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  • 简介:摘要目的观察T-2毒素对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、人类白细胞分化抗原(CD)44及整合素表达的影响。方法取1 ~ 2日龄SPF级Wistar乳鼠2只制备原代软骨细胞,进行体外培养,采用甲苯胺蓝染色法进行软骨细胞鉴定,细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测不同剂量T-2毒素(0、2、4、6、10、12、20 ng/ml)染毒24、48、72 h对软骨细胞的毒性作用,根据细胞存活率确定终浓度为0(对照)、2、4、6、8 ng/ml的T-2毒素作用48 h为后续实验条件。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α及CD44含量;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测软骨细胞整合素α5、β1蛋白表达水平。结果在相同作用时间下,不同剂量组间软骨细胞存活率比较,差异均有统计学意义(F = 130.759、258.250、123.337,P均< 0.01)。作用48 h,不同剂量T-2毒素组软骨细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CD44含量比较,差异均有统计学意义(F = 10.613、4.805、2.943、12.395,P < 0.01或< 0.05)。其中,2、4、6、8 ng/ml组IL-6含量均高于对照组(P均< 0.05);6、8 ng/ml组IL-1β含量均高于对照组和2 ng/ml组,且6 ng/ml组明显高于4 ng/ml组(P均< 0.05);6、8 ng/ml组TNF-α含量均低于对照组(P均< 0.05);2、4、6、8 ng/ml组CD44含量均低于对照组(P均< 0.05)。作用48 h,不同剂量T-2毒素组软骨细胞整合素α5、β1蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(F = 4.635、4.376,P均< 0.05)。其中,6、8 ng/ml组整合素α5蛋白表达水平均明显低于对照组(P均< 0.05),整合素β1蛋白表达水平均明显高于对照组(P均< 0.05)。结论T-2毒素可能通过上调IL-6、IL-1β和整合素β1的表达,同时下调TNF-α、CD44和整合素α5的表达,破坏软骨细胞细胞外基质的平衡,造成软骨细胞损伤。

  • 标签: 软骨细胞 T-2毒素 炎性细胞因子 白细胞分化抗原44 整合素