗国内市场垄断。

  • 标签: 水痘减毒活疫苗 细胞工厂 2BS细胞 北京株水痘-带状疱疹病毒工作种子批
  • 简介:油茶被划归成木本油料特有的类别,培植区段很广。油茶树提炼得来油料,固有的营养属性最优。发展各地段内油茶产业,能促动整体范畴内林业进展,促动林业特有的经济延展。为此,有必要明辨油茶生产注重事宜,摸索最优产出路径。

  • 标签: 油茶生产 林业产业 发展途径
  • 简介:2009年5月在马来西亚吉隆坡召开新闻发布会上,科学家宣布完成了对油棕榈基因组完整测序、拼接和功能注释,这为人们在提高这一具有重要商业意义植物生产力和可持续性道路上树立了重要里程碑。该研究倡议还分析了油棕榈生长过程中各个阶段基因表达,以便通过测序12个转录组来阐明棕榈油生物合成机制。

  • 标签: 油棕榈 基因组 拼接 水准 生物合成机制 新闻发布会
  • 简介:近年来,随着现代化经济建设水平不断提高,制药企业发展速度日益加快,制药企业生产车间规范化管理也不断提上日程.技术水平与管理方法创新在一定程度上促进了制药生产车间科学化管理,6S管理在制药生产车间广泛应用,使制药生产车间管理更细化,最大限度提高了制药生产车间工作人员工作效率,增强了员工工作积极性.本文就6S管理基本内容进行阐述,并对6S管理在制药生产车间应用展开详细论述.

  • 标签: 6S管理 制药生产车间 概念 应用
  • 简介:用纯化CTB后腿肌肉注射免疫小鼠,每次12.5μg,每隔14天加强一次,共注射三次,末次免疫后两周收集血清,免疫小鼠诱导产生了特异性抗CTB抗体。在CHO细胞中,免疫小鼠血清能够中和CT细胞病变效应;小鼠肠结扎实验表明,抗CTB血清能够抑制CT结合细胞表面受体GM1神经节苷脂。这表明转基因烟草产CTB在小鼠中能够产生抗细菌毒素保护免疫力。

  • 标签: 霍乱毒素B亚单位 小鼠 疫苗 免疫
  • 简介:新课标要求教师在教学过程中,要尊重学生主体地位,积极引导学生进行学习,采取高效教学措施,提高教学质量.本文主要介绍了高中生物课堂教学实施中有效策略,以期能够进一步提升教学质量,达到教育目的.

  • 标签: 高中生物 课堂教学 有效策略
  • 简介:目的探索一种新真菌DNA提取方法,该方法操作简便,提取效率高,耗时较短,应用范围广.方法将酶消化和Chelex-100提取DNA方法联合起来,配制一种新DNA提取试剂.通过真菌ITS4和ITS5通用引物进行PCR,对新DNA提取试剂同市售Takaralysisbuffer在DNA提取方面的效能进行评价,同时对DNA浓度和纯度进行测定.结果实验所用34株真菌,自配试剂成功提取出32株真菌DNA;Takaralysisbuffer成功提出27株真菌DNA.对于两种方法都没能提出DNA2株真菌,经液氮研磨破壁后,自制试剂均成功提取;而Takaralysisbuffer仅成功提取DNA1株.结论同市售试剂Takaralysisbuffer比较,自配DNA提取液提取DNA质量相对较高,可用于临床常见感染真菌PCR诊断.对于某些真菌,提取DNA之前先进行菌体破壁是必要.

  • 标签: 蛋白酶K 蜗牛酶 Chelex-100 DNA提取
  • 简介:采用高效液相色谱法(Highperformanceliquidchromatography,HPLC)建立了测定菇柄麦角甾醇含量测定方法。确定提取过程中皂化剂种类和醇碱比后,将样品皂化,萃取后蒸干溶剂,乙醇定容测定。采用Phe—nomenex-C18色谱柱,y(流动相甲醇):V(水)=98:2,流速1.0mL/min,检测波长282nm。结果表明:麦角甾醇线性回归方程为Y=9E+9×106x-8919。9(X:质量浓度,mg/mL),R0=O.9989,0.0l~0.30mg/mL范围内线性关系良好,回收率为97.31%~101.95%。与紫外分光光度法所测结果比较,HPLC法测定菇柄中麦角甾醇含量灵敏、快速、准确,适用菇柄中麦角甾醇含量测定。

  • 标签: 菇柄 麦角甾醇 高效液相色谱法
  • 简介:颗粒剂灌装是制药生产中关键一环内容,设计和采取科学合理灌装方式可以更好地提高制药生产水平和效率.本文就对于制药生产中颗粒剂灌装相关问题进行了分析与探讨.

  • 标签: 制药生产 颗粒剂 灌装方式
  • 简介:本论文在对污水处理工艺认识基础上,重点分析A^2/O工艺,得出A^2/O工艺在污水处理生产不可忽视地位.A^2/O工艺生物处理部分主要由厌氧池、缺氧池和好氧池三个部分组成.厌氧主要是释放磷,同时对有机物进行部分氨化;缺氧池主要是用来脱氮;好氧池能够去除BOD还能进行消化和吸收磷,功能多样.

  • 标签: A^2/O工艺 脱氮除磷
  • 简介:将甘蔗花叶病毒CP基因克隆到表达载体pET22b(+),并在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达,表达蛋白约占总蛋白15%.用此蛋白制备了效价高专化性强抗体.此方法可以解决制备马铃薯Y病毒属病毒血清时遇到病毒提纯产量低和寄主蛋白影响等问题.

  • 标签: 甘蔗花叶病毒 CP基因 表达 抗血清 表达载体