简介：摘要目的探讨结核分枝杆菌mpt64 mRNA作为结核病化疗疗效监控的细菌学分子标志物的可行性。方法2021年1月至4月，于广州市胸科医院分枝杆菌菌种库中，随机选取35株对4种一线抗结核药物敏感的临床分离株进行培养，分别经异烟肼药物浓度为0、0.2、0.5 μg/ml作用48 h后，提取其全RNA组反转录为cDNA，采用实时荧光聚合酶链式反应（PCR）检测mpt64 mRNA表达水平的变化。结果0、0.2、0.5 μg/ml异烟肼药物浓度处理组在作用48 h后，35株结核分枝杆菌临床分离株的mpt64 mRNA Ct值分别为（25.34±2.56）、（29.09±3.25）、（30.14±3.23）。相较于无药对照组，0.2、0.5 μg/ml异烟肼处理组mpt64 mRNA表达水平降低，差异有统计学意义（均P＜0.05）。结论mpt64 mRNA表达水平可在短时间内反映出药物对结核分枝杆菌的作用效果，有望成为结核病化疗疗效监测的分子标志物。

简介：无

简介：摘要目的探讨利用基于荧光素二乙酸酯（FDA）的流式细胞术检测结核分枝杆菌（MTB）混合菌液中活菌比例的性能，为应用流式细胞术定量检测与分析MTB异质性耐药方法的创建提供实验依据。方法将10株1麦氏浊度MTB纯培养活菌悬液和其相应的1麦氏浊度85℃加热30 min处死的MTB菌液按一定比例混合得到MTB死活菌混合菌液（其中活菌比例分别为100%、75%、50%、25%和0%），应用FDA分别对其进行染色后，流式细胞仪检测其平均荧光强度（MFI），求其与对应100%活菌样本MFI值的比值来模拟MTB异质性耐药检验中的FDA敏感指数，双变量直线回归分析得到敏感指数与实际活菌比例之间的直线回归方程，并利用该方程计算另外10组死活菌混合菌液样本中MTB活菌比例。结果（1）死菌与活菌MTB样本经FDA染色后MFI值比较差异有统计学意义（P<0.05），该方法用于区分死菌与活菌的界值为1 834，用该界值鉴定其余20个死、活未知的MTB样本，其检测的灵敏度为100%、特异度为100%。FDA染色能够明确鉴别MTB的死、活。（2）10组已知活菌比例的MTB死活菌混合菌液样本经FDA染色后各比例之间MFI值比较差异有统计学意义（P<0.05），敏感指数（Y）与混合样本中活菌比例（X）之间的直线回归方程：Ŷ=0.986X+0.016，该直线回归方程差异有统计学意义（P=0.000）。（3）应用这种染色方法对其余50个MTB死活菌混合菌液样本进行检测，计算活菌比例与实际活菌比例之间差异无统计学意义（P>0.05），基于FDA染色方法的流式细胞术可用于MTB死活菌混合菌液样本中活菌比例的检测。结论通过基于FDA染色的流式细胞术具有准确检测MTB混合菌液样本中活菌比例的潜力，该方法在MTB异质性耐药检测中将具有广阔的应用前景。

简介：摘要目的探讨MIRU-VNTR基因分型技术用于分析广州地区结核病传播关系的可行性。方法以结核患者居住地所属乡镇村组或社区街道相同为前提，假定居住所属地相同结核患者间存在传播关系，拟定广州地区结核病传播链。培养结核分枝杆菌临床分离株并提取DNA，通过PCR扩增进行29位点MIRU-VNTR基因分型分析，并计算HGDI分辨力指数。以基因型成簇与否评价传播链内结核患者间传播关系的有无。结果拟定了178条广州地区结核病传播链，复苏得到456株结核分枝杆菌临床分离株，提取获得其基因组DNA并扩增了29个VNTR位点，其组合HGDI分辨力指数为0.986。基因成簇性分析显示，有2条传播链内患者结核分枝杆菌临床分离株基因成簇，成簇率为1.10%。基因成簇性的2条传播链患者分别居住于同街道，发病时间间隔在2年以内，分别为9和14个月。结论29位点MIRU-VNTR基因分型技术可用于广州地区结核分枝杆菌基因型分析，能否用于结核病传播关系需要进一步深入研究。