简介：目的：探讨抗凝剂、保存时间和保存温度等分析前因素对流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群的影响。方法：随机采集健康人全血10份,分别用乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）和肝素钠2种抗凝剂抗凝,4℃及室温（18℃-22℃）保存,在不同时间点（〈4h、24h及48h）分别使用荧光抗体标记,用流式细胞术检测CD3＋T淋巴细胞、CD3＋CD4＋辅助性T细胞、CD3＋CD8＋杀伤性T细胞、CD19＋B淋巴细胞及CD16＋CD56＋NK细胞占淋巴细胞的百分比,并采用荧光微球进行各淋巴细胞亚群的绝对计数。结果：与2种抗凝剂各自的室温条件下4h内检测结果相比较,在肝素抗凝剂组中4℃保存至48h,CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、NK细胞的绝对计数显著降低（P〈0.05）;肝素抗凝血与EDTA-K2抗凝血间在4℃及室温保存至24h及48h的淋巴细胞亚群百分比差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：在检测总淋巴细胞亚群比例及绝对计数时,肝素钠抗凝的全血标本应保存在室温下,并在48h内完成检测;EDTA-K2抗凝全血标本则可在4℃及室温下保存,在48h内完成检测。

简介：细胞衰老作为一种细胞应激反应,可使细胞脱离细胞周期,并丧失应对生长因子或有丝分裂原的增殖能力[1]。衰老细胞表现出细胞扁平、胀大等形态学改变,同时衰老相关β-半乳糖苷酶活性增加,复制能力下降,细胞周期阻滞,p53和p21、p16等细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子表达增多,衰老相关异染色质灶形成等[2]。细胞衰老历来被视为永久的生长停滞状态,细胞不能重新进入细胞周期。

简介：目的：探讨黄芩苷对T细胞淋巴瘤细胞的诱导调亡作用及其机制。方法：采用黄芩苷处理白血病细胞株Jurkat,3-（4,5-二甲基噻唑）-2,5-二苯基四氮唑溴盐法测定细胞生长抑制率,细胞甩片瑞氏染色法观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶caspase-3、caspase-8、caspase-9及AKT/ERK-MYC信号通路的表达,并用Calcusyn软件分析其与阿霉素、环磷酰胺联合使用的药效。结果：黄芩苷作用于Jurkat细胞48h后的半数抑制浓度（IC50）为（24.32±1.01）μg/mL,且其生长抑制作用呈药物浓度-时间依赖性。黄芩苷组细胞呈现细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测凋亡细胞百分比亦明显高于对照组,且呈药物浓度依赖性,而这种作用可被pan-caspase抑制剂ZVAD-FMK逆转。黄芩苷作用于Jurkat细胞48h后,活化剪切型caspase-3、caspase-8、caspase-9表达均上调,AKT/ERK-MYC通路被抑制。此外,黄芩苷与阿霉素联合使用具有显著的协同效应。结论：黄芩苷可有效抑制T细胞淋巴瘤细胞增殖,诱导内源性和外源性凋亡,抑制AKT/ERK-MYC信号通路,并与阿霉素有显著的协同效应,具有良好的临床应用前景。

简介：目的：探讨前列腺素受体家族在低氧诱导的肺动脉高压平滑肌细胞中的表达变化。方法：体内实验,以低氧（10%O2）3周诱导建立小鼠肺动脉高压模型,分离肺动脉;体外实验,分别对小鼠源性和人源性的肺动脉平滑肌细胞进行低氧（1%O2）24h的诱导。提取相应组织或细胞的RNA,以反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增不同前列腺素受体基因片段,并将产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果：无论是小鼠源性还是人源性的肺动脉平滑肌细胞中,前列腺素受体基因基础表达值均以血栓素A2受体TP和前列腺素E受体1（E-prostanoidreceptor1,EP1）为最高,EP2、EP3、EP4和前列腺素I2受体（IP）居中,前列腺素D1受体、前列腺素D2受体和前列腺素F2α受体最少。在低氧诱导后,小鼠肺动脉平滑肌细胞血栓素A2受体基因和EP3受体基因表达上调显著,而前列腺素D1受体、EP1和前列腺素I2受体则明显下调。结论：在低氧诱导下,前列腺素受体基因表达发生不同变化,对筛选不同前列腺素用于肺动脉高压的疗效研究和新药开发及探究其病理机制有重要意义。