简介：摘要目的探讨D-柠檬烯对精索静脉曲张(VC)大鼠生精功能的保护作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为4组，假手术组(A组)，假手术+D-柠檬烯组(B组)，VC组(C组)，VC+D柠檬烯组(D组)。C、D组行左肾静脉缩窄术建立VC大鼠模型，B、D组术后每日腹腔注射D-柠檬烯200 mg/kg，A、C组注射等量生理盐水，4周后取左侧睾丸检测。苏木精-伊红(HE)染色，观察睾丸组织形态变化；分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡指数；免疫组织化学和蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达水平；组间比较采用t检验。结果A、B组大鼠睾丸未见明显组织学变化，C组可见明显病理损伤，D组较C组损伤明显改善；C组SOD含量(0.23±0.03)显著低于A组(0.79±0.04)(t＝22.183，P<0.05)，D组SOD含量(0.51±0.03)高于C组(t＝13.123，P<0.05)，C组MDA含量(5.59±0.39)显著高于A组(1.30±0.12，t＝18.386，P<0.05)，D组MDA含量(3.89±0.20)低于C组(t＝6.734，P<0.05)；C组凋亡(32.43±3.88)明显高于A组(2.41±0.67，t＝17.045，P<0.05)，D组凋亡细胞(17.12±2.66)低于C组(t＝7.273，P<0.05)；免疫组织化学和Western blot结果显示，C组的bax和Caspase-3蛋白表达量明显高于A组(1.179±0.070、0.469±0.220比0.453±0.043、0.143±0.017，t＝15.157、20.431，P值均<0.05)，bcl-2蛋白表达量低于A组(0.476±0.021比1.148±0.084，t＝13.414，P<0.05)；D组的的bax和Caspase-3蛋白表达量明显少于C组(0.689±0.054、0.282±0.031比1.179±0.070、0.469±0.220，t＝9.540、8.442，P值均<0.05)，bcl-2表达水平明显高于C组(0.794±0.033比0.476±0.021，t＝14.222，P<0.05)。结论D-柠檬烯可通过抗氧化和抗凋亡作用，对精索静脉曲张大鼠生精功能起保护作用。

简介：摘要目的探讨磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞焦亡的作用及其机制。方法建立睾丸GC-1细胞(美国ATCC细胞库)缺氧复氧模型，采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同复氧损伤时间点PTEN的表达变化；分别采用免疫荧光实验、蛋白质印迹法(Western blot)检测转染PTEN后对GC-1细胞焦亡相关蛋白NLRP3和Caspase-1表达水平的影响。组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果对照组及缺氧复氧组(0、6、12、24 h)PTEN的mRNA表达水平分别为(1.00±0.21、3.48±0.35、3.75±0.38、4.25±0.40、4.06±0.37)。与未缺氧GC-1细胞的对照组比较，随着复氧损伤时间的增加，PTEN表达明显增高，并在复氧12 h达到峰值(F＝43.21，P<0.05)。Western blot结果显示，缺氧复氧组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.52±0.04、0.41±0.04)高于对照组(0.24±0.03、0.20±0.03，t＝9.700，P<0.05；t＝7.275，P<0.05)。过表达PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.75±0.06、0.62±0.05)高于其对照组(0.53±0.04、0.42±0.03)明显(t＝5.284，P<0.05；t＝5.941，P<0.05)。沉默PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.36±0.03、0.32±0.03)低于对照组(0.52±0.04、0.41±0.03)明显(t＝-5.543，P<0.05；t＝-3.674，P<0.05)。结论PTEN在GC-1细胞中呈高表达，其可能通过改变GC-1细胞焦亡水平，从而影响睾丸IRI的发生发展。