简介：摘要目的通过基因芯片技术筛选流感病毒感染小鼠肺部趋化因子通路的差异表达基因，并探讨疏风宣肺解毒方药的干预作用。方法按照随机数字表法将雄性ICR小鼠分为对照组（N组）、流感病毒感染模型组（M组）、盐酸奥司他韦对照组（C组）及疏风宣肺解毒方药大、中、小剂量组（SH、SM、SL组），每组10只。应用流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1（0.05 mL）滴鼻制备小鼠流感病毒性肺炎模型；N组给予0.05 mL生理盐水滴鼻作为对照。SH、SM、SL组在滴鼻感染2 h后应用疏风宣肺解毒方药灌胃，分别为临床治疗剂量的2倍量、等量和1/2量（约为3.8、1.9、1.0 g·mL-1·d-1），连用4 d；C组灌胃盐酸奥司他韦2.5 g·mL-1·d-1；N组和M组灌胃蒸馏水（每日1次、每次0.2 mL）作为对照。于实验第5天取小鼠全肺，计算肺指数，并进行病理切片观察；提取肺组织总RNA，与小鼠全基因芯片杂交，对检测数据进行聚类分析，筛选出趋化因子通路的相关靶基因。扫描杂交芯片，计算芯片探针信号在各给药组与M组的表达强度比值，筛选出差异表达基因，其中P<0.05且log2比值>1为上调基因，P<0.05且log2比值<-1为下调基因。结果与N组比较，M组小鼠肺指数明显升高，且肺组织出现病理学改变，提示流感病毒感染模型制备成功。与M组比较，C组、SH组、SM组、SL组肺指数均明显降低（0.96±0.14、1.45±0.22、1.14±0.18、1.22±0.21比1.72±0.15，均P<0.05），且肺组织病理学改变范围及程度均减轻；但各给药组间无明显差异。基因芯片检测结果显示，N组与M组、SH组与M组、SM组与M组、SL组与M组各组间差异表达基因数量较多。代谢途径富集分析筛选出上述差异表达基因主要富集于趋化因子信号通路；与N组比较，M组上调的差异表达基因主要有趋化因子C-C亚族配体（CCL-3、CCL-5）和趋化因子C-X-C亚族配体（CXCL-9、CXCL-10），log2（M组/N组）分别为6.64、3.51、5.40、6.64；与M组比较，盐酸奥司他韦和疏风宣肺解毒方药各组差异表达基因CCL-3、CCL-5、CXCL-9、CXCL-10均下调，log2（C组/M组）分别为-3.96、-2.26、-3.12、-2.40，log2（SH组/M组）分别为-5.57、-2.37、-1.57、-1.01，log2（SM组/M组）分别为-4.35、-1.47、-1.26、-1.74，log2（SL组/M组）分别为-2.86、-1.86、-1.23、-1.39。结论疏风宣肺解毒方药可通过下调趋化因子的表达水平缓解小鼠的肺部炎症损伤。

简介：摘要目的通过基因芯片技术分析疏风宣肺解毒方对流感病毒性肺炎小鼠炎性细胞因子差异表达基因的影响。方法按随机数字表法将雄性ICR小鼠分为正常组（N组）、流感病毒性肺炎模型组（M组）、奥司他韦对照组（C组）及疏风宣肺解毒方高、中、低剂量组（SH、SM、SL组），每组10只。通过流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1（0.05 mL）滴鼻建立小鼠流感病毒性肺炎模型；N组以0.05 mL生理盐水滴鼻。SH、SM、SL组于滴鼻感染后2 h灌胃疏风宣肺解毒方，含药浓度分别为临床用药的2倍量、等量、1/2量（约为3.8、1.9、1.0 kg/L），每日1次，每次0.2 mL，连用4 d；C组灌服奥司他韦2.5 kg/L；N组和M组灌服蒸馏水。第5天取小鼠全肺，提取肺组织总RNA，与小鼠全基因芯片杂交并检测，筛选参与炎症相关通路中的靶基因。扫描杂交芯片，计算芯片探针信号在各组与M组的强度表达比值，筛选差异表达基因，其中P<0.05且log2比值>1为上调基因，P<0.05且log2比值<-1为下调基因。采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测白细胞介素（IL-1、IL-8）、细胞间黏附分子- 1（ICAM-1）的mRNA表达。结果与N组相比，M组差异基因表达IL-1、IL-8、ICAM-1明显上调（log2N组/M组分别为2.62、2.07、1.41，均P<0.05）。与M组相比，SH、SM、SL、C组差异基因表达IL-1、IL-8、ICAM-1均明显下调（log2SH组/M组分别为-1.91、-1.85、-0.88，log2SM组/M组分别为-3.10、-1.74、-1.84，log2SL组/M组分别为-1.89、-1.39、-0.53，log2C组/M组分别为-2.46、-1.52、-1.44，均P<0.05）。RT-PCR检测结果显示，M组IL-1、IL-8、ICAM-1的mRNA表达水平均较N组显著升高〔IL-1（2-ΔΔCT）：4.63±0.24比1.01±0.13，IL-8（2-ΔΔCT）：6.28±0.13比1.02±0.09，ICAM-1（2-ΔΔCT）：2.90±0.18比1.02±0.12，均P<0.05〕。SH、SM、SL和C组IL-1、IL-8、ICAM-1的mRNA表达水平均较M组组显著降低〔IL-1（2-ΔΔCT）：2.12±0.32、1.71±0.07、2.05±0.16、1.66±0.13比4.63±0.24，IL-8（2-ΔΔCT）：3.89±0.13、2.08±0.19、2.98±0.20、2.02±0.12比6.28±0.13，ICAM-1（2-ΔΔCT）：1.72±0.93、1.34±0.14、1.53±0.25、1.17±0.12比2.90±0.18，均P<0.05〕，但SH、SM、SL和C组间差异无统计学意义。结论疏风宣肺解毒方通过下调IL-1、IL-8、ICAM-1炎性细胞因子相关基因的表达，抑制流感病毒感染后小鼠的炎症损伤。

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